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凡纳滨对虾28．5kD血蓝蛋白的降解新片段被引量：8: 2008年; 血蓝蛋白是一种具有多种非特异性免疫学活性且可以产生免疫学活性降解片段的多功能蛋白。为了探索血蓝蛋白新的降解片段,本研究以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,采用比较蛋白质学技术分析对虾感染病原菌后血清蛋白质组的变化。结果发现,对虾感染副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)12h后,血清中新增一种28.5kD的蛋白(命名为p28.5)。经MALDI-TOF/MS分析,其与凡纳滨对虾血蓝蛋白75kD亚基具有高度同源性。进一步研究显示,p28.5蛋白不仅可与抗血蓝蛋白抗体发生特异性结合,而且还与对虾抗感染能力呈正相关。由此推测,p28.5蛋白应该是对虾感染病原菌后产生的一种28.5kD血蓝蛋白降解新片段,其可能是血蓝蛋白发挥免疫学功能的一种新方式的产物。; 章跃陵叶向群陈洁辉黄通旺胡忠李远友; 关键词：凡纳滨对虾 KD 血蓝蛋白抗感染

急性期反应蛋白的研究进展被引量：8: 2008年; 感染、炎症、组织损伤等应激原导致机体血浆中多种蛋白质浓度在短期内迅速变化,这些蛋白质被称为急性期反应蛋白.本文主要介绍了急性期反应蛋白的分类、生物学功能和合成的调控机制以及近年来相关的应用和研究现状,并对研究的发展趋势做了进一步分析.; 陈锋菊严芳; 关键词：急性期反应蛋白急性期反应细胞因子 C-反应蛋白

凡纳滨对虾血蓝蛋白酚氧化酶活性的研究被引量：26: 2008年; 试验结果表明,凡纳滨对虾血蓝蛋白在胰蛋白酶诱导下可表现出一定的酚氧化酶活性,与对照组相比,其酚氧化酶活力单位显著上升。同时,其活性可被D-半乳糖、α-葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇和N-乙酰神经氨酸不同程度地抑制,其抑制率分别为67%、100%、33%、33%、67%和100%。血蓝蛋白与胰蛋白酶孵育后经SDS-PAGE分析和L-Dopa显色,其75 kDa单体呈明显的棕褐色,添加抑制剂N-乙酰神经氨酸之后,其显色强度显著减弱。由此进一步证实凡纳滨对虾血蓝蛋白在胰蛋白酶诱导下确实具有酚氧化酶活性,其活性可被不同的糖所抑制,其发挥活性的单体为75 kDa单体。; 严芳章跃陵罗活强胡忠黄通旺叶向群; 关键词：凡纳滨对虾血蓝蛋白酚氧化酶活性

5种凡纳滨对虾血蓝蛋白的糖基化修饰及功能对比分析被引量：10: 2009年; 血蓝蛋白是近年来发现的一种多功能蛋白,但其功能多样性的分子基础尚不清楚.本研究采用亲和层析、糖含量测定、凝集素印迹等技术在凡纳滨对虾血清中发现5种糖含量各不相同的血蓝蛋白:HMC、HMCb-、HMCb、HMCs-和HMCs,其中HMCs-糖含量最高,HMCb最低,前者约为后者的5倍.继而运用非特异性免疫学实验技术对其功能进行对比分析.结果显示,不同糖基化血蓝蛋白的免疫学活性不同,HMCs-具有较强的红细胞凝集活性和酚氧化酶活性,HMCb-和HMC分别具有较强的细菌凝集活性和溶血活性.特别是当血蓝蛋白糖基被氧化后,5种血蓝蛋白的凝集活性、溶血活性全部丧失,酚氧化酶活性下降约11～28倍.由此推测,血蓝蛋白糖基修饰多样性可能是其功能多样性的分子基础之一.; 章跃陵邢立刚严芳黄锡望杜志恒乔杰林仲旸李远友; 关键词：血蓝蛋白糖基化多样性分子基础

