国家自然科学基金(30770968)
- 作品数：8 被引量：54H指数：5
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- 干扰固醇调节元件结合蛋白-1c表达对细胞炎症趋化因子配体2和成纤维细胞生长因子21的影响被引量：9
- 2011年
- 目的研究L02肝细胞脂肪变模型中内质网应激状态下，干扰固醇调节元件结合蛋白（SREBP）-1c表达后肝细胞脂质代谢及肝细胞系统性炎症的变化情况及其意义。方法用油酸诱导L02肝细胞脂肪变，选用pSilencer1．0-U6—4476质粒干扰SREBP—1c的表达，分为空白对照组、空质粒转染模型组及干扰质粒转染模型组。分别于0、24、48、72h检测细胞炎症趋化因子配体（CCL）2和成纤维细胞生长因子（FGF）21的mRNA和蛋白质的表达。组间比较用t检验，多个组间正态资料的比较用单因素方差分析。结果干扰SREBP—1c后，干扰质粒转染模型组较空质粒转染模型组细胞内脂肪滴数量明显减少，提示肝细胞脂肪变显著减轻。干扰质粒转染模型组CCL2基因在0、24、48、72hmRNA相对表达量分别为1．03±0．11、1．11±0．21、0．88±0．16、1．05±0．15，与空白对照组比较，尸值均〉0．05，差异均无统计学意义。组内各时相点比较，JD值均〉0．05，差异均无统计学意义。而对应的蛋白质表达量0、24、48、72h分别为1．19±0．15、1．07±0．18、0．48±0．14、0．05±0．24，低于空白对照组的4．15±0．18、4．09±0．21、3．91±0．13、4．06±0．12，两组比较，t值分别为2．78、3．67、4．10、4．89，P值均〈0．01，差异均有统计学意义。干扰质粒转染模型组组内各时相点比较，t值分别为1．11、2．25、3．17、1．01、3．27、3．51，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。干扰质粒转染模型组FGF21基因mRNA相对表达量在0、24、48、72h分别为1．01±0．08、0．91±0．22、0．98±0．20、1．02±0．12，与空白对照组比较，P值均〉0．05，差异均无统计学意义。干扰质粒转染模型组组内各时相点之间比较，t值分别为0．28、0．28、0．17、0．19、0．24、0．16，P值均〉0．05，差异均无统计学意义。而对应的蛋白质表达量下调趋势非常�
- 王万东王军樊丽琳熊吉孙文静胡辂杨丽陈东风
- 关键词：脂肪肝成纤维细胞生长因子21
- 活化转录因子6在非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织中的表达及意义被引量：2
- 2009年
- 目的研究活化转录因子6(ATF6)在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织中的表达变化及其意义。方法采用高脂饲料诱导的方法建立NASH大鼠模型;采用RT-PCR和免疫组织化学法检测ATF6 mRNA及蛋白表达情况。结果与正常对照组相比,NASH组大鼠血清FFA、ALT、AST水平均明显升高(P<0.05);在建模的第8周时,NASH组肝组织中ATF6mRNA表达开始升高,16周时ATF6 mRNA表达最强(P<0.01)。结论ATF6的高表达可能参与了NASH的发病机制,在NASH的发生发展过程中发生重要作用。
- 闵敏陈东风朱超慧艾正琳王军樊丽林
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎
- 内质网应激线粒体功能紊乱与非酒精性脂肪性肝病被引量：6
- 2009年
- 王万东陈东风
- 关键词：内质网应激非酒精性脂肪肝
- 非酒精性脂肪变性肝细胞模型中ATF4基因的表达及其意义被引量：4
- 2010年
- 目的研究内质网应激相关蛋白活化转录因子4(activating transcription factor4,ATF4)基因在油酸诱导脂肪变性的肝细胞模型中的表达变化及其意义。方法以常规培养的L02肝细胞为对照,采用油酸诱导L02肝细胞脂肪变性,分别于0、24、48、72h采用RT-PCR与Western blot方法动态监测ATF4基因的表达变化。结果随着时间的增长,肝细胞脂肪变性程度加剧,肝细胞中ATF4 mRNA表达量0、24、48、72h分别为(1.01±0.12)、(1.87±0.24)、(2.01±0.13)、(1.79±0.19),48h时达到峰值后开始缓慢下降;ATF4蛋白表达量0、24、48、72h分别为(0.31±0.16)、(0.57±0.14)、(0.91±0.20)、(0.89±0.17),直至72h时仍维持在高水平状态,各实验组(24、48、72h组)与空白对照组(0h组)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂肪变性肝细胞中ATF4表达增强,提示肝细胞脂肪变性可能引起内质网发生应激,其可能与非酒精性脂肪性肝病关系密切。
- 王万东陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪肝
- 体外非酒精性脂肪肝细胞模型线粒体通透转换孔的变化及其与细胞凋亡的关系被引量：9
- 2007年
