国家自然科学基金(30960341) 作品数:4 被引量:7 H指数:2 相关作者: 王俊华 林仁勇 张传山 温浩 吕国栋 更多>> 相关机构: 新疆医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
细粒棘球蚴囊液对HepG2细胞增殖的影响 2012年 目的探讨细粒棘球蚴囊液(HCF)对宿主肝细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路及细胞周期的影响。方法四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度HCF对HepG2细胞的增殖作用。流式细胞仪检测细胞周期。Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(cyclin)D1、cyclin A、cyclin B1、cyclin E的表达水平。对数据采用重复测量方差分析。结果在48、72h和96h,15%、30%和60%HCF组与无胎牛血清比较,能明显促进HepG2细胞的增殖护值均〈0.05)。Westem blot检测结果显示:15%HCF组p-ERK在48h高表达(F=1.916,P〈0.01),cyclin D1在24h高表达旷=3.901,P〈0.01),15%、30%HCF组PCNA分别在48h、72h高表达(F=91.140,P〈0.01),cyclinA分别在48h、72h高表达旷=18.587,P〈0.01),cyclinB1分别在48h、72h高表达(F=2.064,P〈0.01),30%HCF组cyclinE在96h高表达(F=1.068,P〈0.01)。结论HCF对体外培养的HepG2细胞无毒害作用,对其增殖有一定促进作用。 李朝旺 赵晋明 张传山 吕国栋 温浩 林仁勇关键词:肝细胞 细胞周期 细胞增殖 细粒棘球绦虫DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2基因的克隆及序列分析 被引量:1 2012年 目的从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴中克隆DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2,进行序列测定和生物信息学分析。方法设计EgPolD2特异性引物,用RT-PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴cDNA中克隆EgPolD2基因,然后将其克隆至pMD18-T载体,测序并进行生物信息学分析,半定量反转录PCR分析其在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中的表达情况。结果 EgPolD2基因开放阅读框为1 218bp,编码405个氨基酸,等电点为4.74。NCBI保守功能区分析软件预测EgPolD2蛋白第113~378个氨基酸为MPP_PolD2_C结构域。登陆GenBank进行Blast比对,EgPolD2与曼氏血吸虫SmPolD2基因同源性为32.1%,与线虫和人等其他物种PolD2基因同源性在18.3%~22.8%之间。进化树分析表明EgPolD2与SmPolD2相聚集,与其他物种同源性较低。半定量RT-PCR显示,EgPolD2在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中均有表达,且表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验成功克隆出细粒棘球绦虫EgPolD2新基因,为进一步研究抗细粒棘球绦虫药物靶标奠定了基础。 吕国栋 叶建蔚 张传山 王俊华 李亮 温浩 林仁勇关键词:细粒棘球绦虫 Fas及Caspase家族在泡球蚴感染宿主肝脏中的表达及其意义 被引量:3 2011年 目的探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义。方法16例配对泡型包虫患者(AE)肝脏标本,16只雌性BALB/C小鼠。分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9的表达。结果AE患者病灶周围肝细胞水肿,汇管区周围纤维化,肝细胞造型坏死;病灶周围肝细胞发生显著凋亡[(74.0±15.0)%比(4.2±3.3)%],Fas[(71.3±19.0)%比(5.2±1.6)%]、Caspase-3[(39.4±18.3)%比(3.3±2.9)%]、Caspase-8[(37.6±3.5)%比(4.0±1.8)%]和Caspase-9[(24.7±13.8)%比(2.0±1.4)%]高表达(P〈0.05)。泡球蚴感染小鼠病灶处可见囊泡,肝组织纤维化严重;肝细胞发生显著凋亡[(37.5±5.2)%比(13.9±2.7)%],Fas[(48.3±6.2)%比(4.6±1.2)%]、Caspase-3[(29.7±6.3)%比(5.2±1.9)%]、Caspase-8[(23.1±2.9)%比(3.5±1.4)%]和Caspase-9[(16.7±3.2)%比(2.3±1.1)%]高表达(P〈0.05)。结论泡球蚴感染引起宿主肝细胞凋亡,提示Fas及Caspase家族介导的细胞凋亡信号通路可能参与了泡球蚴所致肝损伤进程。 王俊华 张传山 张雪 卢晓梅 温浩 林仁勇关键词:泡球蚴病 FAS CASPASES 细粒棘球蚴囊液对HepG2肝癌细胞系细胞周期的影响 被引量:3 2012年 目的探讨细粒棘球蚴(Eg)囊液(HCF)在感染急性期对宿主肝细胞MAPK信号通路及细胞周期的影响。方法常规方法培养HepG2细胞,以HCF为刺激物,于不同时间点用Western blot检测p-ERK、增殖细胞核抗原PC-NA、细胞周期蛋白cyclin-D1、A、B1和E的表达水平,并与无FCS组比较。结果 Western blot检测显示,15%、30%HCF组p-ERK分别在换液培养3h和30min高表达(P<0.05),PCNA分别在3h和12h高表达(P<0.05),cyclin-D1在3h高表达(P<0.05),cyclin-A分别在3h和12h高表达(P<0.05),15%HCF组cyclin-E在3h高表达(P<0.05),15%、30%HCF组cyclin-B1在各时间点表达量微弱(P<0.05)。结论 HCF对体外培养的HepG2细胞无毒害,且对其增殖有一定的促进作用。 李朝旺 赵晋明 张传山 吕国栋 王俊华 李静 范金亮 温浩 林仁勇关键词:肝细胞 细胞周期 细胞增殖