国家自然科学基金(30672192)
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
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- 相关机构:中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
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- 输尿管完全梗阻早期大鼠肾脏差异蛋白质的筛选
- 2012年
- 目的筛查输尿管完全梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)早期肾脏损伤表达的特异蛋白质。方法将2月龄SD大鼠随机分成UU012h组和对照组(sham),每组各6只,取肾脏组织,应用双向电泳技术及蛋白质质谱分析技术,寻找输尿管完全梗阻早期动物模型肾脏组织的差异蛋白质。用RT-PCR对鉴定的差异蛋白mRNA进行验证。结果UU012h组与对照组相比,共有248个蛋白点下调,145个蛋白点上调,共找出19个差异蛋白点。经图像及统计分析,有6个可送质谱鉴定。其中搜索出两种蛋白,磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBPI)和线粒体ATP合酶亚基D(ATP5h),两种蛋白都上调1倍以上。RT-PCR结果提示PEBPl和ATP5hmRNA在对照组和UU012h组均有表达,且在UU012h组二者的表达呈上调趋势,与双向电泳的结果一致。结论UU012h组筛选并鉴定出PEBPl和ATP5h这两种蛋白质参与UUO后早期肾损伤,可能与足细胞的凋亡有关。
- 张磊赵琦杨屹李艳秋
- 关键词:输尿管梗阻蛋白质组
- 输尿管梗阻大鼠肾脏肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植被引量:1
- 2010年
- 目的观察携带肝细胞生长因子(HGF)基因的大鼠骨髓间充质干细胞静脉移植是否能够迁移、分布到单侧输尿管梗阻大鼠肾脏。方法体外分离培养雄性大鼠骨髓间充质干细胞,并转染腺病毒-HGF(Ad-HGF),采用ELISA方法检测转染后HGF的表达情况;建立16只雌性单侧输尿管梗阻大鼠动物模型,随机分为移植组和对照组,移植组经鼠尾静脉注入Ad~HGF转染的骨髓间充质干细胞,对照组注入等量生理盐水,于术后7d、14d取双侧。肾脏,制作石蜡切片,Y染色体原位杂交方法检测雌性受体大鼠肾脏中是否有骨髓间充质干细胞分布及分布情况。结果移植组术后7d梗阻侧肾脏可见Y染色体性别决定基因(Sry)阳性细胞,14dSry阳性细胞数明显减少(P〈0.05),主要分布在肾小管上皮细胞区,肾小球区未见Sry阳性细胞,而梗阻对侧及对照组双侧肾脏未见Sry阳性细胞。结论鼠尾静脉移植携带HGF基因的骨髓间充质干细胞能够定居于输尿管梗阻侧肾脏,并分布到肾小管上皮细胞区。
- 沈伟杨屹王常林孙荣国于雪馨
- 关键词:肝细胞生长因子间质干细胞输尿管梗阻
- 鼠输尿管完全梗阻后肾脏病理及足细胞表型改变的研究被引量:6
- 2010年
- 目的观察鼠输尿管完全梗阻后肾脏病理和足细胞表型改变的时序变化,寻找输尿管梗阻后肾脏发生不可逆损伤的时相。方法建立单侧输尿管完全梗阻动物模型,梗阻后不同时间点取出肾脏,经HE染色和免疫荧光双标方法,观察肾脏病理及足细胞表型的改变。结果大体观察,梗阻24h后出现肾盂扩张,梗阻3d后出现肾皮质变薄。组织学观察,梗阻12h后出现一部分近曲小管扩张,小管上皮细胞呈水样变性肿胀,在梗阻3d后出现大量小管上皮细胞变形肿胀。免疫荧光双标法,梗阻24h后有少量足细胞、巨噬细胞同时被2种抗体标记,2d后足细胞呈减少趋势,而巨噬细胞逐渐增多。结论输尿管梗阻后在肾脏病理改变早于肾脏发生形态学改变的发生,输尿管梗阻后24h发生足细胞表型的改变,与肾脏肾盂出现明显扩张的时间相近,随着梗阻时间的延长,肾脏病理改变逐渐加重,足细胞转化逐渐增多。
- 于雪馨王常林孙荣国杨屹
- 关键词:输尿管梗阻肾脏损伤
- 骨髓间充质干细胞移植在肾脏中的分化潜能及应用前景被引量:1
- 2009年
- 间充质干细胞为成体多能干细胞,广泛存在于骨髓、脐血及外周血等组织中,其中以骨髓含量最为丰富。它可在体外分离、培养及诱导分化,具有多向分化潜能,可向中胚层、内胚层和神经外胚层来源的组织细胞分化,包括成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、肝细胞、神经细胞和肾脏细胞等,在一些领域已应用于临床。间充质干细胞转化为肾脏细胞并进行细胞移植这一方法在肾脏疾病细胞替代治疗方面显示了巨大的应用前景。
- 沈伟杨屹
- 关键词:骨髓祖代细胞细胞转化肾疾病
- 大鼠单侧输尿管梗阻模型肾脏足细胞损伤及转化的研究被引量:2
- 2013年
- 目的研究大鼠单侧输尿管梗阻模型中肾脏足细胞损伤及表型转化情况。方法制作单侧输尿管梗阻模型,观察生后1d、2周、2个月SD大鼠单侧输尿管梗阻后肾脏病理改变,观察肾脏足细胞凋亡的发生和表型转化情况。结果输尿管梗阻后肾脏肾盂扩张,肾皮质逐渐变薄,低龄大鼠肾脏病变较大龄鼠明显。随梗阻时间延长,肾脏损害进行性加重。实验组均为足细胞最先发生凋亡,生后1d大鼠术后4h足细胞发生凋亡,2个月大鼠术后1d足细胞发生凋亡。单侧输尿管梗阻术后1dN见足细胞发生表型转化,术后3d可见肾小管上皮细胞发生表型转化。结论单侧输尿管梗阻引起肾脏损伤,随着肾积水程度加重,肾脏损害加重。而且低年龄组大鼠肾脏病理改变较高年龄组早且严重。单侧输尿管梗阻导致足细胞及肾小管上皮细胞凋亡,且足细胞凋亡早于肾小管上皮细胞。同时单侧输尿管梗阻还诱发足细胞转化为巨噬细胞,足细胞发生上皮间质转化早于小管上皮细胞。
- 孙荣国刘鑫刘舸杨屹王常林
- 关键词:输尿管梗阻足细胞细胞凋亡