国家高技术研究发展计划(2006AA022453) 作品数:10 被引量:86 H指数:3 相关作者: 庄辉 王玲 王佑春 朱永红 李卓 更多>> 相关机构: 北京大学 中国药品生物制品检定所 北京市卫生局 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 江苏省医学重点人才培养基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
应用蛋白芯片技术筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原 被引量:3 2009年 目的筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原以便研发新型戊型肝炎诊断试剂。方法通过计算机辅助软件分析,利用改构的高效表达载体表达了HEV 1型与HEV 4型ORF2和ORF3的17种表位抗原,利用蛋白芯片技术平台筛选优势表位抗原。结果在所获得的17种表位抗原中筛选到4种可以作为研发新型戊型肝炎诊断试剂候选抗原的优势表位抗原。结论利用蛋白芯片技术快速准确地筛选到4种可用于研发新型戊型肝炎诊断试剂的候选优势表位抗原。 陈坤 宋晓国 王国华 朱翠侠 冯晓燕 王佑春 李卓 张贺秋关键词:戊型肝炎病毒 蛋白芯片 急性戊型肝炎患者血清病毒抗原检测的临床意义 被引量:2 2009年 目的:探讨戊型肝炎抗原诊断试剂在临床诊断戊型肝炎病毒感染中的作用。方法:应用酶联免疫吸附试验方法检测戊型肝炎病毒抗原(HEV-Ag)试剂,对387例急性戊型肝炎患者血清标本进行检测,同时进行HEV RNA、抗HEV-IgM、抗HEV-IgG检测。结果:387例急性戊型肝炎患者血清HEV-Ag 140例(36.18%)阳性;单纯抗HEV-IgM阳性组的HEV-Ag阳性率最高;12例患者早期血清HEV-Ag阳性,随访过程中抗HEV-IgM与抗HEV-IgG阳转。结论:通过HEV-Ag检测,可以提高戊型肝炎病毒感染的诊断水平。 郝娃 赵晨燕 李卓 严艳 牛京勤 殷继明 王佑春关键词:急性病 猪戊型肝炎病毒株swGX32全基因组序列分析 被引量:3 2008年 目的分析从广西地区分离的1株猪戊型肝炎病毒swGX32全基因组序列并比较其与其他分离株的差异。方法设计PCR引物,用巢式反转录聚合酶链反应法(RT—nPCR)分段扩增戊型肝炎病毒(HEV)株swGX32全基因序列,用cDNA末端快速扩增法(RACE)扩增其末端序列,对扩增产物进行克隆和测序,并对拼接后的基因组进行序列和进化分析。结果除3’polyA尾巴外,swGX32全长7240nt,ORF1与ORF2重叠4nt,ORF3包含在ORF2序列中。swGX32全基因序列与HEV1—4型核苷酸序列的同源性分别为:73%-74%、73%、74%-75%,83%-94%,其中与中国人源HEV株JKO—ChiSai98C同源性最高,达94%。全基因序列进化分析显示,swGX32位于HEV基因4型分枝上,ORF2部分核苷酸序列进化分析显示,swGX32与JKO—ChiSai98C同在HEV4a亚型分枝上。结论猪HEV swGX32在全基因组结构及分子进化上均与人HEV JKO—ChiSai98C有密切关系,为揭示戊型肝炎是一种人兽共患病提供了分子生物学依据。 吉彦莉 李凌君 韦献飞 王玲 常义斌 唐荣兰 朱永红 庄辉关键词:戊型肝炎病毒 基因型 人畜共患病 实时荧光逆转录PCR检测戊型肝炎病毒RNA的临床应用 被引量:2 2009年 目的探讨实时荧光逆转录(RT)-PCR方法检测急性戊型肝炎患者血清戊型肝炎病毒(HEV)RNA的意义。方法采用实时荧光RT—PCR方法,对HEVORF3基因保守区进行扩增和检测。收集北京佑安医院住院和门诊434例急性戊型肝炎患者血清;甲型肝炎患者40例、乙型肝炎患者100例、健康献血员110名作为对照组;提取HEVRNA进行荧光RT—PCR检测。结果434例急性戊型肝炎患者血清中232例(53.5%)为HEVRNA阳性。对照组血清HEVRNA检测均为阴性。与血清抗-HEVIgM检测比较,434例急性戊型肝炎患者HEVRNA检测的总符合率为67.1%,两种检测方法差异有统计学意义(Kappa=0.308,P=0.000)。5例患者的首份血清检测为HEVRNA阳性,但抗.HEVIgM为阴性,系列追踪检测,相继出现抗-HEVIgM阳性。急性戊型肝炎患者的血清HEVRNA的检出多在发病的2~10d内。结论荧光lit—PCR方法有较高的特异性,应用实时荧光RT—PCR方法能对Ⅰ和Ⅳ戊型肝炎病毒感染的患者血清中的RNA进行定性检测。在临床使用可以提高对HEV早期诊断的水平。 严艳 赵晨燕 李卓 牛京勤 阎宝山 郝娃 殷继明 王佑春关键词:肝炎 戊型 戊型 病毒 逆转录聚合酶链反应 戊型肝炎疫苗研究进展 被引量:7 2009年 戊型肝炎(戊肝)病毒(HEV)经粪-口途径传播,有嗜肝性,发病时表现为急性肝炎。