国家自然科学基金(30671502)
- 作品数：13 被引量：60H指数：6
- 相关作者：王栋朱化彬郝海生杜卫华王宗礼更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所甘肃农业大学北京奶牛中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学更多>>
- 牛精子全蛋白二维电泳等电聚焦程序优化及染色方法的比较
- 2008年
- 以牛精子全蛋白为试验材料进行二维电泳试验研究,优化和改进了一向等电聚焦参数,比较了不同的染色方法,并运用Image Master 6.0软件分析了二维电泳图谱。结果表明,采用24 cm,pH3-10线性IPG胶条进行牛精子全蛋白二维电泳,等电聚焦80000 Vh和结合硝酸银染色方法可得到较多蛋白点和较高分辨率的二维电泳图谱。
- 陈龙朱化彬王栋郝海生杜卫华沙里金
- 关键词：二维电泳
- CDK2和P53在细胞中心体复制与调控中的作用被引量：2
- 2008年
- 中心体是真核生物重要的细胞器,其复制与调控异常可能是体外胚胎发育异常的重要原因,而CDK2和P53是调控中心体复制的关键且必要因子,在细胞中心体复制调控中起核心作用。作者简要介绍了中心体的功能和复制过程,重点综述了CDK2、P53及其相关因子在中心体复制调控中的作用,对研究体外受精胚胎和克隆胚胎的发育异常具有一定的理论意义。
- 聂昊杜卫华郝海生王宗礼王栋朱化彬
- 关键词：CDK2P53中心体
- 牛精子蛋白质组的双向电泳和质谱鉴定初步研究被引量：2
- 2009年
- 通过建立牛精子双向电泳-质谱鉴定研究平台,为从蛋白质水平研究精子生理机能奠定技术基础;采用改进的热TRIzol法裂解精子细胞制备蛋白,应用双向凝胶电泳(2-DE)分离牛精子蛋白,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质点。得到了重复性较好的牛精子2-DE图谱,质谱鉴定16个蛋白质点。建立牛精子双向电泳-质谱鉴定研究平台,为后续牛精子X、Y差异蛋白点的检测和分析奠定了理论和技术基础。
- 韩伟东王栋郝海生杜卫华赵学明朱化彬
- 关键词：精子蛋白质组学双向电泳基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 牛精子蛋白质组学技术平台的建立及冻融前后精子差异蛋白初步分析被引量：9
- 2008年
- 通过探索不同的精子蛋白制备方法、水化液成分和优化2D电泳程序以建立牛精子蛋白质组学研究技术平台,同时以牛鲜冻精为实验材料通过差异凝胶电泳寻找冻融前后精子蛋白的改变。结果表明:使用改进的热TRIzol法裂解精子细胞制备蛋白,结合优化的2D电泳技术可建立稳定的牛精子蛋白质组学研究技术平台。差异凝胶电泳揭示牛精子在冻融后有质和量的改变:冻融后缺失的蛋白点有20个,表达下调的有2个,表达上调的有10个。作为一项阶段性的实验成果,研究建立的2D平台和所发现的冻融引起的差异表达蛋白质点为揭示冷冻损伤机理和性控精液的差异蛋白质组学研究奠定了较好的基础。
- 陈龙朱化彬沙里金韩伟东王栋王宗礼郝海生杜卫华程金华
- 关键词：精子TRIZOL差异蛋白
- X、Y精子分离纯度评价方法的研究进展被引量：8
- 2008年
- 对检测分析分离精液中X、Y精子纯度的方法进行了综述,并将各种方法的原理、技术操作过程和方法的优缺点进行了比较分析。认为如能在技术上有所突破,提高方法的灵敏度、精确性,降低检测时间,单精子巢式PCR方法将可能成为一种低成本、常规化的检测手段,在精子分离方法优化研究中发挥更大的作用,并推动其他单精子遗传检测技术取得新进展。
- 郭家明朱化彬王栋张林波郝海生杜卫华
- 关键词：精子分离精子
