江苏省自然科学基金(BK2002406)
- 作品数:9 被引量:73H指数:5
- 相关作者:赵晓联孙秀兰孙蔚榕汤坚张银志更多>>
- 相关机构:江南大学江苏省微生物研究所有限责任公司张家港出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程生物学环境科学与工程更多>>
- 藻毒素的危害及分析方法进展被引量:11
- 2005年
- 随着水体污染和富营养化程度的加剧,藻类“水华”危害日趋严重,本文简述了淡水中藻毒素的产生、化学结构及毒性机理,重点综述了检测藻毒素的各类分析方法以及最新的研究进展,尤其对目前国内外广泛应用的灵敏、高效的色谱分析方法(如HPLC/MC,GC/TMS/MS/CE)和更快速、更有效的免疫分析方法进行了详细的综述,提出了开发更新的仪器分析技术、生化分析技术、生物传感器等,及操作更简便、特异性更强、检测速度更快捷的免疫检测技术是今后藻毒素分析方法的发展方向。
- 赵晓联孙秀兰汤坚
- 关键词:藻毒素
- 粮油食品中呕吐毒素危害及风险分析被引量:24
- 2007年
- 该文分析呕吐毒素性质,在自然界和粮油食品中存在情况,及对人类和动物危害,并进行风险评估,同时提出预防呕吐毒素危害建议。
- 孙秀兰邵景东王俊双
- 关键词:粮油食品呕吐毒素食品安全
- 藻毒素免疫抗原的制备及鉴定被引量:8
- 2005年
- 目的为建立藻毒素(MCLR)免疫学检测方法,制备具免疫功能的MCLR完全抗原。方法根据MCLR分子中的羧基和蛋白质分子中的氨基,利用“活泼酯法”和“碳二亚胺法”分别制备MCLRKLH(匙孔血蓝蛋白)免疫抗原和MCLRBSA(牛血清白蛋白)检测抗原。结果用紫外光谱法(UV)和Bradford蛋白含量测定法鉴定,结合物中MCLR与KLH、BSA的结合摩尔比为9.1∶1和9.4∶1。采用“皮下注射法”用MCLRKLH免疫新西兰大白兔15周,取血清,用“间接酶联免疫吸附法”(id-ELISA)鉴定抗MCLR多克隆抗体效价,最高达1∶25600。结论证明制备的MCLRKLH具有免疫性。
- 赵晓联孙蔚榕孙秀兰汤坚
- 关键词:藻毒素
- 微囊藻毒素(MC-LR)多克隆抗体的制备、纯化及鉴定被引量:3
- 2006年
- 目的制备针对藻毒素(MCLR)的多克隆抗体,并鉴定其特性。方法利用合成的免疫抗原MCKLH结合物,按常规方法免疫新西兰大白兔20周,经离心、硫酸铵沉淀法制得纯化的抗体,计算其亲和常数,用间接竞争法测定效价、抑制率IC50及特异性。结果纯化的MCLR抗血清效价大于25600,最低检出限为0.01ngml,IC在0.1~1ngml之间,与MCLW和MCLF的交叉反应率为0.1%~20%。
- 赵晓联孙蔚榕刘媛刘贤金
- 关键词:多克隆抗体
- 国内微囊藻毒素毒理学研究进展被引量:4
- 2005年
- 微囊藻毒素对人类已产生潜在的危害,正日益受到公众的广泛关注,而国内对微囊藻毒素的毒理学研究已取得了较大的进展,微囊藻毒素对肝癌的促进作用已进入了分子水平的机制研究,对其它脏器的毒理学研究也逐步深入。文章对近十几年来该研究进展进行了综述。
- 赵晓联
- 关键词:微囊藻毒素毒理学
- 黄曲霉毒素B_1金标检测体系建立过程中的影响因素被引量:7
- 2006年
- 详细研究了纳米金标记免疫检测体系建立过程中的影响因素,包括检测带的信号强度、封闭试剂,纳米金探针的浓度、包被试剂A和B的浓度、纳米金溶胶的颗粒尺寸,及检测过程中的化学体系等。通过参数优化,确立了建立快速、简易的金标试剂条检测方法的最佳条件。探针溶液中加入保护试剂K后,试剂条的稳定性有明显的提高,常温下试剂条保存期可达120 d(信噪比保留70%以上)。
