河北省应用基础研究计划(12967149D) 作品数:23 被引量:46 H指数:4 相关作者: 王冬梅 侯春燕 韩胜芳 刘娜 孙天杰 更多>> 相关机构: 河北农业大学 北京诺禾致源科技股份有限公司 河北省环保产品质量监督检验院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省应用基础研究计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 金属学及工艺 更多>>
TaGSO1的克隆及其在叶锈菌侵染TcLr26过程中的表达分析 被引量:1 2018年 为了挖掘新的小麦抗叶锈菌相关基因,本试验利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术从小麦抗叶锈近等基因系TcLr26中克隆得到抗病相关基因TaGSO1,对其进行生物信息学分析,并对其在小麦与叶锈菌互作过程中的转录水平表达模式进行检测。分析结果显示,该基因全长2598bp,编码866个氨基酸,其蛋白结构包含7个LRRs结构域和1个跨膜区以及1个短的细胞质结构,属于典型的LRR-RLPs受体蛋白;系统发育分析表明,TaGSO1基因与来自乌拉尔图小麦的EMS54105.1基因亲缘关系最近。RT-qPCR分析结果表明,该基因在TcLr26与叶锈菌的不亲和互作过程其表达量随接种时间延长明显升高,而在亲和组合中该基因的表达量很低,并且随着侵染时间的延长表达量几乎没有变化。外施SA发现TaGSO1的表达受SA诱导,推测该基因可能介导了SA信号传导途径。 李芳 张芳芳 顾佳 安瑞朋 张洁 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 RT-QPCR TaGAD在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用 被引量:3 2018年 本研究以小麦近等基因系TcLr26及其轮回亲本Thatcher(Tc)分别与叶锈菌生理小种260组成不亲和组合及亲和组合,利用RT-qPCR技术检测发现TaGAD的表达在不亲和组合接种后早期(4,8,12h)没有明显变化,从接种后16~72h伴随着HR的发生被诱导表达;而在亲和组合中TaGAD只在接种后8~12h表达有所增加;利用瞬时转化烟草,发现TaGAD定位于细胞质;利用RNAi技术沉默TaGAD基因后,与对照相比单侵染点寄主HR面积明显减少。研究结果表明,TaGAD在小麦抵抗叶锈菌侵染的HR发生中发挥着重要作用。 刘好良 李彤彤 李楠楠 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 过敏性反应 叶锈菌侵染的小麦叶片转录组数据分析 被引量:10 2019年 选取小麦近等基因系Tc Lr26与其轮回亲本Thatcher(Tc),与叶锈菌生理小种260分别组成不亲和及亲和组合,通过Illumina/Solexa平台的HiSeq^TM2000高通量测序技术对接种叶锈菌后的小麦转录组进行测序,利用Trinity软件将数据组装形成转录本,对所有转录本进行COG、GO和KEGG分类和功能注释、Pathway注释以及蛋白编码区的预测。结果表明,转录组测序片段经de novo拼接共得到87291条平均长度866 bp的Unigenes;通过功能聚类,分别获得25个COG分类、55个GO功能亚类和128条KEGG通路;差异表达基因分析显示,相对于亲和组合,不亲和组合在接种叶锈菌后8 h上调Unigenes4037条,下调Unigenes 1949条;接种后24 h,上调Unigenes 2122条,下调Unigenes 3248条。其中植物与病原物互作过程中的钙信号通路,活性氧爆发及SA信号通路相关基因在不同时间有差异表达,在接种后8 h所表达的差异基因可能与基础防卫反应诱发密切相关,而在接种后24 h的差异表达基因可能与Lr26介导的过敏性防卫反应表达有紧密联系。这为深入分析和发掘小麦抗叶锈病相关基因及系统研究小麦抗锈病分子机制奠定了坚实基础。 刘娜 乔妹 孙嘉伟 陈琰 侯春燕 韩胜芳 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 转录组 小麦与叶锈菌互作过程中TaSnRK1的表达分析及其亚细胞定位 被引量:1 2021年 本研究选用叶锈菌生理小种260,与小麦近等基因系Tc Lr26及其轮回亲本Thatcher (Tc)分别组成不亲和组合和亲和组合,在7日龄小麦叶片上接种叶锈菌,采用实时定量PCR(RT-qPCR)对TaSnRK1基因的表达进行分析。并通过构建pSuper1300+-SnRK1表达载体对TaSnRK1进行亚细胞定位分析。由RT-qPCR结果可知,该基因在不亲和组合中,表达量随时间延长先升高后下降,且在12 h达到峰值;而在亲和组合中,表达量也呈现先升高后下降趋势,但表达量远远低于不亲和组合。亚细胞定位结果表明,TaSnRK1蛋白分布在细胞质和细胞核中。本研究结果为进一步深入探讨TaSnRK1的功能和作用机制奠定了基础。 汤文倩 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 亚细胞定位 在小麦和叶锈菌互作过程中TCTP的表达特征 2020年 翻译控制肿瘤蛋白是调节植物生长发育、参与植物抵抗逆境胁迫的重要调节因子。本研究以叶锈菌生理小种260与4种含有不同抗叶锈基因的近等基因系分别组成亲和程度不同的组合为对象,采用RT-qPCR和Western Blotting方法,从转录和翻译两个水平探讨TCTP在小麦与叶锈菌互作过程中的表达模式。