- 目的探讨线粒体通透转换孔（PT孔）与肝细胞脂肪变和细胞凋亡的关系。方法采用油酸诱导肝细胞株L02细胞建立非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）体外模型，油红O染色观察细胞脂肪变情况，应用荧光显微镜法观察各组荧光下降百分比（反映PT孔的开放程度），流式细胞仪Annexin V／P1法检测细胞凋亡情况。结果荧光显微镜观察结果显示，油酸可诱导L02细胞PT孔开放（72．58％±2．78％），与对照组（8．28％±4．98％）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；并可于24h后引起肝细胞脂肪变，至72h后肝细胞脂肪变持续存在；随NAFLD体外模型造模时间延长，细胞凋亡比例逐渐增加，以48h和72h（分别为11．09％±4．95％和15．24％±2．45％）最为显著，与对照组（4．56％±1．25％）比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论PT孔开放程度与NAFLD体外模型细胞凋亡密切相关，并与肝细胞脂肪变有一定关系。
- 陈东风王春华
- 关键词：脂肪肝非酒精性非酯化细胞凋亡酒精性脂肪性肝炎
- 葡萄糖调节蛋白78在大鼠非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义被引量：21
- 2009年
- 目的观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)过程中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78的表达变化,探讨内质网应激在NASH发病机制中的作用。方法建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,检测血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA的变化,用RT-PCR与Western blot方法检测NASH形成过程中肝组织GRP78在基因和蛋白水平的表达变化。结果NASH组大鼠血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA水平均较对照组有不同程度的升高。肝组织GRP78基因和蛋白表达也随NASH加重而增强,16周时升高最为显著(P<0.01)。结论高脂饮食可诱导GRP78表达增强,启动内质网应激,导致脂质异常沉积,其可能与NASH的发病机制密切相关。
- 闵敏陈东风王军艾正琳樊丽琳严丽丽
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎内质网应激葡萄糖调节蛋白78
- Sigma-1受体在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的明确Sigma-1受体在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义。方法应用软脂酸诱导HepG2细胞脂肪变建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外模型,并按0、2、4、8、12 h时相点收获细胞,利用尼罗红(nile red)染色检测细胞脂肪变程度,通过Real-time PCR及Western blot检测Sigma-1受体(Sigma-1 recep-tor,Sigma-1R)及内质网应激标志蛋白葡糖调节蛋白78(glucose regulating protein,GRP78)的表达,二甲基噻唑二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测细胞脂肪变过程中细胞活性的变化。结果 HepG2细胞经脂肪酸诱导后发生了脂肪变,脂肪变程度随时间点的延长而加重,细胞的平均脂变面积在12 h组(435.14±39.87)较0 h组明显升高(P<0.01);8、12 h组GRP78 mRNA的相对表达量[(2.35±0.51),(8.71±1.20)]较0 h组明显升高(P<0.05),而Sigma-1R mRNA相对表达量在2 h组(0.19±0.02)即开始出现明显下降(P<0.05);在蛋白水平上,GRP78的表达在8、12 h组[(25.59±0.51),(28.43±1.20)]较0 h组明显上调,Sigma-1R在8、12 h组[(15.92±0.42),(10.73±0.63)]较0 h组明显下调(P<0.05);MTT检测提示细胞在脂肪变过程中细胞活性逐渐下降,12 h组细胞活性[(59.86±4.47)%]相对0 h组明显下降(P<0.05)。结论 Sigma-1R的低表达可能诱发了NAFLD过程中的内质网应激,进而导致肝细胞的损伤。
- 熊吉王军樊丽琳胡辂兰春慧杨敏孙文静陈东风
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病内质网应激
- 内质网应激与非酒精性脂肪性肝病被引量：9
- 2008年
- 近年来对内质网应激在代谢综合征等方面的作用研究十分广泛,而非酒精性脂肪性肝病的发病机制与代谢综合征密切相关,现就内质网应激在非酒精性脂肪性肝病发生、发展中的作用和意义作一综述。
- 闵敏陈东风
- 关键词：内质网应激非酒精性脂肪性肝病胰岛素抵抗