在亚洲及非洲发展中国家均有传播,中国亦有分布。在发达国家,HEV主要影响猪和禽的养殖,密切接触生猪及鲜猪肉的人群中,抗-HEV抗体阳性率较高。虽然在发达国家仅有零星病例,但是普通人群中抗体阳性率比预期要高^[1]。在中亚和东南亚, 肖楠 石爽 庄辉关键词:戊型肝炎疫苗 戊型肝炎病毒 疫苗研究 基因4型戊型肝炎病毒致肝功能衰竭一例 2012年 患者男,79岁。因“乏力、纳差伴眼黄、尿黄进行性加重3周余”于2010年6月25日入院。发病后,外院给予保肝、降酶、退黄治疗,病情持续进展。2010年6月14日查肝功能:TBil 161μmol/L,DBil93μmol/L,ALT167U/L,AST234U/L;1周后复查肝功能: 耿家宝 程岩 隋云华 王敏 王玲 汪茂荣关键词:肝功能衰竭 戊型肝炎病毒 基因 TBIL 进行性加重 戊型肝炎病毒基因分型及动物感染率的研究进展 被引量:2 2009年 戊型肝炎(戊肝)病毒(HEV)主要经粪一口途径传播,多发生在卫生条件较差的发展中国家,常因水源被污染而造成大规模的流行;发达国家主要是散发病例,多由食人污染的食物引起^[1]。近年来也有经输血传播戊肝的报道^[2,3]。1983年前苏联病毒学家Balayan用免疫电镜技术首先在粪便标本中观察到HEV颗粒, 常义宾 王玲 朱永红 庄辉关键词:戊型肝炎病毒 基因型 动物宿主 人兽共患病 北京市郊区八种动物戊型肝炎病毒抗体流行率调查及病毒基因型研究 被引量:7 2010年 目的调查北京地区与人密切接触的猪、牛、羊、马、驴、犬、鸡、鸭8种动物血清中戊型肝炎病毒(HEV)抗体流行率及该地区猪HEV基因型和亚型。方法收集8种动物的血清标本及幼猪粪便标本,用双抗原夹心ELISA法检测血清中抗-HEV;用巢式反转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测HEVRNA;对部分PCR产物进行克隆和测序,并对测序结果进行基因分型。结果在8种动物中抗-HEV阳性率分别为猪80.43%(481/598),其中成猪(〉6月龄)为87.86%(369/420),幼猪(2~3月龄)为62,92%(112/178);牛15.02%(52/346);马14.29%(40/280);驴0(0/26);羊9.88%(33/334);犬0(0/21);鸭3.03%(7/231);鸡2.53%(8/316)。RT-nPCR检测3月龄以下猪粪便标本HEVRNA阳性率为66.67%(74/111)。HEVRNA阳性的标本测序后可归为6株(分别命名为bjsw1、bjsw2、bjsw3、bjsw4、bjsw5和bjsw6),6株HEV开放读码框2(0RF2)部分核苷酸序列的相似性为94.5%~99.6%,与1、2、3、4型HEV的相似性分别为75.6%~78.6%、75.6%~76-2%、77.1%~80.7%和83.7%~94.5%。6株HEV与人HEV4d亚型的同源性最高,为90.0%~94.5%。结论北京市郊区猪、牛、马、羊、鸭、鸡中均存在HEV感染,其中猪抗-HEV流行率最高,驴、犬抗-HEV的流行率最低;6株猪HEV属于基因4型、4d亚型。 耿家宝 付红伟 王玲 王晓娟 关建民 常义宾 李凌君 朱永红 庄辉 刘全红 彭兴春关键词:戊型肝炎病毒 抗-HEV 人兽共患病 兰州市猪戊型肝炎血清学及病毒基因型分析 被引量:2 2010年 目的调查甘肃省兰州市猪戊型肝炎病毒(HEV)感染情况以及基因型。方法收集兰州市部分地区猪血清,用ELISA诊断试剂盒分别检测HEV抗原和抗体;其中抗原阳性的血清,采用HEVORF2引物进行套式逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)扩增,对阳性扩增产物进行克隆和测序,并对序列进行分析,确定其基因型。结果 3月以下猪戊型肝炎病毒抗原、抗体阳性率分别为1.56%和90.27%,3个月以上分别为2.35%和86.99%,抗原、抗体水平在3月龄以上和以下二者中差异无统计学意义,抗原阳性血清共有22份,其中7份为HEV核酸阳性,其核苷酸序列与HEV4型的同源性为82.2%~99.3%,分别为4a、4d和4f亚型。结论兰州市猪群存在HEV感染,且为基因4型。 冯若飞 马忠仁 乔自林 李明生 冯玉萍 赵晨燕 王佑春关键词:戊型肝炎病毒 基因型 中国戊型肝炎流行病学研究进展 被引量:61 2010年 戊型肝炎(戊肝)既往称肠道传播的非甲非乙肝炎.1983年Balayan等用免疫电镜技术首次从实验感染的患者粪便中观察到病毒颗粒.1986-1988年新疆地区曾发生大规模流行,我国学者利用患者粪便中分离的病毒,建立了检测相应抗体的方法,但未能推广.1990年美国学者用分子克隆技术获得了该病原体全序列,并命名为戊肝病毒(hepatitis E virus,HEV).现将有关戊肝流行病学研究进展综述如下. 周乙华 庄辉关键词:戊型肝炎 流行病学