国家自然科学基金(81160139)
- 作品数：11 被引量：16H指数：3
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- 山羊颞下颌关节盘胶原构筑和生物力学性能研究被引量：2
- 2016年
- 目的为工程化颞下颌关节盘组织建立客观的生物力学标准。方法从4只健康1月龄山羊头中完整分离8个颞下颌关节盘,用直径3 mm的冲子在前、中、后带取圆柱状试样,预处理压缩速度为0.025 mm·s-1,结束条件为最大载荷小于4.9 N,压缩位移1.5 mm,循环3次,在预处理基础上完成压缩实验,获取各区带的应力应变关系图和弹性模量值。扫描电子显微镜和偏振光显微镜观察各区带的超微结构和胶原纤维走向。结果 1)关节盘组织的生理应变范围在10%以内,关节盘组织的拟线性本构方程可以用多项式y=ax+bx2+cx3进行拟合。2)关节盘中间带的弹性模量值最大,其与前带和后带均有统计学差异(P<0.05),前带与后带之间无统计学差异(P=0.361)。3)颞下颌关节盘内部呈现环形胶原网状结构,中间带胶原排列致密,呈前后向排列;前带和后带主要呈内外走向,伴有前后方向的纤维。结论环形胶原网状结构是山羊颞下颌关节盘抗力性能的基础,中间带抗压性能高于前带和后带。
- 李燕梅包广洁钟妮吕玮张文霞王兰兰康宏
- 关键词：颞下颌关节盘扫描电子显微镜
- PGS/PLLA共纺膜片的降解性能及生物相容性研究
- 2016年
- 目的:观察PGS/PLLA共纺膜片体外降解性及细胞相容性,探究其作为山羊颞下颌关节盘组织工程支架的可行性,为进一步动物实验奠定基础。方法:将PGS/PLLA共纺膜片浸泡在磷酸盐缓冲液中(pH=7.4),不同时间点取样,对材料微观形貌、pH、力学性能等进行检测;将关节盘细胞-PGS/PLLA支架复合培养,MTT法检测支架的细胞毒性及对关节盘细胞增殖影响;在14d时,取出关节盘细胞-PGS/PLLA复合物,行HE、番红O、免疫组化染色。结果:PGS/PLLA支架降解性能适宜;MTT结果示,支架无毒性,细胞增殖良好。结论:颞下颌关节盘细胞在支架上粘附良好、增殖明显、代谢活跃,PGS/PLLA支架有望作为颞下颌关节盘组织工程支架。
- 钟妮包广洁李燕梅吕玮张文霞赵红斌康宏
- 关键词：降解性细胞相容性
- 山羊颞下颌关节盘细胞肌动蛋白骨架的研究被引量：3
- 2015年
- 目的:通过激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)研究原代及传代山羊颞下颌关节盘细胞骨架(Cytoskeleton,CSK)蛋白-肌动蛋白的形态及蛋白量的改变,以说明关节盘细胞随着传代的发生,细胞骨架蛋白-肌动蛋白的差异。方法:原代(P0)山羊颞下颌关节盘细胞及传代1、2、3、4(P1、P2、P3、P4)代的关节盘细胞,分别接种在有方形盖玻片的6孔板中制作细胞爬片。对各代关节盘细胞肌动蛋白骨架进行免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜获取各代关节盘细胞肌动蛋白的形态,同时利用荧光强度测定软件对各代关节盘细胞肌动蛋白荧光量进行测定。结果:丝状的肌动蛋白主要沿着细胞膜外围均匀排列,随着传代丝状结构逐渐清晰,且逐渐增粗,P4代时形成较粗的纤维束。荧光强度整体趋势是随着传代荧光量表达是递增的,P3代以内没有统计学差异,而在P4代时统计学差异明显。结论:肌动蛋白骨架随着传代过程形态学上发生了改变,在P4代时可见骨架蛋白形成较粗的纤维束,荧光量表达同其他代细胞差异明显,这为以后工程化颞下颌关节盘种子细胞的选择提供了依据。
- 孔楠楠张文霞康宏包广洁
- 关键词：传代细胞骨架激光共聚焦显微镜
- 静水压联合IGF-1干预对山羊颞下颌关节盘细胞丝状肌动蛋白表达影响的实验研究
- 2013年
