国家科技重大专项(2011ZX09203-001-06)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：胡又佳谢丽萍张琪朱宝泉刘春磊更多>>
- 相关机构：上海医药工业研究院上海欣生源药业有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市自然科学基金上海市科委科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶(DXR)作为新的药物靶点的研究进展被引量：1
- 2014年
- 植物、藻类和细菌等可利用2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)途径生物合成类异戊二烯前体异戊酰焦磷酸(IPP)及其异构体二甲烯丙基焦磷酸(DMAPP)等生长所必须的前体,因此MEP途径作为除草剂、抗菌药物和抗疟疾药物的药物靶点可用于新药开发。其中MEP途径中的第二个酶1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶(DXR)是研究最为广泛的靶点,膦胺霉素即为该酶的抑制剂。本综述主要介绍MEP途径、DXR及其抑制剂的研究进展。
- 陈习平谢丽萍胡又佳
- 关键词：抑制剂药物靶点
- 利用基因组改组技术改良7-ACA产生菌被引量：1
- 2013年
- 将含假单胞菌(Pseudomonas)头孢菌素C(CPC)酰基转移酶基因ecs的pYG233质粒转入CPC产生菌顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)中,构建可发酵7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的基因工程菌(该菌株含有腐草霉素抗性标记phleo),为第一亲本。同时,构建含有潮霉素抗性标记(hgh)和ecs基因的重组质粒pYG236转化顶头孢霉菌株,以顶头孢霉(含有pYG236)作为第二亲本与第一亲本进行基因组改组,利用双重抗性标记作为融合子筛选条件,筛出一株7-ACA产量提高6.5倍的融合子工程菌。
- 刘春磊刘艳谢丽萍胡又佳
- 关键词：顶头孢霉7-氨基头孢烷酸头孢菌素C基因组改组
- 顶头孢霉中过表达AcveA提高头孢菌素C产量被引量：2
- 2014年
- 与构巢曲霉veA基因同源的AcveA是近年来在顶头孢霉Acremonium chrysogenum中发现的一个全局性调控子,主要调控头孢菌素C(CPC)生物合成基因的转录水平。本研究通过从顶头孢霉高产菌基因组DNA中扩增AcveA序列构建了一个AcveA表达载体pYG280,将其导入顶头孢霉高产菌株中,荧光实时定量PCR检测阳性转化子中AcveA的相对转录水平,结果比出发菌株提高了165%。同时检测到AcveA基因导入后的转化子中CPC合成限速步骤中的早期基因pcbC、晚期基因cefEF以及cefG基因的mRNA转录水平分别较出发菌株提高了825%、353%和25%。HPLC分析结果显示,转化子CPC的发酵水平较出发菌株提高了22.7%。证明AcveA是CPC生物合成中的一个正向调控子。
- 龚桂花张伟胡又佳朱宝泉
- 关键词：转录头孢菌素C顶头孢霉
- 利用MEP途径过表达提高β-胡萝卜素产量被引量：3
- 2014年
- 构建上游甲基赤藓糖-4-磷酸(MEP)途径,获得两种重组质粒pET32a(+)-dxs-idi-ispDF和pTrcHis2B-dxs-idiispDF,然后与下游β-胡萝卜素合成途径的质粒pACYC184-M-crt一起转化进入大肠杆菌中,获得相应的重组菌株。结果表明含有MEP途径的重组菌株β-胡萝卜素产量有显著提高。
- 陈习平谢丽萍张琪胡又佳
- 关键词：Β-胡萝卜素过表达
- 基于易错PCR的菌丝霉素的定向进化被引量：1
- 2014年
- 以菌丝霉素成熟肽经大肠杆菌密码子优化后的基因为基础,采用易错PCR技术,使用低保真的Taq酶,调整Mg2+浓度、添加Mn2+,改变PCR扩增程序,获得易错PCR产物。经克隆、转化后,挑取200株突变体进行测序鉴定,并进行抑菌活性筛选,筛得突变体M-1。基因比对结果显示,突变体M-1中有1个碱基发生突变,使得31位氨基酸由丙氨酸(Ala)变成精氨酸(Arg)。蛋白质分子空间结构模拟显示,突变位点位于蛋白质的?折叠上,靠近活性中心,氨基酸残基由疏水性变成极性,推测更有利于与lipidⅡ的特异性结合,增强抑菌活性。本研究还对突变体小肽M-1进行了分离纯化。抑菌活性试验表明,突变体小肽M-1的抑菌活性是菌丝霉素的2倍。
- 张琪胡又佳陈习平谢丽萍
- 关键词：易错PCR体外进化抑菌活性
