公共文化服务平台

国家科技支撑计划(2007BAD07B00): 作品数：12 被引量：34H指数：3; 相关作者：潘东明潘腾飞冯莹郭志雄丁安琪更多>>; 相关机构：福建农林大学泉州师范学院福建省农业科学院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划福建省教育厅资助项目福建省种业创新与产业化工程项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

贮藏温度对中国水仙鳞茎碳水化合物含量的影响被引量：1: 2018年; 以中国水仙‘金盏银台’品种3年生休眠鳞茎为试验材料,研究在5、15、25、35℃和室温(CK)贮藏下鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖和淀粉含量的变化。结果表明:鳞茎内鳞片、外鳞片和主芽淀粉含量变化受贮藏温度的影响显著;不同贮藏温度下内鳞片、外鳞片和主芽的可溶性糖含量都基本稳定在一定的水平,而淀粉含量整体波动较大。在鳞茎贮藏期的叶芽和花芽分化期间,不同温度对淀粉水解产生显著影响,对可溶性糖的影响不显著,淀粉水解跟主芽的发育密切相关。因此,通过淀粉来研究了解水仙鳞茎贮藏期间碳水化合物的变化更适宜。; 姚婷婷李小婷宋敏娜蒲小龙叶如梦郭志雄佘文琴潘腾飞潘东明; 关键词：贮藏温度可溶性糖

水仙芽可溶性糖含量及NtTIM基因的表达分析被引量：9: 2016年; 以3年生水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)鳞茎主芽为材料,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性糖含量;采用PCR法从主芽中分离克隆NtTIM基因并对其序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR方法分析主芽不同生长发育时期和温度诱导下的表达变化。可溶性糖含量测定结果表明,水仙鳞茎膨大期,主芽可溶性糖含量逐渐降低;休眠期先升高后降低;花芽分化期其含量在均衡的水平(4%左右)。生物信息学分析表明:分离克隆到了1个NtTIM基因,该基因含有765 bp开放阅读框,编码254个氨基酸,属于TIM-phosphatebinding基因家族,推导的氨基酸序列与油菜、芜菁、拟南芥、甘蓝等植物具有85%以上的同源性;编码的蛋白为稳定的呈酸性的疏水蛋白,无信号肽位点但含有1个跨膜结构域、2个N-糖基化位点。qRT-PCR分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期主芽NtTIM基因表达量略升高;休眠期表达量呈阶段性降低;花芽分化期表达量略升高;20℃、25℃、30℃、35℃温度处理时,主芽NtTIM基因表达量随着温度升高而降低,且处理时间越长,其表达量越低。推测NtTIM基因参与调控水仙鳞茎主芽休眠。为进一步研究NtTIM基因的分子功能,以及深入研究水仙夏休眠的分子机制提供帮助。; 冯莹丁安琪潘东明; 关键词：水仙可溶性糖基因克隆

中国水仙ZDS反义基因表达载体的构建与转基因植株的获得被引量：2: 2015年; 【目的】构建中国水仙ZDS反义基因表达载体,为进一步研究ZDS基因的功能、改良中国水仙花色、培育花色新品种提供参考。【方法】以中国水仙花为材料,采用RT-PCR方法克隆其ZDS基因,通过PCR、双酶切、连接等方法将ZDS基因反向互补插入到pCAMBIA1301双GUS植物表达载体中,构建ZDS反义基因表达载体P1301-ZDS,再通过冻融法将重组质粒P1301-ZDS导入根癌农杆菌。采用根癌农杆菌介导法将ZDS反义基因转化中国水仙带盘鳞茎,通过直接、间接、延迟筛选法3种方法对侵染的带盘鳞茎进行抗性筛选,采用直接筛选法和逐步降低选择压(质量浓度)方法对抗性鳞茎进行增殖和分化培养,采用GUS组织化学和hyg基因的PCR检测方法对中国水仙转基因植株进行鉴定。【结果】成功构建了中国水仙ZDS反义基因表达载体P1301-ZDS;延迟筛选法为根癌农杆菌侵染带盘鳞茎的有效筛选方法,转化效率达到28.54%;逐步降低选择压法为抗性小鳞茎增殖和分化培养的有效培养方法;将65株抗性小苗在1/2 MS+0.2mg/L NAA+10mg/L Hyg+100mg/L Cef生根培养基中培养,获得了12株再生植株,转化率达到18.46%;检测结果表明,10株抗性植株hyg基因和gus基因已经整合到中国水仙的基因组中并稳定表达;1株抗性植株稳定表达hyg基因但gus基因未稳定表达,1株抗性植株2个基因均未稳定表达。【结论】构建中国水仙ZDS反义基因表达载体并侵染中国水仙带盘鳞茎,经抗性筛选后获得12株中国水仙转基因植株。; 冯莹周翔潘腾飞郭志雄潘东明; 关键词：中国水仙