- 目的探讨静水压联合IGF-1对体外单层培养的山羊颞下颌关节盘细胞丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)的影响,分析静水压、IGF-1与F-actin的关系变化对细胞生物学行为改变的影响。方法取4只1月龄山羊双侧颞下颌关节盘,采用酶消化法分离培养颞下颌关节盘细胞,以Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定。取第2、3代细胞根据干预方法不同分为4组:A组以完全培养基培养,作为对照;B组以强度0.2 MPa、频率1 Hz的静水压作用3 h;C组以含10 ng/mL IGF-1的完全培养基培养;D组采用静水压与IGF-1联合培养,方法同B、C组。于干预后24、72 h行免疫荧光染色观察F-actin变化,测定单个细胞荧光强度。结果经形态学观察及免疫组织化学染色鉴定,所培养细胞为颞下颌关节盘细胞。干预24 h时A、C组细胞荧光染色强,保持了细胞正常形态,且分布清晰;B组F-actin排列紊乱;D组F-actin变细,排列混乱。72 h时A、C组F-actin排列整齐;B组F-actin排列紊乱、模糊不清,部分F-actin断裂,形成伪足;D组F-actin变细,排列紊乱、断裂。随时间延长,A、B、D组荧光强度均呈增强趋势,两时间点间比较差异有统计学意义(P<0.05);C组两时间点间比较差异无统计学意义(t=0.284,P=0.781)。干预24 h,C组荧光强度最高,B组最低,与A、D组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。72 h时,B、D组荧光强度显著低于A、C组,差异有统计学意义(P<0.05);B、D组间及A、C组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论静水压可以引起山羊颞下颌关节盘细胞F-actin发生断裂及重排,IGF-1上调F-actin的表达;静水压联合IGF-1诱导产生的F-actin断裂、重排可能引起细胞生物学行为的改变。
- 张春瑜包广洁康宏
- 关键词：IGF-1山羊
- 细胞松弛素B对山羊颞下颌关节盘细胞及细胞骨架肌动蛋白的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及形态的影响并得出最适浓度;观察最适浓度作用后细胞凋亡、粘附及肌动蛋白形态和mRNA表达的变化。结果:2μmol/L浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖活性具有明显抑制作用,但随培养时间延长抑制率明显降低,无促进凋亡作用;细胞粘附率明显下降;与对照组相比,处理组细胞突起结构逐渐消失,形态变圆,肌动蛋白纤维丝明显的断裂,荧光强度降低;肌动蛋白mRNA表达降低。结论:细胞松弛素B可能是通过破坏肌动蛋白的结构抑制了颞下颌关节盘细胞形态及功能。
- 张文霞康宏吕玮李燕梅钟妮包广洁
- 关键词：颞下颌关节盘细胞松弛素肌动蛋白细胞骨架
- 山羊骨髓间充质干细胞向纤维软骨分化的形态学改变被引量：3
- 2014年
- 背景:前期初步研究发现,碱性成纤维细胞生长因子可诱导骨髓间充质干细胞向颞下颌关节盘细胞方向分化,且碱性成纤维细胞生长因子10μg/L诱导组合成胶原量明显高于5μg/L诱导组。目的:观察经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子诱导后的骨髓间充质干细胞的超微结构变化。方法:原代分离培养山羊骨髓间充质干细胞,选P3,P4细胞,用5,10μg/L碱性成纤维细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞,以未加碱性成纤维细胞生长因子培养的骨髓间充质干细胞做对照。倒置相差显微镜观察细胞生长状况,用第7,14,21天的细胞爬片行蕃红O、天狼猩红和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,并观察第21天细胞的超微结构。结果与结论:经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子诱导后,骨髓间充质干细胞可向颞下颌关节盘成纤维细胞样细胞形态分化,10μg/L组细胞更像关节盘成纤维细胞样细胞。提示骨髓间充质干细胞有向颞下颌关节盘细胞方向分化的形态学基础。
