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广东省医学科学技术研究基金(B2007138)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
刘振杰
蒋智文
刘新光
陈维春
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年份
1篇
2011
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Prelamin A相互作用蛋白Narf的鉴定和表达分析
被引量:1
2011年
目的:探讨A型核纤层蛋白前体(prelamin A)在细胞内堆积造成细胞早老的机理,筛选了prelamin A相互作用蛋白并研究其在早老细胞中的表达情况。方法:以prelamin A的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选prelamin A相互作用蛋白。构建了prelamin A识别因子(Narf)与绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Narf,与红色荧光蛋白-prelamin A融合表达质粒pDsRed-PLA共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察共定位情况。Western blotting检测Narf在衰老表型HEK293PLA细胞的表达情况。结果:筛选得到包括Narf在内的7个候选相互作用蛋白。Narf与prelamin A能相互作用并共定位于核纤层,在prelamin A过表达的HEK293PLA细胞中Narf表达没有升高。结论:Narf在细胞内与prelamin A相互作用,且表达量不受后者影响。
陈维春
刘振杰
蒋智文
彭琪
袁源
郑慧玲
刘新光
关键词:
酵母双杂交
衰老
共定位
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