国家科技重大专项(2008ZX-10003-013)
- 作品数：11 被引量：48H指数：3
- 相关作者：吴雪琼梁艳阳幼荣张俊仙史迎昌更多>>
- 相关机构：解放军第309医院第四军医大学中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项World Health Organization国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Ag85A/B嵌合DNA疫苗治疗小鼠敏感结核病疗效的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究结核分枝杆菌Ag85A/B嵌合DNA疫苗治疗小鼠敏感结核病的效果。方法用结核分枝杆菌标准株H37Rv尾静脉注射50只雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3 d开始,分别用生理盐水(A组)、pVAX1载体(B组)、利福平(C组)、草分枝杆菌F.U.36注射液(D组)、Ag85A/B嵌合DNA疫苗(E组)治疗,每2周肌肉注射1次DNA疫苗,共3次。在治疗结束后2周,杀鼠,取小鼠肺和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数。结果与A组比较,D组、E组肺脏病变有不同程度减轻,病变局限,3/5区域肺泡结构完整,清晰,细胞分布均匀。与A组相比,C、D、E组肺脏菌落数依次减少2.11 log、0.76 log、0.81 log;肝脏菌落数依次减少2.11 log、0.74 log、1.11 logs(P<0.01)。结论 Ag85A/B嵌合DNA对小鼠敏感结核病具有较好的治疗效果。
- 梁艳吴雪琼李忠明李宁张俊仙阳幼荣白雪娟余琦侯英刘翠华安慧茹史迎昌刘银萍王博王兰刘成龙
- 结核病DNA疫苗研究进展被引量：6
- 2011年
- 结核病是由结核分枝杆菌引起的一种传染病。近年来,由于人类免疫缺陷症病毒与结核杆菌伴发感染增加以及结核杆菌多重耐药性菌株的出现,使全球结核病疫情增高,给全球结核病的防治提出了新的挑战。卡介苗作为预防结核病的主要措施,其免疫效果并不十分确定。安全、有效及廉价的结核病DNA疫苗成为结核病防治的研究热点。该文对结核病预防和治疗性DNA疫苗、可能的免疫机制、免疫策略的进展进行综述。
- 梁艳吴雪琼
- 关键词：DNA疫苗结核病免疫策略免疫机制
- 噬菌体技术用于结核病诊断的研究进展被引量：1
- 2011年
- 结核病是一种主要由结核分枝杆菌（Mycobac—teriumtuberculosis，MTB）一少数为牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌感染而引发的危害严重的传染病。据WHO统计，全球约1／3的人口感染MTB，每年新增患者900万，并有300万人死于该病。因此，尽早、及时地诊断出结核患者，不仅能及时治疗结核患者，也有利于结核病的控制。
- 王伟罗泰来柏银兰
- 关键词：结核病诊断噬菌体分枝杆菌感染牛分枝杆菌WHOMTB
- 结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫原性和治疗作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫原性和治疗作用。方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用生理盐水、pVAX1载体、微卡菌苗、Ag85A DNA疫苗免疫,每2周肌内注射1次,共3次。研究Ag85A DNA疫苗的免疫原性。用结核分枝杆菌H37Rv通过尾静脉注射40只BALB/c小鼠,分别用生理盐水、pVAX1载体、利福平、Ag 85A DNA疫苗治疗。治疗结束后2周杀鼠,观察肺和脾病理改变,称取重量、做菌落计数,用ELISPOT方法检测小鼠分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞斑点数。结果与其他组比较,Ag 85A DNA疫苗能诱导产生大量Ag85A特异的分泌IFN-γ的T淋巴细胞(S=11.832,P=0.0080)。肺组织病理显示:生理盐水组肺组织病变严重、广泛;载体组比生理盐水组病变略轻,但病变仍较重、广泛;Ag 85A DNA疫苗组肺组织病变减轻、局限3,/5区域肺泡结构完整,清晰;利福平组肺组织无病变。与生理盐水组比较,Ag85A DNA疫苗组和利福平组肺脏菌落数分别减少0.73 log和2.11 log;肝脏菌落数分别减少0.88 log和2.11 log(P<0.01)。结论 Ag85A DNA疫苗对小鼠结核病具有较好的治疗效果。
- 梁艳吴雪琼张俊仙阳幼荣李忠明
- 关键词：DNA疫苗AG85A结核分枝杆菌免疫原性
- DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究结核分枝杆菌DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的效果。方法用结核分枝杆菌耐利福平和异烟肼临床分离株HB361尾静脉注射60只雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为6组,感染后第3 d开始,分别用生理盐水(A组)、pVAX1载体(B组)、利福平(C组)、HSP65DNA疫苗(D组)、Ag85A DNA疫苗(E组)、Ag85A/ESAT6嵌合DNA疫苗(F组)治疗60 d,DNA疫苗每隔15 d肌肉注射1次,共5次。治疗结束后3周,分别取肺和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数。结果治疗结束后3周,与对照组比较,D组、E组和F组肺脏病变有不同程度减轻,病变局限,2/3区域可见正常的肺泡结构,肺泡轮廓相对清晰,细胞分布均匀。与A组相比,D组、E组和F组肺脏菌落数分别减少了0.34、0.50和0.26 logs;脾脏菌落数依次减少了0.37、0.46和0.28 logs(P<0.05,P<0.01)。结论Ag85A DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病效果优于HSP65 DNA和Ag85A/ESAT6嵌合DNA疫苗。
- 梁艳吴雪琼李忠明张俊仙李宁阳幼荣余琦白雪娟宋晶莹王兰史迎昌刘洁刘成龙朱琰徐雪玉
- 关键词：结核DNA分枝杆菌结核
- 结核分枝杆菌重组Ag85A、Ag85B蛋白免疫原性的研究被引量：3
- 2011年
- 目的研究结核分枝杆菌重组Ag85A(rAg85A)和/或Ag85B(rAg85B)蛋白与母牛分枝杆菌菌苗(Mycobacteri-um vaccae,MV)联合免疫的免疫原性。方法 60只雌性BALB/c小鼠随机分为下列6组:(1)阴性对照组:磷酸盐缓冲液(PBS)组,(2)阳性对照组:卡介苗(BCG)组,(3)阳性对照组:MV组,(4)实验组:rAg85A-MV组,(5)实验组:rAg85B-MV组及(6)实验组:rAg85A-rAg85B-MV组。每2周免疫1次,共免疫3次。末次免疫结束后第14天杀鼠,用ELISA法检测血清中IgGI、gG1和IgG2a水平;ELISPOT检测脾脏分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞斑点数;流式细胞术检测全血单个核细胞内Th1和Th2百分比。结果三个实验组小鼠血清抗体水平均明显高于三个对照组(P<0.001);三个实验组和两个阳性对照组小鼠的T淋巴细胞斑点数均明显高于阴性对照组(P<0.05);rAg85A-rAg85B-MV组小鼠Th1百分比明显高于其余五组(P<0.001),三个实验组Th1/Th2比值均明显高于三个对照组(P<0.05)。结论结核分枝杆菌rAg85A和rAg85B蛋白均具有很强的免疫原性,与MV联合免疫可增强其Th1型细胞免疫应答。
- 尹文东于庭梁艳阳幼荣肖漓王兰王莹史迎昌张俊仙吴雪琼
- 关键词：结核分枝杆菌AG85AAG85B母牛分枝杆菌疫苗
- 应用结核病DNA疫苗治疗小鼠耐多药结核病的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 研究结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗单独或联合药物治疗小鼠耐多药结核病的效果,为建立耐多药结核病的免疫治疗新策略和新方案奠定基础.方法 用结核分枝杆菌高耐利福平、低耐异烟肼临床分离株HB361尾静脉注射17～19 g的6～8周龄雌性BALB/C小鼠后,将小鼠随机分为6组,每组10只.感染后第2天开始,分别用pVAX1载体（A组）、利福平（B组）、吡嗪酰胺（C组）、Ag85A质粒DNA疫苗（D组）、Ag85A质粒DNA疫苗联合利福平（E组）、Ag85A质粒DNA疫苗联合吡嗪酰胺（F组）治疗60 d.治疗结束后4周,分别取肺、肝和脾观察病理改变,称取重量,做菌落计数.结果 小鼠感染4周后,肺内菌量达到1.5×107 CFU,脾内菌量达到1.1×106 CFU.A、B组小鼠死亡率均为10%,其余各组小鼠均存活.治疗结束后4周,肺组织病理显示,各治疗组肺组织病变均有不同程度减轻,病变局限,可见正常的肺泡结构,肺泡轮廓相对清晰.与A组比较,C、D、E、F组肺组织菌落数分别减少了1.18、1.35、1.38、1.08 logs,脾脏菌落数分别减少了0.91、1.00、1.26、1.03 logs（P＜0.01）.结论 结核分枝杆菌Ag85A质粒DNA疫苗单独或联合药物治疗小鼠耐多药结核病均有显著疗效.Ag85A质粒DNA疫苗与抗结核药物联合治疗是治疗耐多药结核病的最有前途的免疫策略.
