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国家重点基础研究发展计划(2011CBA01000): 作品数：56 被引量：228H指数：8; 相关作者：杨仕明郭维维李佳楠孙建和任丽丽更多>>; 相关机构：中国人民解放军总医院南开大学中国农业大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

Mitf-m敲除小鼠的基因差异表达分析: 2016年; 目的使用RNA-Seq技术分析Miif-m敲除鼠与野生鼠的血管纹转录组，研究Mitf-m基因敲除后的差异表达基因及相关改变的分子机制。方法分别取Miif-m敲除鼠（Mitfmi-△M/mi-△M；MM组）与野生鼠（Miif-m＋/＋；ww组）的血管纹进行总RNA提取；制备cDNA文库，用Illumina HiSeq 2000测序系统行高通量测序。利用软件Tophat2．2．0将cleanreads比对到参考基因组；分别用软件RSeQS-2．3．2和cufflinks来检测测序结果的均一性和基因表达水平。使用edgeR和DESeq程序筛选差异表达基因（differential expressed genes，DEGs）；选择下调DEGs，用KOBAS2．O进行基因本体（geneontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）代谢途径的富集分析。结果MM组与WW组在参考基因组上mapping的cleanreads数分别为42463888和39718542，分别有88．7％和87．4％的reads是唯一映射，说明RNA-Seq结果可靠。DEGs筛查结果表明，相对于WW组，Mftf-m敲除鼠血管纹有45个DEGs，上调表达基因有7个，下调表达基因有38个。GO富集分析发现下调表达基因与黑色素的合成和代谢过程、色素沉着有关，值得关注的是与内向整流钾离子通道Kcnj10和Kcnj13相关。KEGG富集分析显示下调表达基因主要富集于黑色素生成通路。结论RNA-Seq分析拓展了Mftf-m基因调控网，为探究Mitf-m突变所致听力-色素综合征的分子机制及特异性研究Mitf不同转录子的功能奠定了基础。; 王克双王晓东任丽丽陈磊塞娜郭维维杨仕明; 关键词：血管纹差异表达基因

GJB2基因条件敲除小鼠的繁殖、基因型鉴定及听力检测被引量：3: 2013年; 目的探讨GJB2基因条件敲除(conditional connexin 26knock out,cCx26KO)小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定方法,为进一步研究GJB2基因突变导致非综合征型聋的机制奠定基础。方法将引进的两对转基因小鼠Cx26loxp/loxp和Pax2-Cre/+进行交配饲养与繁殖,选取子一代雌性Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+小鼠与雄性小鼠Cx26loxp/loxp合笼交配,即获得cCx26KO小鼠。提取鼠尾组织基因组DNA,PCR方法鉴定动物基因型。采用c-ABR检测成年cCx26KO小鼠和野生型小鼠的听力,进一步验证PCR方法的正确性。结果 cCx26KO小鼠繁殖成功后,采用PCR方法鉴定分析,成功获得Cx26loxp/loxp_Pax2Cre/+、Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+、Cx26loxp/loxp、Cx26loxp/-4种基因型小鼠,其繁殖结果符合孟德尔遗传定律。与野生型小鼠相比,cCx26KO小鼠c-ABR反应阈显著升高,约达95dB SPL。结论 PCR方法可准确鉴定子鼠的基因型,雌性Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+小鼠与雄性Cx26loxp/loxp小鼠交配是获得cCx26KO实验小鼠的有效途径。; 万亚蕊张延平张晓强杨仕明; 关键词：GJB2基因野生型基因型鉴定感音神经性聋