凡纳滨对虾血清中直接与病原菌相结合的主要蛋白的鉴定被引量：15: 2008年; 以凡纳滨对虾为研究对象，将其血清分别与溶藻酸弧菌，哈维氏弧菌，嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等4种病原菌孵育，采用亲和蛋白质组学和Western-blotting等分子生物学方法纯化、鉴定和确证其中可与病原菌直接结合的蛋白。结果发现，与对照组相比4种病原菌与虾血清孵育5h后均可与对虾血清中分子质量约为75000（p75）的蛋白相结合，而孵育15h后既可与p75相结合，还可与分子质量约为77000（p77）的蛋白以及0～4种不同分子质量的蛋白相结合。经MALDI-TOF／MS分析和Mascot搜索引擎检索，p75和p77蛋白分别与凡纳滨对虾中分子质量约为75000、77000的2个血蓝蛋白亚基具有显著一致性。尤其是p75蛋白还可与兔抗血蓝蛋白75000亚基抗体发生特异性结合。由此推断，凡纳滨对虾血清中与病原菌直接结合的主要蛋白为血蓝蛋白，提示血蓝蛋白全蛋白可能具有抗菌活性。; 章跃陵林智建李祖江严芳李远友叶向群; 关键词：凡纳滨对虾血蓝蛋白抗菌活性

锯缘青蟹血蓝蛋白酚氧化酶活性研究被引量：5: 2009年; 以锯缘青蟹Scylla serrata为研究对象,运用亲和层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、十二烷基璜酸钠(SDS)-PAGE、Western-blot以及酚氧化酶活性测定等方法研究了锯缘青蟹血蓝蛋白的酚氧化酶活性以及几种金属离子对其酚氧化酶活性的影响.研究结果表明,锯缘青蟹血蓝蛋白在没有任何诱导物作用的情况下表现出酚氧化酶活性,胰蛋白酶对此活性有轻微抑制作用;与对照组相比,Ca2+和Cu2+能使血蓝蛋白酚氧化酶活性显著增强,增强率分别为281%和273%;EDTA可显著抑制Cu2+对血蓝蛋白酚氧化酶活性的激活作用,抑制率达78.5%.由此可知,锯缘青蟹血蓝蛋白确有酚氧化酶活性,且受Ca2+、Cu2+等金属离子作用的影响.; 陈锋菊严芳杨平; 关键词：锯缘青蟹血蓝蛋白酚氧化酶活性

凡纳滨对虾血蓝蛋白与病原菌凝集作用靶标的鉴定被引量：7: 2008年; 血蓝蛋白是一种具有多种非特异性免疫学活性的多功能蛋白,以前的研究发现,血蓝蛋白具有凝集活性.本研究采用凝集抑制实验和亲和蛋白质组学等方法探索凡纳滨对虾血蓝蛋白与病原菌的凝集作用靶标.结果显示,大肠杆菌K12和副溶血弧菌外膜蛋白可以抑制血蓝蛋白对7种细菌的凝集活性,其中大肠杆菌K12中2种分子质量分别为16kD、18kD(命名为p16、p18)的外膜蛋白可以与血蓝蛋白发生特异性的结合,经MALDI-TOF/MS鉴定,p16、p18分别与大肠杆菌外膜蛋白OmpC、OmpX具有高度同源性.尤其是与大肠杆菌K12野生菌株相比,血蓝蛋白对ΔOmpX的凝集特异性明显降低,后者仅为前者的25%.由此推测,OmpX应为血蓝蛋白与病原菌的凝集作用靶标.; 章跃陵严芳樊大军蒋瑞萍胡忠李远友; 关键词：血蓝蛋白凝集活性

Hemocyanin from the Shrimp Litopenaeus vannamei Shows Hemolytic Activity: Hemocyanin is an extracellular giant copper-containing protein presenting in the hemolymph of both mollusk and...; Yueling Zhang Fang Yan Xianliang Zhao Shaoying Min Yuanyou Li Department of Biology,and Marine Biology Institute,School of Sciences,Shantou University,Shantou 515063,People's Republic of China; 关键词：HEMOCYANIN HEMOLYSIS OLIGOMERIZATION; 文献传递

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广东省自然科学基金(06027212)