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国家高技术研究发展计划(2006AA102447)
作品数:
1
被引量:1
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刘凤权
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2012
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抗噻菌灵单克隆抗体的制备及异源IC-ELISA检测方法的建立
被引量:1
2012年
为建立噻菌灵酶免疫检测方法,制备3种噻菌灵的半抗原(H1、H2和H3)。利用活泼酯法制备免疫抗原H1-BSA、H3-BSA和包被抗原H1-OVA、H2-OVA、H3-OVA。采用杂交瘤细胞融合方法获得4株稳定分泌抗噻菌灵单克隆抗体的细胞株,分别命名为1-4G9、1-6D3、3-1F9和3-5D4。采用间接竞争酶联免疫法(IC-ELISA),将上述4株抗体分别与3种包被抗原进行组合,从中选择出一个最优组合:H3-OVA/1-6D3。据此建立的异源IC-ELISA检测方法对噻菌灵的IC50为10.9μg.L-1,检测限(IC10)为2.2μg.L-1,与3种噻菌灵类似物的交叉反应率均小于0.1%;在自来水、苹果、梨的添加回收试验中,IC-ELISA法测定的回收率依次为95.9%~118.1%、90.0%~117.6%、74.9%~95.6%;HPLC法测定的回收率依次为92.7%~97.6%、98.9%~100.9%、91.6%~105.4%,IC-ELISA法与HPLC法测定结果基本一致。上述结果表明:抗噻菌灵单克隆抗体酶免疫检测具有很强的特异性和准确性。
王玉燕
华修德
钱国良
李刚
刘凤权
关键词:
噻菌灵
单克隆抗体
HPLC
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