国家自然科学基金(30973140)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 相关作者：金春莲林长坤曹东华张炫王正东更多>>
- 相关机构：中国医科大学解放军第202医院中国人民解放军第202医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单纯性马蹄内翻足患者SOX9基因表达及其调控机制的研究
- 为研究单纯性马蹄内翻足患者SOX9基因的表达研究及调控机制,从而对单纯性马蹄内翻足的基因诊断和治疗提供理论依据。用PCR-DGGE方法对84例单纯性马蹄内翻足患者静脉血SOX9上游1 100bp及外显子序列进行突变筛查。...
- 王正东金春莲
- 关键词：SOX9
- 文献传递
- C/EBP与先天性马蹄内翻足相关性及其对COL9A1基因的调控作用
- 为探讨C2/EBPβ与先天性马蹄内翻足的相关性,并初步探究其与COL9A1基因的相互作用关系,从而为阐明C2/EBPβ的调控机制和先天性马蹄内翻足的发生机制提供实验依据,为产前诊断和基因治疗奠定基础。我们首先通过PCR-...
- 高铭金春莲
- 文献传递
- 先天性马蹄内翻足患者足踝部肌肉组织C/EBPβ的表达及形态学改变被引量：2
- 2011年
- 目的研究C/EBPβ在先天性马蹄内翻足患者足踝部肌肉组织中的表达,探讨细胞系的选择。方法应用RT-PCR、免疫组化、免疫荧光等技术分别检测先天性马蹄内翻足患者足踝部肌肉组织中C/EBPβ的表达及相应的形态学改变。结果与同龄对照相比,C/EBPβ在先天性马蹄内翻足患者足踝部肌肉组织中表达明显下调,相对于正常组织,病变组织结构紊乱,核脱失。免疫荧光结果提示C/EBPβ主要在细胞质中表达,但在肿瘤细胞如人横纹肌肉瘤细胞中呈现细胞质、细胞核均一性表达。结论 C/EBPβ的低表达可能与先天性马蹄内翻足畸形发生相关,病变组织细胞核可能已经失去功能,可能存在纤维化。
- 高铭王正东林长坤金春莲
- 关键词：C/EBPΒ纤维化
- GLI3基因在单纯性马蹄内翻足发生中的调控机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨在单纯性马蹄内翻足发生过程中GLl3基因的凋控机制。方法构建荧光素酶报告基因表达载体，分析大鼠Glj3基因5’侧翼启动子区域的活性。用P-Match软件预测Gli3基因上游序列中转录因子的结合位点，并通过染色质免疫沉淀实验、凝胶迁移实验验证。用RNA干扰实验以及构建Hoxdl3表达载体，观察其在L6细胞中对Gli3基因表达的影响。结果在大鼠Gli3基因序列的启动子区域发现2个Hoxdl3的结合位点，染色质免疫沉淀和凝胶迁移实验证实Hoxdl3结合于结合位点2上。Hoxdl3表达下调时，Glj3基因表达明显上调。Hoxdl3基因表达上调时，Gj诏基因则表达下调。结论在大鼠胚胎肢体发育中，Hoxdl3蛋白可能与Gj馏基因启动子区的Hoxdl3结合位点2结合，调控Gj据的表达。
- 曹东华林长坤金春莲
- 关键词：转录调控
- GLI3、EN1基因在单纯性马蹄内翻足发生中的功能研究被引量：7
- 2009年
- 为了探讨人类GLI3基因在单纯性马蹄内翻足(Idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)发生时所起的作用,文章构建了大鼠Gli3基因启动子区域荧光素酶报告基因表达载体来分析Gli3基因启动子的活性,并利用P-Match软件预测大鼠Gli3基因启动子区域可能的调控元件,应用ChIP实验加以验证。并利用RT-PCR、免疫组化和Western blotting的方法分析大鼠En1与ICTEV的相关性。经P-Match软件预测,Gli3基因启动子区域有3个转录因子En1的可能结合位点,经ChIP实验证实位点1是真正结合位点。RT-PCR、免疫组化和Western blotting方法都证实En1基因在马蹄内翻足模型鼠中表达下降。结果提示大鼠的转录因子En1可能是Gli3基因的上游负调控元件。在ICTEV患者中,很可能是由于EN1基因表达水平的下降导致了GLI3基因表达水平的上升,最终导致ICTEV的发生。
- 曹东华王谦林长坤王正东张炫金春莲
- GLI3基因在单纯性马蹄内翻足发病机制中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的探讨GLI3基因与单纯性马蹄内翻足（idiopathiccongenitaltalipesequinovarus，ICTEV）的相关性。方法应用变性梯度凝胶电泳技术检测GLI3基因编码区的突变。用逆转录-PCR方法研究GLI3基因在ICTEV患者下肢的表达情况。构建ICTEV大鼠模型，应用实时定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白质免疫印迹（Westernblotting）方法研究Gli3基因在ICTEV模型鼠下肢肌肉组织中的表达。结果在84例ICTEV患者外周静脉血中未发现GLI3基因第1～8外显子以及第13外显子存在突变。在ICTEV患者及正常人下肢拇长屈肌中均未检测到GLI3基因的表达。不论在mRNA水平还是在蛋白质水平，Gli3基因在ICTEV模型胎鼠下肢组织中的表达均明显高于正常对照胎鼠。结论GLI3基因的编码区突变可能不是ICTEV发病的主要原因，但GLI3基因的表达异常与马蹄内翻足的发病可能有关。
- 曹东华张炫林长坤金春莲
- 关键词：突变基因表达