- 梁艳吴雪琼张俊仙李宁阳幼荣余琦宋晶莹李忠明王博安慧茹史迎昌白雪娟刘成龙
- 关键词：结核分枝杆菌DNA疫苗耐多药结核病
- 不同剂量结核病DNA疫苗的电转染免疫原性研究被引量：3
- 2014年
- 目的 研究不同剂量结核病DNA疫苗电转染后的免疫原性.方法 40只BALB/c小鼠通过随机数字表法分为8组,每组5只.其中4组分别用100 μl生理盐水和10 μg、50 μg、100 μg结核分枝杆菌Ag85A DNA肌内注射免疫小鼠;另4组用100 μl生理盐水和10 μg、50 μg、100 μgAg85ADNA肌内注射加电转染免疫小鼠.每2周免疫1次,共3次.最后1次免疫后2周杀死小鼠.用ELISA方法检测小鼠脾细胞培养上清液中γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素4（interleukin 4,IL-4）水平;用流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞（PBMC）分泌IFN-γ的辅助性T细胞（helper T cell,Th）1细胞百分比、分泌IL-4的Th2细胞百分比,以及Th1与Th2的细胞比值.用SAS 9.2软件处理数据,实验数据以“-x±s”表示,对有关数据进行两因素析因设计的方差分析,两两比较采用t检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 免疫结束后2周,小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平,50 μg[（646.05±342.53） pg/ml]和100 μgAg85ADNA肌内注射组[（738.61±372.68） pg/ml]显著高于生理盐水组[（1.73±3.88）pg/ml]（f值分别为4.065、4.647,P值均＜0.05）和10 μg Ag85A DNA组[（87.83±120.82）pg/ml]（t值分别为3.513、4.094,P值均＜0.05）;10 μg Ag85A DNA电转染组[（357.06±105.18） pg/ml]显著高于生理盐水组（t=2.247,P＜0.05）,高于100 μg Ag85ADNA电转染组[（86.08±135.73） pg/ml],但差异无统计学意义（t=1.706,P＞0.05）;50 μg Ag85ADNA电转染组[（648.60±439.41）pg/ml]显著高于生理盐水组（t=4.081,P＜0.05）和100 μg Ag85A DNA电转染组（t=3.539,P＜0.05）.与直接肌内注射组IFN-γ水平[（87.83±120.82） pg/ml]比较,10 μg Ag85A DNA电转染组增高3倍[（357.06 pg/ml）/（87.83 pg/ml）]; 50 μg Ag85A DNA肌内注射组[（646.05±342.53） pg/ml]与电转染组[（648.60±439.41）pg/ml]比较,差异无统计学意义（t=-0.016,P＞0.05）;100 μg Ag85A DNA电转染组[（86.08±135.73）pg/ml]较肌内注射组[（738.61
- 梁艳肖漓白雪娟高钰阳幼荣张晓燕陈丹王兰史迎昌张俊仙李忠明吴雪琼
- 关键词：电穿孔免疫
- 新型结核病疫苗的研究现状与发展趋势被引量：22
- 2012年
- 目前结核病依然是全球感染性疾病的第一＂杀手＂,Mtb耐药问题越来越严重,艾滋病、移民和贫困等社会问题使得结核病在一些发达国家开始回升。我国的结核病疫情和耐药情况都较严重,2011年全国第五次结核病流行病学抽样调查结果显示我国结核病年发病人数约为130万,占全球发病的14.3%,位居全球第2位。
- 吴雪琼
- 关键词：结核病疫苗耐药情况感染性疾病结核病疫情社会问题发病人数
- 新型结核疫苗的研究进展被引量：2
- 2011年
- 结核病是一种古老的疾病。据估计,全世界有1/3的人口感染结核分枝杆菌（mycobacterium tuber-culosis,MTB）,每年大约有200万结核病患者死亡,90%的感染者为潜伏感染,病原体以休眠的方式存在于机体内,约有10%的感染者为活动性结核患者。在一些发展中国家,对结核病的预防和治疗相当落后,结核病仍然阻碍社会经济的发展。
- 郝彦斐柏银兰徐志凯
- 关键词：结核疫苗结核病患者结核分枝杆菌活动性结核感染者机体内
