国家自然科学基金(81274191) 作品数:6 被引量:33 H指数:3 相关作者: 张军 朱莉 汪芳 李润美 张双伟 更多>> 相关机构: 广州中医药大学 深圳致君制药有限公司 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省教育部产学研结合项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响 被引量:10 2015年 目的考察毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组,模型组,毛冬青皂苷E低、中、高剂量对照组(10,50,250μg·m L-1)、毛冬青皂苷E低、中、高剂量治疗组(10,50,250μg·m L-1)。造模前24 h给予相应浓度的药物预处理,缺氧4 h,复氧4 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,并采用蛋白印迹法(Western Blot)检测Caspase-3和Cleaved caspase-3凋亡蛋白的表达。结果缺氧/复氧后,与正常对照组比较,模型组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量显著升高(P<0.01),毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,细胞存活率增加,ROS含量降低。缺氧/复氧损伤可使Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达增加。毛冬青皂苷E各剂量治疗组预处理后,Caspase-3和Cleaved caspase-3蛋白表达均下降。结论毛冬青皂苷E对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS生成,抑制凋亡相关蛋白Caspase-3和Cleaved caspase-3的表达有关。 张双伟 李润美 徐进文 汪芳 强皎 李爱群 张军关键词:H9C2心肌细胞 异芹菜脑在隔山香药材中的含量测定及其对心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用 被引量:3 2014年 目的建立隔山香药材中异芹菜脑(Isoapide,Iso)的高效液相色谱法(HPLC),测定方法并初步探讨异芹菜脑对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm伊250 mm,5滋m);流动相:以甲醇-水(70颐30)洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280 nm,柱温室温,进样量:10滋L。并用原代培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复/氧损伤模型,异芹菜脑在建模前进行预干预,心肌细胞随机分为5组,空白对照组(Control,CON),缺氧/复氧组(hypoxia/reoxygenation,H/R),异芹菜脑低、中、高剂量干预组(IsoL、IsoM、IsoH)。缺氧4 h/复氧4 h后,采用CCK-8法检测心肌细胞存活率。结果异芹菜脑在0.02096~0.2096 mg·mL^-1线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.09%,RSD=1.25%。与空白对照组比较,缺氧/复氧组心肌细胞存活率显著降低(P约0.01);与缺氧/复氧组比较,IsoL、IsoM、IsoH剂量干预组心肌细胞存活率均显著升高。结论异芹菜脑对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有一定的保护作用,隔山香药材中异芹菜脑的HPLC测定方法准确、简便、重现性好,有助于完善隔山香药材的质量控制。 邓丽红 陈建南 强皎 李润美 汪芳 朱莉 张军关键词:心肌细胞 蒲黄的抗血栓有效部位筛选 被引量:8 2014年 目的:确定蒲黄抗血栓作用的主要活性部位。方法:对蒲黄不同提取部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)对体外血小板聚集作用进行筛选,进一步研究蒲黄活性部位对胶原蛋白-肾上腺素和角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成的影响,蒲黄有效部位对大鼠体内血栓模型及血管壁的作用。结果:蒲黄乙酸乙酯部位对花生四烯酸、二磷酸腺苷、胶原、凝血酶诱发家兔体外血小板聚集的抑制率分别为40.08%,33.09%,37.91%,34.71%,水部位则为29.29%,28.65%,28.33%,32.29%;而蒲黄乙酸乙酯部位对胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠死亡和偏瘫的保护率为50%,对角叉菜胶诱发小鼠黑尾发生率为50%;同时乙酸乙酯部位可明显抑制大鼠体内血栓的形成,并对血管内皮有明显的保护作用。