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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013JBFM14)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013JBFM14)
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 相关作者:苏胜彦袁新华董在杰马庆男张成锋更多>>
- 相关机构:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心南京农业大学山西农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 基于黄河鲤新品系IGF2b基因SNPs获取体系的建立及在该品系选育中的应用被引量:2
- 2019年
- 为了建立鲤 IGF2b (insulin-like growth factor 2)基因全基因组信息 SNPs (single nucleotide polymorphism)的获取体系,并验证该获取体系在黄河鲤新品系选育中运用的适用性,本研究首先对 10个不同鲤品种的 33个鲤个体重测序数据进行分析,整体上了解 IGF2b 基因的单核苷酸位点及其在基因组上的分布情况。然后在基因组 DNA 水平上分段获取 IGF2b 基因的 SNPs 信息,并以不同的鲤品种验证引物的适用性,最后在黄河鲤新品系中检测其应用。研究结果:获得 8 对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)引物进行分段克隆的结果,并通过直接测序和限制性片段长度多态性来获取相应的 SNPs。经过直接测序,本文对黄河鲤、建鲤、黄河鲤和建鲤的正反交后代进行 PCR 检测发现条带单一,目地片段正确;结合黄河鲤新品系的体重数据,本文又以 IGF2b3#引物检测到一个与体重明显相关的 SNPs,同时检测到一个与该基因表达量相关的另一个 SNPs。本研究的方法能够在该基因全基因组范围内开展鲤分子育种中 SNPs 的检测,并验证发现黄河鲤新品系 IGF2b3#引物 227 号位点处,出现的突变位点使体重降低,且有一处 SNPs 与其表达量有关。这将为其他物种、其他功能基因的多态性分子标记研究提供思路。
- 谢元澄谢元澄苏胜彦苏胜彦梁敬东徐跑Bouzoualegh Raouf
- 关键词:黄河鲤品系选育SNPS分子育种
- IGF2b基因注射鲤鱼越冬后补偿生长特点分析被引量:1
- 2015年
- 为了解注射含IGF2b基因的慢病毒载体的鲤鱼越冬后补偿生长的特点,通过建立补偿指数假设、YN效应假设和补偿水平设置3个假设,探讨每条注射10、20、40μL IGF2b基因慢病毒载体的鲤鱼越冬后是否存在补偿生长、补偿生长程度大小以及补偿生长对体重的影响。结果表明:在特定水平下,补偿的有无对收获体重和增重影响明显,且从最高补偿水平的角度发现,随着补偿程度的提高,收获体重和增重明显增加,20μL注射组从标记到收获期间增重最明显,在体长、体厚、体高3个性状上均表现出补偿性。试验为研究鲤鱼补偿生长的生理学特性及应用提供了依据。
- 张亚楠苏胜彦袁新华
- 关键词:鲤鱼慢病毒载体
- 慢病毒载体介导的IGF2b基因在鲤鱼背部肌肉组织中过表达对鲤鱼生长的影响被引量:4
- 2015年
- 为进一步了解胰岛素样生长因子2b(IGF2b)基因在靶组织过表达对鲤鱼生长的影响,将含IGF2b基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒载体感染鲤鱼背部肌肉组织,注射剂量(每条)分别为10、20、40μL,探讨基因过表达对鲤鱼生长的影响。结果表明:注射48h后,试验组鲤鱼背部肌肉组织可见绿色荧光,4个月后,与对照组相比,试验组体重、体长、体高和体厚均显著提高。为检测慢病毒处理对鲤鱼血清指标的影响,检测与肝功能、肾功能及IGF2b基因路径相关的指标,结果表明:各组间血清IGF2、IGF1R、IGF2R浓度差异均不显著;与对照组相比,10μL注射组碱性磷酸酶、丙氨酸转移酶、总蛋白、尿素氮显著增高,而20、40μL注射组各血清指标与对照组差异均不显著。为验证试验组目的基因的过表达,通过荧光定量PCR检测试验组及对照组间IGF2b基因的表达情况,结果表明:IGF2b基因在试验鲤鱼背部肌肉组织中成功过表达。正是IGF2b基因在鲤鱼背部肌肉组织中的过表达,促进了鲤鱼的生长,且在试验剂量下病毒液对鲤鱼血清无影响。
- 张宁苏胜彦袁新华马庆男董在杰张成锋
- 关键词:鲤鱼慢病毒载体过表达
- 背部肌肉注射含IGF2b基因慢病毒载体对鲤鱼生长的影响被引量:2
- 2014年
- 【目的】研究IGF2b基因对建鲤生长及体型的影响。【方法】用含有IGF2b基因的慢病毒载体注射建鲤背部肌肉组织,注射量分别为10,20和40μL/尾,阴性对照组不进行任何处理,阳性对照组注射20μL/尾去离子水。在相同饲养条件下饲养满9个月后,分别测量建鲤的各项生长指标。【结果】注射IGF2b基因的建鲤体质量、体长、体高、体厚、尾长均显著大于阴性对照组和阳性对照组,说明IGF2b基因在建鲤背部肌肉组织中过表达对鲤第2阶段生长同样具有促进作用,IGF2b基因在鲤背部肌肉组织中过表达对鲤的体型也有一定的作用。鲤的体长、体高、体厚的3D图也说明,随着IGF2b基因注射,鲤鱼倾向于具有更大的体长、体高、体厚的值。用多元逐步回归法做体质量的回归方程可知,鲤鱼的体质量与体长、体厚、尾长具有线性关系,利用体长、体厚、尾长这3个自变量进行聚类分析,即可准确得到鲤鱼5个注射组间的聚类关系:阴性对照组与阳性对照组共属一类,3个注射组同为一类,其中注射组中10μL注射组和20μL注射组为一类,40μL注射组为一类,IGF2b基因对鲤鱼体型的影响在注射量大于20μL/尾之后产生了转折,出现了负增长。【结论】IGF2b基因对鲤第2阶段生长同样具有促进作用,且对鲤鱼的体型有一定影响。
- 雷莹苏胜彦丁敬波刘浩亮袁新华
- 关键词:建鲤慢病毒载体不同生长阶段
- 建鲤BMP15 cDNA序列克隆及表达分析被引量:1
- 2013年
- 根据斑马鱼骨形成蛋白(BMP15)基因保守序列设计特异性引物,扩增、分离建鲤BMP15全长cDNA序列。序列分析表明,该cDNA序列全长1 727bp,编码359个氨基酸长度的蛋白,与异育银鲫、斑马鱼、欧洲海鲈及人等BMP15(蛋白)同源性分别为88.9%、78.6%、46.1%和26.9%。用实时荧光定量PCR技术分析脑、心脏、脾脏、肝脏、卵巢、鳃、肠和肌肉8种组织表达丰度,结果发现建鲤BMP15基因在所有组织中都表达,以卵巢中表达量最高,在肝脏、肌肉中表达次之,呈中度表达,再次是肠、脑和鳃,心脏和脾脏中表达量最低。该研究为探讨BMP15基因与鲤鱼肌间刺成因提供了依据。
- 马良骁董在杰苏胜彦张建桥刘伟李灵玲袁新华
- 关键词:建鲤BMP15基因