陕西省中医药管理局科研基金(zy06) 作品数:4 被引量:28 H指数:3 相关作者: 李敏 王斌 侯建平 杨艳 韩艳 更多>> 相关机构: 陕西中医药大学 更多>> 发文基金: 陕西省中医药管理局科研基金 陕西省教育厅科研计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基于TLR4-NF-κB的柴胡黄芩水煎液抑制CCl4诱导大鼠肝星状细胞激活作用机制研究 被引量:10 2017年 目的探讨柴胡黄芩水煎液(CQ)对CCl_4诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)激活的作用及机制。方法取对数生长的HSC,在无血清培养基中培养24 h后,以1.5×10~9·L^(-1)浓度接种到培养板中过夜。实验分组如下:空白对照组(无药物处理),CCl_4诱导组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h),给药组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h后,再用400、500、600 mg·L^(-1)的CQ作用24 h),TLR4阻断剂TAK-242、NF-κB阻断剂BAY 11-7082组(6 mmol·L^(-1)CCl_4作用6 h后,再用TAK-242 10 mol·L^(-1)、BAY 11-7082 2 mol·L^(-1)作用24h)。处理之后,应用ELISA法检测培养基中透明质酸酶(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)浓度,RT-PCR方法检测细胞中Toll样受体4(Toll-like receptors4,TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)基因的表达,应用Western blot法检测细胞中TLR4、NF-κB蛋白的表达。结果研究发现,与CCl_4干预组比较,CQ量效相关性降低CCl_4诱导的HSC增殖。600 mg·L^(-1)的CQ可以明显降低HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及TLR4、NF-κB基因、蛋白的表达。NF-κB抑制剂TAK-242、BAY 11-7082也可降低CCl_4造成的HSC增殖,HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C细胞释放水平及NF-κB基因、蛋白表达,不能下调TLR4基因、蛋白表达。结论 CQ可以抑制CCl_4诱导的炎症因子基因、蛋白表达,减轻肝纤维化相关指标的含量,其作用机制可能与TLR4-NF-κB转录活性及蛋白活性相关,提示其在抗肝纤维中的作用及机制。 李敏 韩艳 王华林 王義雯 李静 王斌关键词:HSC CCL4诱导 NF-ΚB 柴胡、黄芩及其配伍抗大鼠肝纤维化作用研究 被引量:10 2012年 [目的]研究柴胡、黄芩配伍抗肝纤维化的作用。[方法]采用饲喂高脂饲料,饮用10%乙醇及皮下注射四氯化碳(CCL4)的复合因素法建立大鼠肝纤维化模型,应用柴胡、黄芩及配伍进行干预,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的变化,探讨柴胡、黄芩及柴胡、黄芩2∶1配伍对肝纤维化大鼠的影响。[结果]柴胡-黄芩2∶1配伍能降低综合因素所致肝纤维化血清中HA、PCⅢ和Ⅳ-C的浓度(P<0.05)。[结论]柴胡、黄芩及配伍具有一定抗肝纤维化作用。 李敏 王斌 侯建平 杨艳关键词:柴胡 黄芩 配伍 柴胡-黄芩药对的不同分离部位对H_2O_2刺激肝星状细胞增殖的影响 被引量:2 2019年 目的:研究柴胡-黄芩药对的不同分离部位对过氧化氢(H_2O_2)刺激的肝星状细胞增殖的影响,探讨柴胡-黄芩药对抗肝纤维化主要药效物质基础。方法:柴胡-黄芩水提液经D101型大孔吸附树脂吸附,依次用水、30%、60%和90%的乙醇梯度洗脱,分别得到水洗脱部位(A)、30%乙醇洗脱部位(B)、60%乙醇洗脱部位(C)及90%乙醇洗脱部位(D)。体外培养肝星状细胞,采用不同浓度的H_2O_2刺激肝星状细胞增殖,筛选最佳造模浓度,然后用柴胡-黄芩药对水提液及A、B、C、D的高、中、低剂量组进行干预24 h。采用MTT法测定各组肝星状细胞的抑制情况;应用ELISA法检测细胞上清液中透明质酸酶(hy-aluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,Ⅳ-C)的浓度。结果:结果显示,5μmol/L的H_2O_2能显著刺激肝星状细胞增殖,柴胡-黄芩药对及其各分离部位对H_2O_2刺激的肝星状细胞增殖均具有一定的抑制作用,而且能够将低HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的细胞释放水平,具有剂量相关性,其中B、C高剂量组对其抑制作用最为明显,有统计学意义(P<0.01)。结论:柴胡-黄芩药对及其30%、60%乙醇洗脱部位对H_2O_2刺激的肝星状细胞增殖均具有一定的抑制作用,30%、60%乙醇洗脱部位可能是柴胡-黄芩药对抗肝纤维化主要有效部位。 王华林 程丽飞 卢伟龙 吴媛媛 田萌 李敏关键词:肝星状细胞 H2O2 肝纤维化 基于TLR4-NFκB信号通路的柴胡-黄芩药对抗肝纤维研究 被引量:11 2015年 目的:研究柴胡-黄芩药对抗肝纤维化大鼠肝脏TLR4-NFκB通路的影响。方法:采用饲喂高脂饲料,饮用10%乙醇及皮下注射四氯化碳(CCl4)的复合因素法建立大鼠肝纤维化模型,应用柴胡-黄芩药对进行干预,检测大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的变化,通过HE染色、Mallory染色探讨肝组织病理变化,应用免疫组织化学方法检测肝脏Toll样受体4(TLR4)、核转录因子(Nuclear factor k B,NFκB)蛋白表达情况,揭示柴胡-黄芩药对抗肝纤维化的作用及可能机制。结果:肝纤维化模型大鼠血清中ALT、AST、HA、PCⅢ和Ⅳ-C的含量明显增高,肝组织纤维蛋白增生明显,并形成假小叶,模型组大鼠肝组织TLR4表达增高。柴胡-黄芩(9、18g生药/kg)干预后,血清中ALT、AST、HA、PCⅢ和Ⅳ-C的含量均有明显降低,肝组织纤维化病理改变有良好改善,肝组织TLR4、NFκB表达也明显下降。结论:柴胡-黄芩药对具有明确抗肝纤维化作用,其机制可能通过TLR4-NFκB信号通路调节,减轻炎症有关。 王斌 李敏 侯建平关键词:肝纤维化 NFΚB