- 苏雪莲包广洁康宏刘琳孔楠楠
- 关键词：干细胞骨髓干细胞颞下颌关节盘碱性成纤维细胞生长因子透射电镜
- 基于形态学的口腔CT图像对比度增强方法研究被引量：1
- 2015年
- 针对口腔CT图像软组织部位分辨率低,细节不清晰的问题,提出一种基于数学形态学的图像处理方法,较好地避免了目前常用的直方图均衡、反锐化掩膜以及小波阈值增强等方法在图像处理过程中产生的细节丢失、噪声放大等缺陷。该方法通过对图像进行小波变换预处理,增强表达软组织信息的低频小波系数并重构图像,并解决了增强信息的同时带来的噪声放大问题。同时引入形态学开闭级联滤波器,增强特征信息,进一步去除噪声平滑图像。实验结果证明了该方法的有效性,有助于临床口腔软组织病灶部位的区分和诊断。
- 包广清宋泽
- 关键词：图像增强形态学滤波噪声抑制
- 山羊颞下颌关节盘细胞的表面形貌和力学特性研究
- 2015年
- 目的采用JPK Nano Wizard 3型生物原子力显微镜(AFM)对两种类型的山羊颞下颌关节盘细胞(软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞)的表面形貌和生物力学特性进行研究,为颞下颌关节盘组织工程研究中种子细胞的选择提供依据。方法单层培养原代山羊颞下颌关节盘细胞,生理状态下用AFM接触模式扫描两种类型的关节盘细胞,获得形貌图。随机选取20个软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞,扫描获得细胞核区和细胞质区的力-位移曲线,通过JPK Data Processing软件分析两种细胞的杨氏模量和黏附力。结果 AFM下,三角形的软骨细胞样细胞的细胞核占据其大部分体积,细胞骨架结构呈树枝状排列,边缘伸出许多伪足;长梭形的成纤维细胞样细胞的细胞核明显高于细胞质区,骨架结构规则排列,边缘光滑,极少有伪足伸出;两种细胞的表面粗糙度没有明显差异。分析力-位移曲线得出:两种类型细胞的杨氏模量在细胞核区没有明显差异(P>0.05),在细胞质区略有差异(P=0.047);但两种细胞的黏附力没有明显差异(P>0.05)。结论两种类型的关节盘细胞在形貌上虽有较大的差别,但在生物力学特性上的差异并不明显。
- 包广洁孔楠楠郭曼丽苏雪莲康宏
- 关键词：原子力显微镜表面形貌
- PGS/PLLA静电纺丝复合纳米纤维支架的性能研究被引量：1
- 2016年
- 基于聚癸二酸丙三醇酯(PGS)优异的亲水性能,左旋聚乳酸(PLLA)良好的力学性能,以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂,将PGS与PLLA按质量比1∶3、1∶1、3∶1配制成25%的纺丝液,采用静电纺丝技术制备了不同比例的新型三维纳米支架。通过扫描电镜、傅里叶红外光谱仪(FT-IR)、X射线衍射仪、热重分析仪、Instron微力试验机、接触角测量仪对共纺膜片进行表征。结果表明共纺膜片分布均匀,交织成网状;共纺膜片中加入PLLA对PGS聚合物结构几乎没有影响;随着PGS含量增加,结晶度呈增强趋势;伴随PLLA质量增加,热稳定性也趋于稳定;加入PGS,PGS/PLLA共纺膜片获得较好的亲水性,支架力学性能也得到改善;PGS/PLLA三维支架和山羊颞下颌关节盘细胞共培养,结果表明关节盘细胞在不同比例支架上粘附、铺展均良好,且在PGS/PLLA(1/3)膜片上生长较好。
- 包广洁钟妮张文霞李燕梅吕玮张树江康宏
- 关键词：PGSPLLA静电纺丝
- 聚癸二酸丙三醇酯的合成及电纺支架的制备被引量：1
- 2014年
- 通过熔融共缩聚反应,将1∶1和1∶2两种摩尔比的丙三醇和癸二酸合成可生物降解的聚癸二酸丙三醇聚酯弹性体(PGS),并对其性能进行测定,1∶1组PGS与左旋聚乳酸(PLLA)共混,应用静电纺丝方法构建组织工程支架。结果表明,PGS弹性体具有优异的亲水性能和可生物降解性能,PLLA改性电纺的PGS支架符合组织工程支架材料的基本要求。
- 刘晓吉李文博张树江包广洁康宏
- 关键词：亲水性能降解性能力学性能静电纺丝