漳州水仙ZDS基因cDNA克隆及其表达分析被引量：7: 2013年; 采用RACE技术从漳州水仙‘金盏银台’Narcissus tazetta var.chinensis花器官总RNA中克隆ZDS的cDNA序列,用相关软件进行序列分析,并利用实时荧光定量技术检测ZDS基因在各水仙品种不同花器官的表达。序列分析表明,ZDS基因cDNA全长2189 bp,其中包含69 bp 5'非编码区,395 bp 3'非编码区,1725 bp编码区(编码574个氨基酸,分子量约63.6 kDa),命名为Ntzds(GenBank登录号:EU573238),其编码的氨基酸序列(ACB87206.1)与喇叭水仙(CAA12062.1)、葡萄(XP_002277348.21)和温州蜜柑(ABC33728.1)ZDS基因编码产物的相似性分别为97%、85%和83%。实时荧光定量PCR分析表明,Ntzds基因在漳州水仙‘金盏银台’、‘Minnow’、‘Fortissimo’中均有表达,且同一品种中副冠的表达量高于花瓣;随着花色的加深,其转录水平也逐渐趋高。; 钟娴江琳玉潘东明潘腾飞卞阿娜; 关键词：基因克隆基因表达

混接茂谷橘橙对芦柑叶片和果实淀粉酶活性的影响: 2009年; 为探讨混合嫁接对柑橘果实物质代谢等生理过程的影响,对混合嫁接后的芦柑和茂谷橘橙淀粉酶活力进行测定。结果表明:茂谷橘橙淀粉酶活力显著高于芦柑;混合嫁接茂谷橘橙后的芦柑比未嫁接的淀粉酶活性显著增强,且变化趋势也与茂谷橘橙相似。; 赖呈纯余亚白陈源王琦谢鸿根高慧颖; 关键词：柑橘芦柑淀粉酶

[木奈]果实中花青素合成酶基因PsANS的克隆及原核表达分析被引量：2: 2011年; 根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的木奈成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:基因命名为PsANS,登录号:JN560957。该cDNA长1 478 bp,包含137 bp 5'非编码区,267 bp 3'非编码区,开放阅读框长度为1 074 bp。PsANS编码358个氨基酸,分子量为40.41 ku,理论等电点为5.35。经BLAST分析对比发现,PsANS氨基酸序列与甜樱桃、苹果和草莓的ANS氨基酸同源性都很高,分别为98%、93%和89%。将PsANS亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和pET-32a上,在大肠杆菌BL21中经1mmol/L ITPG诱导表达获得了木奈PsANS融合表达蛋白,其分子量大小与预期的一致,进一步确认本试验克隆得到的PsANS为木奈花青素合成酶基因。; 姜翠翠陈桂信潘东明吕恃衡; 关键词：克隆原核表达