不同浓度Ouabain对贵州小型猪内耳形态及听力的影响被引量：6: 2013年; 目的探讨不同浓度ouabain溶液对贵州小型猪内耳的作用,分析听力改变与药物浓度关系。方法采用健康、黑色2月龄贵州小型猪13只,随机分为实验组、对照组和正常对照组,其中试验组动物通过完整圆窗膜局部应用不同浓度ouabain,分为1mM组、0.1mM组,对照组动物局部使用等量生理盐水,正常对照组不予特殊处理。用药前后行听性脑干反应测定,并通过免疫荧光法,观察各组动物在应用药物后三天、一周、两周时的听功能及内耳形态学(螺旋神经节、毛细胞)的变化。结果生理盐水对照组及正常对照组内耳形态及听功能未见明显变化,不同浓度Ouabain均可导致螺旋神经节细胞数目减少,毛细胞形态及数量与对照组之间无显著性差异,ABR阈值变化明显(P<0.05)。结论经完整圆窗膜给药,ouabain溶液对小型猪螺旋神经节细胞有损伤,并且损伤程度具有浓度依赖性,并造成听阈明显提高,ouabain对毛细胞的影响不明显。; 张雪茹杨仕明李登科马玥莹赵立东郭维维邢光前; 关键词：内耳毛细胞螺旋神经节听神经病

一种用于计算耳蜗长度的数学模型的建立被引量：2: 2016年; 目的比较应用三维重建技术与阿基米德螺线模型测量计算小型猪耳蜗长度的结果，评价数学模型用于耳蜗长度测量的可行性。方法对3只听力正常小型猪的6个颞骨标本行Micro—CT扫描，将所得图片导入Mimics软件中重建内耳的三维结构，并通过其内置的测量T具包直接测量耳蜗的长度L、各转的直径R、耳蜗的高度h及顶转的角度。同时利用阿基米德螺线模型间接计算出耳蜗的长度L公式，比较两种方法所获耳蜗长度的差异。结果基于三维重建技术测得小型猪的耳蜗长度为（35．30±0．88）mm，应用阿基米德螺线模型计算出的耳蜗长度为（34．85±0．64）mm，二者差异无统计学意义（t=1．19，P〉0．05）。小型猪耳蜗的高度为（2．64±0．24）mm，耳蜗旋转3．67圈。结论三维重建技术真实地反映了内耳的立体结构并允许直接测量，测量结果准确可靠，但重建过程较为费时，不适合临床上应用。阿基米德螺线模型可作为正常耳蜗长度测量的新方法，简单可行，可为临床人工耳蜗植入提供参考。; 钟玲玲郝青青任丽丽郭维维杨仕明; 关键词：耳蜗阿基米德螺线

振动声桥在先天性中外耳畸形患者的应用被引量：10: 2012年; 目的报道振动声桥在先天性中外耳畸形患者(尤其有特殊情况者)的应用,探索其在该类患者的适应症。方法对4例先天性中外耳畸形患者行振动声桥植入术,均为男性,年龄3-18岁(平均13.5岁),3例双耳畸形,1例单耳畸形,均为左侧植入,对具有特殊情况者根据具体情况采用相应措施完成手术。手术径路分为经面神经隐窝径路(3例)和面神经后径路(1例)。振动声桥植入方式分为镫骨振动型(2例)和圆窗振动型(2例)。对比开机前后听力与言语测听结果,及日常交流情况进行评估。结果 4例患者均顺利完成手术,无并发症。开机后,听力改善明显,0.25k-4kHz平均纯音或条件反射测听气导听阈改善35dB(开机前69dB/后34dB),助听后安静环境下65dBSPL语句识别率,双耳畸形者平均为86%(术前0%),单耳畸形者100%(术前100%),但噪声环境(-8dBSNR)下为20%(裸耳0%)。结论振动声桥植入是先天性中外耳畸形患者一种良好的听力解决方案,即便有些特殊情况者。; 邹艺辉李佳楠陈艾婷戴朴韩东一刘会占杨仕明; 关键词：振动声桥先天性畸形