- 蛋白质组学数据库建设的研究进展被引量：4
- 2008年
- 生物信息学是蛋白质组学研究的重要组成部分。大量蛋白质组学研究所获得的数据都需要借助生物信息学知识和方法快速有效地解释其背后隐含的生命信息。现已形成Swiss-Prot、PIR、UniProt等强大的蛋白质分析数据库。全面深刻地了解这些数据库建设进展将有助于积极有效地进行蛋白质组学研究。
- 陈龙朱化彬沙里金王栋王宗礼程金华郝海生杜卫华
- 关键词：蛋白质组学生物信息学蛋白质数据库
- 精子性染色体相关基因转录本及检测方法
- 2008年
- 精子形成过程中,基因表达经历了减数分裂性染色体失活,但有很多基因在减数分裂后期转录又重新被激活。转录产物研究表明,X和Y染色体特异基因在不同物种精子中都发生了不同程度的转录,并且对转录产物的研究方法也取得了巨大进展,产生了微阵列、SAGE及抑制消减杂交等先进的技术手段,随着这些技术的日益成熟和完善,通过深入研究,精子中性别相关基因转录表达调控机理将越来越清晰,并推动性别特异蛋白的研究取得更大进展。
- 王永贵朱化彬柳强王栋张林波郝海生杜卫华
- 关键词：转录物精子
- 牛冻、鲜精子差异蛋白的双向电泳和质谱鉴定的初步研究被引量：6
- 2010年
- 采用适合于精子裂解的热Trizol法制备牛精子全蛋白质,应用线性固相IPG胶条(pH 3～7、24cm)进行精子全蛋白2-DE电泳,在冻精和鲜精蛋白图谱中分别检测到839±34个蛋白点和564±16个蛋白点,经差异比较和显著性检验,在冻、鲜精子中共得到19个具有显著差异的蛋白点,在冻精中表达上调的蛋白点有9个,表达下调的蛋白点有1个,只在冻精中表达的蛋白点有9个。经过酶解和质谱鉴定,获得了3个差异蛋白点的质谱信息,生物信息学分析结果发现,这3个差异点分别为中性鞘磷脂酶激活结合因子(FAN)、谷胱甘肽S转移酶(GST-Mu5)及锌离子结合细胞色素氧化酶,分别与细胞应激和凋亡有关。推测认为,这3种与细胞应激反应及凋亡相关的蛋白在冻精中显著增高可能与精子冷冻损伤有关。
- 吴承疆朱化彬王栋郝海生杜卫华赵学明路永强
- 关键词：2-DE冷冻损伤
- 蛋白质组学技术在精子蛋白研究中的应用
- 2009年
- 从蛋白质组学研究的技术手段、蛋白质组学在人类不育及精卵相互识别并结合的机理研究、免疫法开展男性避孕方法的研究及蛋白质组学研究方法在家畜繁殖环节中的应用等几个方面阐述了蛋白质组学在人类生殖及动物繁殖环节相关研究中的重要作用。说明蛋白质组学已经成为生命科学未来发展的主要分支之一,为揭示生命个体的蛋白质动态变化提供了技术手段和理论基础,并将在药物开发,生命活动机理研究等方面发挥巨大作用,也必将会在家畜繁殖学领域发挥其应有的作用。
- 韩伟东王栋郝海生赵学明杜卫华朱化彬
- 关键词：精子蛋白蛋白质组学
- PCR技术在性别鉴定及性别控制应用中的研究进展被引量：9
- 2009年
- PCR技术是一项发展迅猛的生物技术,因具有快速、灵敏、简便及特异性强等特点而被广泛应用于性别鉴定及其它许多相关研究领域。应用于性别鉴定的PCR方法从简单PCR法、双重或多重PCR法、巢式PCR法发展到改进的两温度梯度PCR法;而不同性别间除了呈现有或无关系(类似于Sry基因)的基因序列外,也检测到了很多类似于锌指蛋白和牙釉蛋白的呈现不同性别特征的基因序列,这为性别鉴定引物的设计和PCR法进行性别鉴定提供了另一种全新的思路,即如果根据这种性别多态性DNA序列特点设计引物,采用两温度梯度PCR扩增技术进行PCR性别鉴定,则可望简化鉴定程序、降低检测时间、提高鉴定效率,使PCR性别控制技术更加成熟和实用化。随着研究的深入,PCR技术在性别鉴定及控制的应用中必将日益成熟,并推动此项技术在其它相关领域中的研究和应用取得更大的进展。
- 林博朱化彬郝海生杜卫华赵学明王栋
- 关键词：PCR技术性别鉴定性别控制