夜来香SAMT基因的分离与原核表达被引量：3: 2015年; 为探究夜来香(Cestrum nocturnum)花香基因SAMT在花香代谢中的调控作用,以花瓣为材料,采用RTPCR和RACE技术相结合,克隆夜来香SAMT基因的全长c DNA。结果表明:该c DNA的序列长度为1 493 bp,编码365个氨基酸,其中包含1 098 bp ORF、130 bp 5′UTR和265 bp 3′UTR,将其命名为Cn SAMT;生物信息学分析结果表明:该基因所编码的氨基酸序列与烟草、番茄的同源性分别为98%和98%,属于甲基转移酶-7家族;原核表达结果表明:Cn SAMT的蛋白表达产物约为42 ku,与软件预测的结果大致相同。采用染色体步移技术,克隆夜来香Cn SAMT的5′端调控序列,结果表明:该序列长度为993 bp,且该序列除了含有TATA-box、CAAT-box等启动子核心元件外,还含有光、生长素、脱落酸、热胁迫、缺氧胁迫等外界环境条件响应的顺式作用元件。; 杨华丽吕恃衡蔡韡韡郑鸿昌潘东明李子真陈桂信; 关键词：夜来香原核表达

水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析被引量：2: 2016年; 采用PCR法,从水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)鳞茎主芽中分离克隆到1个温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL。该基因含有567 bp开放阅读框,编码188个氨基酸。该基因属于lipocalin-2superfamily基因家族;推导的氨基酸序列含有SCR1、SCR2和SCR3 3个植物lipocalin的典型结构域,与小麦、拟南芥等植物的同源性大于75%;编码的蛋白为稳定酸性亲水蛋白,不含有信号肽,进行N末端朝外由外到内的跨膜运动。qRT-PCR结果分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期NtTIL表达量较低;休眠期表达量先升高后降低。推测NtTIL对水仙鳞茎主芽休眠具有一定调控作用。; 丁安琪冯莹朱里莹徐世荣秦军潘东明; 关键词：水仙克隆

“台农甜蜜”桃胚愈伤组织的诱导与继代保持被引量：3: 2008年; 以5年生"台农甜蜜"桃接近成熟的胚为试验材料,研究接种方式、光照条件和不同培养基对其愈伤组织诱导影响。结果表明,黑暗条件下,将去除种皮的"台农甜蜜"桃子叶胚接种到附加2.0mg/L的MS培养基上培养,可以诱导出松散的、生长状态良好的桃愈伤组织。在"台农甜蜜"桃愈伤组织继代保持过程中,比较了光照条件、愈伤组织类型、不同培养基和继代方式对其生长的影响。结果表明,采用附加1.0mg/L2,4-D的MS培养基与附加1.0mg/L2,4-D、0.5mg/LKT、100mg肌醇的MS培养基交替继代,并在光照下培养,可以实现"台农甜蜜"桃TN2和TN3类型愈伤组织的长期继代保持,并使其保持旺盛的生长能力。; 赖呈纯余亚白赖钟雄谢鸿根王琦陈源; 关键词：愈伤组织

水仙SSR分子标记PCR反应体系的建立与优化被引量：2: 2014年; 利用单因素梯度试验与正交试验相结合、方差分析与多重比较分析相结合的方法,对水仙简单重复序列—聚合酶链式反应(SSR-PCR)扩增反应体系中的4个因素(DNA、dNTPs、引物及Taq酶)进行优化分析,方差分析表明4个因素对SSR-PCR的影响均达到极显著水平,通过多重比较分析发现SSR引物和Taq酶对总体系的扩增结果影响最大。根据单因素梯度试验与正交试验结果,建立了适合水仙SSR标记分析的最优PCR反应体系:DNA模板2.5 ng·μL-1,10×PCR Buffer(含1.5 mmol·L-1Mg2+),dNTPs 0.25 mmol·L-1,上下游引物各0.50μmol·L-1,Taq酶1.00 U,总体积20μL。该优化体系的建立可为今后水仙SSR分析提供标准化的试验体系,为水仙种质鉴定、品种指纹图谱绘制、遗传多样性分析、群居遗传结构研究和遗传连锁图谱分析等领域提供技术支持。; 祁世明潘东明潘腾飞佘文琴; 关键词：水仙简单重复序列正交设计

国家科技支撑计划(2007BAD07B00)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家科技支撑计划(2007BAD07B00)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