湖南省自然科学基金(06JJ4199) 作品数:11 被引量:26 H指数:4 相关作者: 朱红 曾亮 袁君 肖志强 邓亚平 更多>> 相关机构: 中南大学 湖南省肿瘤医院 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 长沙市科技局科技项目 湖南省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
应用蛋白质组学技术筛选宫颈癌临床分期相关蛋白 被引量:5 2009年 目的:通过比较早期宫颈癌和中-晚期宫颈癌的差异表达蛋白,以发现与宫颈癌临床分期相关蛋白,为临床预后和复发的预测提供新指标。方法:收集早期宫颈癌和中-晚期宫颈癌组织标本,提取组织总蛋白进行二维凝胶电泳,选择部分差异表达蛋白进行MALDI-TOF质谱分析和生物信息学分析进行蛋白质鉴定,进一步应用Western Blot和免疫组织化学技术检测部分差异表达蛋白的表达情况。结果:建立了早期宫颈癌组和中-晚期宫颈癌组的二维凝胶电泳图谱,其中两组的平均蛋白质点数分别为1098±23、1142±21,通过进行质谱分析和生物信息学查询,与早期宫颈癌组比较,鉴定了在中-晚期组下调的蛋白4个,包括Hemoglobin subunit beta HB、caspase-14、galectin-7、CK19;中-晚期组上调的蛋白8个,包括NMP238、HSP70、Calmodulin-like5、S100A9。Western Blot和免疫组化检测结果均显示S100A9在中-晚期组中的表达高于早期组,CK19在早期组中的表达高于中-晚期组。结论:早期宫颈癌和中-晚期宫颈癌中存在着差异表达蛋白,这些蛋白可能成为宫颈癌预后和复发预测的生物标志物。 曾亮 朱红 邓亚平 陈森林 刘志红关键词:宫颈癌 蛋白质组学 放疗敏感性不同宫颈癌组织的蛋白质组学比较研究 被引量:1 2007年 目的:比较放疗敏感性不同的早期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,为确定宫颈癌放疗敏感性相关标志物提供依据。方法:收集进行治疗前的早期宫颈癌组织标本。根据放疗后WHO实体瘤疗效判断标准,选择其中对放疗敏感和不敏感的标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳得到凝胶图谱,采用PD-quest 7.0软件进行匹配和差异分析,识别两组之间表达差异蛋白点。将部分差异蛋白点进行胶内原位切割、酶解后进行MALDI-TOF-MS分析,获取肽质量指纹图,数据库搜索鉴定蛋白质。应用Western印迹技术验证筛选的部分差异表达蛋白的表达。结果:建立了分辨率高、重复性好的宫颈癌放疗高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳图谱。高敏感组蛋白点(754±64)个(n=5),低敏感组蛋白点(777±48)个(n=5),组间平均匹配率为87.6%。选择部分差异在2倍以上的蛋白斑点进行质谱分析,8个差异表达蛋白被成功鉴定,其中5个蛋白质在高敏感组高表达,3个蛋白质在高敏感组低表达。Western印迹结果与蛋白质组筛选结果基本一致。结论:放疗高敏感组和低敏感组宫颈癌组织间存在蛋白表达的差异,这些差异表达的蛋白可能与放疗敏感性有关。 曾亮 朱红 裴海平 邓亚平 袁君关键词:宫颈肿瘤 蛋白质组学 S100A9 Galectin7在同时放化疗敏感性不同宫颈癌中的表达及意义 被引量:3 2008年 目的:观察S100A9和Galectin7在同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织中的表达及与宫颈癌同时放化疗敏感性的关系。方法:收集进行治疗前中晚期宫颈癌组织标本,病理诊断均为中分化鳞癌,放化疗后根据WHO实体瘤疗效判断标准,将收集的宫颈癌组织标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳和质谱分析鉴定差异表达蛋白,分别应用Westernblot和免疫组织化学方法检测组织中蛋白的表达。