结论:初步认为乙酸乙酯部位为蒲黄抗血栓作用的主要活性部位。 何国林 周卫军 王羚郦 李远彬 强皎 陈燕燕关键词:抗血栓作用 活性部位 姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激下内皮细胞的保护作用与机制研究 被引量:2 2016年 目的研究姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激下人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护性作用及其机制。方法采用MTT法检测HUVECs的细胞活力;生化比色法和ELISA法检测细胞培养上清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)的含量;实时RT-PCR检测HUVECs的Caspase 3、Caspase 9、Bcl-2、Bax基因的mRNA相对表达水平。结果 1×10^(-7)mol·L^(-1)AngⅡ刺激可以使HUVECs活力降低,使细胞培养上清中SOD、NO含量减少,使MDA、LDH及ET-1含量升高。AngⅡ刺激下HUVECs的Caspase 3、Caspase 9、Bax基因的mRNA相对表达水平均有所上调,Bcl-2基因的mRNA相对表达水平有所下调。不同剂量的姜黄素能够减少AngⅡ刺激下对HUVECs的损伤作用,能够上调SOD、NO的含量及Bcl-2基因的mRNA相对表达水平,同时下调MDA、ET-1及LDH含量及Caspase 3、Caspase 9、Bax基因的mRNA相对表达水平。结论姜黄素对于AngⅡ刺激下的HUVECs具有保护作用,其机制可能与减少细胞氧化应激损伤以及抑制细胞线粒体途径凋亡有关。 董正妮 云彩霞 田立俊关键词:姜黄素 人脐静脉内皮细胞 氧化应激 细胞凋亡 仁术微乳凝胶膏剂的制备 被引量:10 2016年 目的将仁术脐贴基质改制成微乳凝胶膏剂,并通过其透皮吸收与止泻作用进行验证。方法制备仁术处方(砂仁、苍术、肉桂、丁香)挥发油微乳,正交试验考察聚丙烯酸钠(NP-700)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K90)、甘羟铝、甘油用量对制备工艺的影响。以桂皮醛和丁香酚为指标,改良的Franz扩散池法研究凝胶膏剂的体外透皮吸收。通过番泻叶致小鼠腹泻模型,评价凝胶膏剂的止泻作用。结果最佳条件为0.4 g PVP-K90,1.0 g NP-700,0.08 g甘羟铝,6 g甘油。与仁术脐贴比较,凝胶膏剂中桂皮醛、丁香酚的透皮吸收速率分别提高了3.54、4.06倍,24 h累积透过率分别提高了2.86、2.84倍。其止泻作用显著优于同浓度低剂量仁术脐贴(含0.97%挥发油),并与后者高剂量(含10%挥发油)相当。结论所制备的仁术微乳凝胶膏剂透皮吸收快、止泻效果好、皮肤相容性佳,兼备微乳与凝胶膏剂的优点。 刘帝灵 朱莉 林吉 杨帆 余志和 张军关键词:桂皮醛 丁香酚 止泻作用 隔山香正丁醇部位对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制的影响 被引量:1 2017年 目的:研究隔山香(Lemonfragrant Angelica Root,LAR)正丁醇部位对大鼠胸主动脉环的舒张作用,并探讨其可能的作用机制。方法:采用离体大鼠胸主动脉血管环灌流方法,考察0.34,0.65,1.22 g·L-1隔山香正丁醇部位对氯化钾(KCl)和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)预收缩的血管环张力的影响。在无Ca2+Kreb’s液中,考察0.34,0.65,1.22 g·L-1隔山香正丁醇部位对氯化钙(Ca Cl2)量效曲线的影响和NE预收缩的血管环张力的影响。激光共聚焦扫描显微镜检测平滑肌细胞内[Ca2+]i的变化。结果:隔山香正丁醇部位对KCl和NE预收缩的内皮完整和去除内皮血管环均具有浓度依赖性的舒张作用(P<0.01),并且去除内皮后的舒张作用未受影响;无Ca2+条件下,隔山香正丁醇部位能使Ca Cl2,NE预收缩强度显著性降低(P<0.01)。激光共聚焦扫描显微镜下,隔山香正丁醇部位(1.22 g·L-1)能抑制KCl,NE和毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)引起的平滑肌细胞内[Ca2+]i升高。结论:隔山香正丁醇部位对大鼠胸主动脉血管有一定的舒张作用,可能通过抑制外钙内流和内钙释放发挥作用。本实验为隔山香水蒸气蒸馏后煎煮入药的成药制备工艺和水溶性药效指标成分的分离提供了依据。 刘宇 银杉杉 刘磐 邓丽红 闫福曼 张双伟 张军关键词:胸主动脉环 平滑肌细胞 激光扫描共聚焦