研究结果表明,无论是转录水平还是翻译水平上,TCTP在不亲和组合中均表现为表达量显著上调,但在不同的Lr基因背景下其表达模式有所不同;而在亲和组合中并未表现出明显的变化趋势。基于TCTP mRNA和蛋白水平的结果,发现在小麦与叶锈菌互作体系中TCTP在转录水平和翻译水平均受到调控,推测其在小麦抵抗叶锈菌侵染的防卫反应中可能发挥正调控作用,这将为进一步研究TCTP的功能及其作用机制奠定了基础。 路兴通 麻楠 孙天杰 郭云杉 常亭亭 王冬梅关键词:TCTP 小麦 叶锈菌 植物中谷氧还蛋白研究进展 被引量:1 2021年 谷氧还蛋白(GRX)是一种小分子热稳定的蛋白质,广泛存在于动物、植物和微生物中。其中在动物和人体内研究较多,在植物中研究相对较少,在不同植物中谷氧还蛋白基因的数量和种类也不尽相同。谷氧还蛋白通常含有一个保守的CXXC/S活性位点,根据其活性位点的氨基酸序列可将其分为3类:CPYC型、CGFS型和CC型。其中,前2种为真核生物所共有,而CC类型为陆生植物所特有,且数量最多。谷氧还蛋白发挥作用时有单巯基和双巯基机制,可以在谷胱甘肽分子的帮助下还原二硫键或蛋白质谷胱甘肽加合物。谷氧还蛋白、谷胱甘肽、NADPH和谷胱甘肽还原酶共同组成了谷氧还蛋白系统。谷氧还蛋白在植物中与硫氧还蛋白系统、抗坏血酸谷胱甘肽循环系统等共同参与细胞的氧化还原状态的维持以及各类细胞进程的调节,并且在植物细胞抵抗生物以及非生物的氧化胁迫中起着十分重要的作用。另外,谷氧还蛋白还在植物生长发育、氮代谢、铁硫簇形成等方面具有重要作用。本研究就植物中谷氧还蛋白的命名、分类、作用机制以及在植物体内发挥的功能进行汇总,以期对其有更深入的了解。 张硕 王硕 韩胜芳 王冬梅关键词:植物 谷氧还蛋白 生物胁迫 植物免疫中的EDS1 被引量:5 2016年 EDS1(enhanced disease susceptibility 1)是一种重要的防卫基因,其编码的信号蛋白质位于植物免疫信号网络的关键节点。EDS1的互作蛋白质包括PAD4(phytoalexin defi ciency 4)和SAG101(senescence-associated gene 101)。EDS1在以TIR-NB-LRR(toll-interleukin-1 receptornucleotide binding-leucine-rich repeat)类R蛋白(resistance proteins)为主介导的ETI(effectors-triggered immunity)及不涉及R蛋白的PTI(PAMP-triggered immunity)中均发挥重要作用,主要调控细胞内氧爆发和水杨酸(salicylic,SA)的积累并抑制JA/ET(jasmonic acid/ethylene)通路。该文就EDS1蛋白质的结构特点及其在植物防卫病菌入侵的信号通路中的功能作一综述。 张梦姝 牛宏伟 侯春燕 王冬梅关键词:防卫基因 植物免疫 小麦Wrab18基因在小麦与叶锈菌互作中的功能研究 被引量:1 2018年 小麦Wrab基因家族分离于一种抗寒性小麦品种,该家族基因受冷胁迫或脱落酸诱导,在冷胁迫或脱落酸诱导后有高表达。通过构建转录组数据库,发现Wrab18基因在小麦抵抗叶锈菌侵染的过程中有明显上调。本试验以小麦品种‘洛夫林10’(简称‘L10’)与叶锈菌生理小种260组成不亲和组合,采用RT-PCR技术克隆Wrab18全长序列;应用生物信息学方法分析该基因的序列特征;通过与GFP蛋白融合进行亚细胞定位;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测Wrab18基因的表达;利用VIGS技术沉默Wrab18基因后,探究Wrab18基因在小麦与叶锈菌互作过程中的作用。结果克隆得到510bp的Wrab18基因开放阅读框全长,生物信息学分析表明,Wrab18可能不含有跨膜结构,为亲水性蛋白;亚细胞定位显示Wrab18定位于细胞质及细胞核中;Wrab18基因在接菌后8h表达量有明显增高;通过VIGS技术沉默‘L10’中的Wrab18基因,在接种叶锈菌后96h,发现叶锈菌的吸器母细胞数量增多,引起的小麦HR细胞面积增大,表明Wrab18基因参与了小麦抵抗叶锈菌侵染的过程,并在该过程中发挥正调控作用。 张恒 李继崇 丁东 韩胜芳 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 过敏性反应 小麦与叶锈菌互作过程中H2O2的时空分布特征 本试验以小麦(Triticum aestivum L.)品种洛夫林10(L10)为材料,与叶锈菌(puccinia triticina)生理小种165和260分别组成亲和组合和不亲和组合,用DAB、CeCl3特异性标记H... 王鑫 刘娜 石诚 刘刚 陈琰 韩胜芳 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 H2O2 HR CECL3 文献传递 小麦与叶锈菌互作过程中Wrab17基因的功能研究 植物在遭受生物和非生物逆境胁迫时,体内会引发一系列的防卫反应。在小麦与叶锈菌的互作体系中,小麦通过产生HR-PCD抵御叶锈菌的侵袭。为了更好地探究小麦抗叶锈菌机制,对小麦抗叶锈相关防卫基因的研究就显得非常重要。Wrab1... 杨高山 王帅帅 刘鹏 张恒 韩胜芳 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 HR 文献传递