广东省医学科学技术研究基金(B2007100)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：赖延东李秀英夏良平更多>>
- 相关机构：中山大学广州医学院暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人PFP、GrB共表达诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨人穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GrB)共表达是否可以诱导人的喉癌细胞系Hep-2的凋亡及其作用的机理。方法利用脂质体2000将PFP、GrB共表达载体pVAX1-PIG(即pVAX1-PFP-IRES-GrB)转染人喉癌Hep-2细胞,采用荧光染料Hoechst33342法、流式细胞仪(FCM)检测、透射电镜观察Hep-2细胞的凋亡情况。以激光共聚焦显微镜检测重组载体转染后的Hep-2细胞内[Ca2+]i浓度的变化,并探讨其作用机理。结果pVAX1-PIG转染组的Hep-2细胞大量凋亡且其凋亡率显著高于对照组(P<0.05),透射电镜研究显示单个Hep-2细胞内亦出现凋亡的特征。Hep-2细胞内[Ca2+]i的浓度发生了变化,且由FI值增大可知细胞胞浆内[Ca2+]i的浓度升高。结论PFP、GrB共表达能够诱导人Hep-2细胞的凋亡,且凋亡的发生与细胞胞浆内[Ca2+]i的浓度升高有关。
- 李秀英夏良平赖延东
- 关键词：凋亡透射电镜流式细胞仪分析
- PFP、GrB的共表达杀伤人喉癌Hep-2细胞的体外研究被引量：4
- 2008年
- 为探讨穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GrB)共表达对人喉癌(Hep-2)细胞生长的抑制及其诱导该细胞的凋亡作用,采用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段,构建共表达重组体pVAX1-PIG,并将其转染入人的Hep-2细胞株中。收集转染后的Hep-2细胞,采用软琼脂集落形成实验、MTT法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞仪(FCM)检测分析各组人Hep-2细胞的生长抑制及其凋亡情况。结果显示pVAX1-PIG转染组的集落形成数目比空白对照组与pVAX1转染组明显减少(P<0.05),MTT检测结果显示对照组细胞生长速度比pVAX1-PIG转染组要快。TUNEL染色、FCM法检测均显示pVAX1-PIG转染组的Hep-2细胞大量凋亡且其凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。因此,PFP、GrB的共表达能够抑制人Hep-2细胞的生长并且可以诱导该细胞的凋亡。
- 李秀英夏良平赖延东
- 关键词：穿孔素颗粒酶B