- 孙秀兰张银志汤坚赵晓联
- 关键词:黄曲霉毒素B1纳米金免疫层析
- 金标免疫层析试条检测样品中黄曲霉毒素B_1的误差分析被引量:13
- 2007年
- 为了扩大金标免疫层析试条(GICA)检测食品和饲料中黄曲霉毒素B1的应用范围,研究了样品基质对试剂条信号强度的影响,探讨了GICA测定饲料和各种发酵类食品样品时,提取液中NaCl、金属离子(Fe3+,Cu2+,Pb2+,As3+)和脂肪含量对检测结果的影响,并研究了消除影响的方法。结果表明,3种阴性样品(大米、玉米和小麦粉)均存在不同程度的非特异性干扰,大米的影响最小,其次为玉米和小麦粉,大米的最佳稀释倍数为10倍,玉米和小麦粉为30倍;随NaCl质量浓度增加,检测结果有偏向假阳性的趋势;4种金属离子对检测结果的影响程度依次为Fe3+>Cu2+>Pb2+>As3+;随着样品中油脂含量的增高,用GICA检测结果偏阳性的程度加剧。对粗提取液用氯仿法萃取后挥干再溶解,可将盐离子和重金属离子对测定的影响控制在允许范围之内;用石油醚脱脂,可使油脂对测定结果的影响降到最低。
- 孙秀兰张银志汤坚朱瑜
- 关键词:黄曲霉毒素B1误差分析
- 抗微囊藻毒素单克隆抗体胶体金标记物的制备及鉴定被引量:1
- 2006年
- 目的制备抗微囊藻毒素(MC-LR)单克隆抗体胶体金标记物,并利用光谱分析来探讨结合物的合成机理。方法用杂交瘤技术生产并纯化的抗MC-LR的单克隆抗体,利用胶体金标记技术合成20nm粒径的胶体金与抗MC-LR单克隆抗体的结合物,通过光谱分析对偶联物中单克隆抗体的构象进行分析,ELISA法检测偶联物中抗体的免疫性。结果抗MC-LR单克隆抗体的效价达108,IC50抑制浓度为3ng/ml,为IgG2a亚型,分子量为1·5×105,与MC-LW、MC-LF无明显交叉反应。胶体金与抗体偶联物的颗粒圆整,光谱分析结果显示抗体蛋白的特征官能团没有发生明显变化,与胶体金粒子作用后结构略加紧密。ELISA结果显示偶联物仍然保持免疫原性。结论抗MC-LR单克隆抗体胶体金标记偶联物中抗体蛋白结构和抗原决定簇的位点没有改变,仍具有免疫原性,偶联物的稳定性良好。
- 赵晓联孙蔚榕孙秀兰江涛张银志汤坚
- 关键词:胶体金
- 微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析方法被引量:5
- 2007年
- 目的建立高灵敏的微囊藻毒素(MC-LR)的时间分辨荧光间接竞争免疫分析方法(MC-LR-TRnA)。方法以MC-LR与牛血清白蛋白的偶联物(MC-LR-BSA)包被96孔板为回相抗原,与游离MC-LR共同竞争有限的抗MC-LR多克隆抗体;用稀土离子Eu^3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。结果该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01—20μg/L,ED80、ED50和ED20分别为0.16、0.57和1.70μg/L。平均回收率为101%,与MC-LF和MC-RR平均交叉反应分别为0.73%和35%。比较MC-LR-TRFIA和MC-LR-E:LISA检测MC-LR,两者的相关系数为0.958。研究表明,MC-LR-TRFIA是目前报导的MC-LR检测中最灵敏的方法。结论该方法适用于水样中MC-LR的定量检测。
- 孙蔚榕黄飚时瑾江涛蔡正森赵晓联
- 关键词:微囊藻毒素免疫分析