辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2008779)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：马海英孔力喻博石玉秀李花更多>>
- 相关机构：大连医科大学中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 脑源性神经营养因子基因修饰的胚胎大鼠皮质神经干细胞及其在体外的分化被引量：3
- 2011年
- 目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰大鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)后BDNF的表达,并观察其对NSCs体外诱导分化的影响。方法体外分离、培养大鼠胚胎脑皮质神经干细胞并鉴定;构建BDNF基因重组质粒,非脂质体法转染NSCs,实验分为pcDNA3.1-BDNF组、pcDNA3.1组和未转染NSCs组。免疫细胞化学技术和RT-PCR检测转染后BDNF蛋白和mRNA的表达;在含5%胎牛血清的分化培养基中诱导分化,βIII-微管蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和突触素(SYP)免疫细胞化学染色对分化细胞进行鉴定,并观察pcDNA3.1-BDNF转染NSCs分化过程中SYP的表达变化。结果体外培养获得巢蛋白(nestin)阳性的NSCs。成功构建BDNF基因重组质粒,免疫细胞化学和RT-PCR检测均显示,与pcDNA3.1组和NSCs组比较,pcDNA3.1-BDNF组NSCs的BDNF表达明显增强(P<0.05)。pcDNA3.1组和NSCs组比较,无显著性差异(P>0.05)。分化后第4天,各组细胞均可分化为βIII-微管蛋白阳性和GFAP阳性细胞,pcDNA3.1-BDNF组可见少量SYP阳性表达细胞。分化后第7天,与pcDNA3.1组和NSCs组比较,pcDNA3.1-BDNF组NSCs分化为βIII-微管蛋白阳性神经元的比例明显增高,有显著性差异(P<0.05),SYP阳性细胞数增多,表达增强。结论 BDNF转染NSCs具有体外分泌BDNF的能力,能够促进NSCs定向分化为神经元,SYP表达增强,可能在促进神经元之间的突触发生中发挥作用。
- 马海英喻博孔力李花石玉秀
- 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子分化胚胎
