国家高技术研究发展计划(2008AA10Z305)
- 作品数:8 被引量:32H指数:3
- 相关作者:华欲飞张彩猛孔祥珍江波沐万孟更多>>
- 相关机构:江南大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 大豆脂肪氧合酶的分离纯化及其性质研究被引量:15
- 2011年
- 研究了从大豆种子中分离、纯化大豆脂肪氧合酶的方法,研究表明经过缓冲液提取、差速离心、盐析沉淀和离子交换层析可以得到电泳纯级的大豆脂肪氧合酶。特性研究表明大豆脂肪氧合酶的最适pH为9,在较低温度下酶活能保持较高水平,用双倒数法求得大豆中脂肪氧合酶Km=80.6μmol/L,Vmax=54.2μmol/(L·min)。
- 陈书婷孔祥珍华欲飞张彩猛
- 关键词:大豆脂肪氧合酶分离纯化酶活最适PHKM
- 从苋菜中提取氢过氧化物裂解酶工艺被引量:1
- 2011年
- 在高等植物中,氢过氧化物裂解酶(hydroperoxide lyase,HPL)可将脂肪氧合酶氧化多不饱和脂肪酸产生的氢过氧化物催化裂解,生成的己醛、己烯醛等芳香性物质具有果蔬的新鲜气味,是食品行业和日化工业中的重要芳香风味添加剂。实验以苋菜为研究对象,在单因素[pH、半胱氨酸浓度、匀浆转速、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度]实验基础上,运用4因素3水平的正交实验,对HPL的提取工艺进行了优化,即在12 000 r/min,以pH 8.0的含有1 mmol/L半胱氨酸和0.3%质量浓度的PVP为缓冲液提取HPL,得到的HPL具有很高的酶活。并探索了抽真空对HPL提取的影响,在抽真空完全除去氧的情况下提取HPL,酶活得到显著提高。
- 熊杰刘庆庆孔祥珍张彩猛华欲飞
- 关键词:苋菜真空
- 马铃薯脂氢过氧化物裂解酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2009年
- 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),以马铃薯幼叶总RNA为模板,扩增出1443bp的脂氢过氧化物裂解酶(HPL)cDNA(GenBank登录号GQ281583),将该基因片段克隆到表达载体PET-22b(+)上并转化到E.coliBL21(DE3),得到重组菌E.coliBL21(PET-22b-HPL),以0.5mmol/LIPTG诱导该重组菌过量表达目的蛋白(HPL),SDS-PAGE显示,重组HPL分子量为54ku。经紫外分光光度法检测,重组HPL的比酶活约为0.12U/mL。
- 薛庆海沐万孟江波华欲飞
- 关键词:马铃薯CDNA克隆
- 菊糖果糖转移酶的研究进展被引量:1
- 2011年
- 菊糖果糖转移酶(inulin fructotransferase,即InulaseⅡ)[EC 4.2.1.93]是指将菊糖水解为双果糖酐Ⅲ(DFAⅢ)的一种酶。文中对菊糖果糖转移酶的产生菌种、发酵工艺、分离纯化、酶学性质、酶解产物(DFAⅢ)生理功能等进行了综述。
- 杭华赵萌周榴明缪铭沐万孟张涛江波
- 关键词:菌属酶学性质生理功能
- 海藻酸钠明胶及戊二醛协同固定化苋菜脂氢过氧化物裂解酶被引量:5
- 2010年
- 采用海藻酸钠明胶协同包埋、同时使用戊二醛交联制备固定化苋菜脂氢过氧化物裂解酶,考察了海藻酸钠、明胶浓度、CaCl2浓度、交联剂戊二醛浓度及交联时间等因素对固定化脂氢过氧化物裂解酶的影响;比较了固定化酶与游离酶的酶学性质。结果表明,制备固定化脂氢过氧化物裂解酶的最优条件为:海藻酸钠、明胶浓度分别为1.25%和0.5%,CaCl2浓度为8%,戊二醛浓度为1%,交联时间为20 min。固定化酶的最适温度、最适pH略有提高;温度稳定性、pH稳定性及贮藏稳定性显著提高。
- 薛庆海徐梁沐万孟江波华欲飞
- 关键词:海藻酸钠明胶戊二醛固定化酶学性质
- 大豆脂肪氧合酶催化合成亚麻酸氢过氧化物的研究被引量:7
- 2011年
- 大豆脂肪氧合酶催化亚麻酸生成亚麻酸氢过氧化物,在氢过氧化物裂解酶的作用下可生成具有青草自然风味的化合物。为了得到转化率高、纯度高的亚麻酸氢过氧化物,研究了反应温度、pH、亚麻酸浓度、加酶量、搅拌速度和氧气压力等对亚麻酸氢过氧化物转化率的影响。实验得出:当反应温度为4℃,pH为9.0,亚麻酸浓度为0.025 mol/L,加酶量为2.5 U/mL,搅拌速度为800 r/m in,氧气压力为0.2 MPa时,生成的亚麻酸氢过氧化物的转化率和纯度分别为82.93%和87.01%。
- 陈书婷孔祥珍华欲飞张彩猛
- 关键词:大豆脂肪氧合酶亚麻酸
- 氢过氧化物裂解酶合成己烯醛反应的研究被引量:1
- 2011年
- 以苋菜作为氢过氧化物裂解酶(HPL)的酶源,研究了氢过氧化物裂解酶合成己烯醛的反应,并通过顶空-气相联用法(HS-GC)对产物进行分析。该反应中HPL对产物具有较强的吸附作用,大大影响了产物测量的准确度。通过一个校正方法来减少误差,并在此基础上考察了该反应的反应时间、pH、温度、底物浓度、酶浓度、BHT浓度等因素对己烯醛产率的影响,其中当反应时间10min,pH7.5,温度20℃,40mmol/L底物,酶浓度为12U/mL,BHT浓度为1mmol/L时,己烯醛的产率达到985mg/L。
- 陈晨华欲飞孔祥珍张彩猛
- 关键词:酶催化
- 氢过氧化物裂解酶的筛选及纯化被引量:1
- 2011年
- 研究了不同植物原料中氢过氧化物裂解酶的含量,并最后筛选出苋菜作为提取原料。利用高速离心、表面活性剂溶解、硫酸铵分级沉淀、羟基磷灰石柱层析和离子交换色谱对苋菜氢过氧化物裂解酶进行纯化至电泳纯。结果表明,纯化的苋菜氢过氧化物裂解酶分子量约为55ku,对于13-亚麻酸氢过氧化物的活力高于13-亚油酸氢过氧化物,最适pH6.0,最适温度为25℃,在常温下酶能保持较高水平的活力。
- 龙祯阮奇珺孔祥珍张彩猛华欲飞江波
- 关键词:苋菜纯化