Waardenburg综合征与前庭障碍的关系: 2016年; Waardenburg综合征（Waardenburg Syndrome，WS）是一类以感音神经性听力损失，虹膜、皮肤及毛发着色异常为特征的疾病。后来的研究发现，前庭障碍也是WS的另一重要临床表现，包括前庭器官畸形及前庭功能障碍。本文探讨WS中黑色素缺乏对前庭障碍的影响，分析WS患者缺乏前庭功能障碍症状的原因，并提醒临床医生对需行人工耳蜗植入的WS患者要密切关注有无内耳畸形。; 钟玲玲郭维维杨仕明; 关键词：WAARDENBURG综合征畸形

听神经病的诊治和相关研究(二)被引量：4: 2013年; 1临床上对听神经病的干预手段及其效果现阶段对于听神经病（AuditoryNeuropathy，AN）的临床干预，以助听器（HearingAids，HA）和人工耳蜗（CochlearImplant，CI）为主，; 冀飞杨仕明; 关键词：听神经病诊治临床干预人工耳蜗助听器

振动声桥与软带BAHA在双侧中外耳畸形患者的效果比较被引量：2: 2014年; 目的比较振动声桥(VSB)与软带BAHA(骨锚式助听器)对双侧先天性中外耳畸形患者听力改善的效果。方法通过2例自身对照患者,比较VSB与软带BAHA使用前后,纯音测听(声场)与安静和噪声下65d BSPL言语识别率。结果 2种方式均使患者获得明显的听力改善,在纯音测定(声场)中,气导听阈在1k Hz-8k Hz,VSB助听后达到正常水平(<25d B),而软带BAHA助听在30-50d B之间,但在0.25k Hz与0.5k Hz,软带BAHA比VSB能进一步改善10-25d B。安静状态下,对单音节词和双音节词识别率,VSB比BAHA高7%-38%;但安静与噪声环境下句子识别率仅高2-10%。结论 VSB与BAHA都是双侧先天性中外耳畸形患者的有效听力解决方案。VSB在高频(1k Hz-8k Hz)助听效果较BAHA好,但低频(0.25k Hz与0.5k Hz)反之;安静状态下对单音节词和双音节词识别率VSB更好,而在安静和噪声下对句子识别率VSB比BAHA稍高。; 邹艺辉焦青山杨仕明; 关键词：振动声桥

活体鸡胚操作时背景染料的选择与应用: 2014年; 目的寻找活体鸡胚操作时的最佳背景染料及其应用条件。方法比较不同染料对鸡胚发育的影响及背景色效果与持续时间,选择最优者,并摸索其最佳浓度与剂量。结果鸵鸟墨水注射后鸡胚存活率最高[76.9%(30/39)],背景色好,持续时间长,并且采用0.2ml/4ml浓度、≤0.3ml剂量综合效果最优。结论鸵鸟墨水用于活体鸡胚操作时的背景染料效果佳。; 邹艺辉刘会占张悦汤丽川杨仕明; 关键词：鸡胚

在体鸡胚听骨染色与解剖形态演变被引量：1: 2014年; 目的建立正常鸡胚发育过程中听骨(耳小柱)解剖形态与特征的参照标准,同时探索在整体标本中清晰显示耳小柱的方法。方法发育第5-19天(E5-E19)鸡胚头部,经阿辛蓝软骨染色、甲醛水杨酸软组织透明后,显微镜下观察耳小柱及其周围软骨发育情况。结果耳小柱在E7出现,E8-E10呈分离的内、外侧2部分,E11耳小柱及周围软骨已具成熟期形态,E12形态更清晰,E13软组织内血管影出现,E14软骨开始钙化,E15后软骨形态已无明显改变,但软组织透明度降低、血管影增多。结论耳小柱均E7出现,E11时已具备成熟期形态。阿辛蓝软骨染色、甲醛水杨酸软组织透明法能在整体标本中清晰显示位置深在的耳小柱形态和结构。; 邹艺辉汤丽川张锐韩东一庄洪兴杨仕明; 关键词：鸡胚

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