结果:筛选得到在同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织中差异表达蛋白S100A9和Galectin7,它们在高敏感组中的表达均高于低敏感组。WesternBlot检测结果与蛋白质组学结果一致。免疫组化结果显示S100A9在高敏感组中的表达强度和表达率(88.3%,53/60)均显著高于低敏感组(28.6%,10/35),Galectin7在高敏感组中的表达强度及表达率(91.7%,55/60)显著高于低敏感组(40%,14/35),差异均有统计学意义。结论:S100A9和Galectin7的表达与宫颈癌同时放化疗敏感性有关,可能作为同时放化疗敏感性预测的标志物。 朱红 曾亮 涂青松 肖自强关键词:宫颈癌 蛋白质组学 免疫印迹 中晚期宫颈癌同期放化疗敏感性相关蛋白的筛选 被引量:4 2008年 背景与目的:同期放化疗是中晚期宫颈癌治疗的新方法,但尚缺乏有效手段进行治疗前敏感性预测以制定个体化的治疗方案,本研究通过比较同期放化疗高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,为确定中晚期宫颈癌同期放化疗敏感性相关蛋白以预测放化疗的敏感性。方法:收集治疗前的宫颈癌组织标本冻存。在进行同期放化疗后,根据WHO实体瘤疗效判断标准分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行2-DE得到凝胶图谱,进行匹配和差异分析,识别两组之间表达差异蛋白点。将这些差异蛋白点切割、酶解后进行MALDI-TOF-MS分析,数据库搜索鉴定蛋白质。应用免疫组化SP法检测部分差异表达蛋白在宫颈癌组织中的表达,并分析临床病理意义。结果:建立了分辨率高、重复性好的宫颈癌同期放化疗高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳图谱,质谱分析成功鉴定出19个差异表达蛋白,其中9个蛋白质在高敏感组高表达,10个蛋白质在高敏感组低表达。免疫组织化学结果显示,HSP70在低敏感组中的表达强度高于高敏感组,S100A9蛋白在高敏感组中的表达强度高于低敏感组。S100A9在高敏感组中的表达率为88.3%(53/60),在低敏感组中的表达率为28.6%(10/35),差异有统计学意义($2=35.34,P<0.001);HSP70在高敏感组中的表达率为21.7%(13/60),在低敏感组中的表达率为85.7%(30/35),差异有统计学意义($2=36.59,P<0.001)。结论:获得了高敏感组和低敏感组宫颈癌组织的蛋白质2-DE图谱,鉴定了部分差异表达蛋白,这些差异表达蛋白与放化疗敏感性有关,可能作为同期放化疗敏感性预测的候选标志物。 朱红 曾亮 袁君 申良方 肖志强关键词:宫颈肿瘤 同期放化疗 疗效指标 双向凝胶电泳 同时放化疗敏感性不同中晚期宫颈癌蛋白质组学比较的初步研究 被引量:1 2008年 目的比较同时放化疗高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,识别和鉴定高敏感组和低敏感组之间差异表达蛋白,为中晚期宫颈癌患者同时放化疗敏感性的预测提供依据。方法搜集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本10例,病理诊断均为中分化鳞状细胞癌。在进行同时放化疗后,根据WHO实体瘤疗效判断标准将宫颈癌组织标本分为高敏感组(5例)和低敏感组(5例)。提取组织总蛋白,进行二维凝胶电泳得到凝胶图谱;采用PD-quest 7.0软件进行匹配和差异分析,识别两组之间表达差异蛋白点。将这些差异蛋白点进行胶内原位切割、酶解后进行MALDI-TOF-MS分析,获取肽质量指纹图,数据库搜索鉴定蛋白质。应用Western blot方法检测其中2个差异表达蛋白Galectin-7和热休克蛋白70在10例宫颈癌组织标本中的表达。应用免疫组织化学方法检测Galectin-7和热休克蛋白70在95例临床活检中的表达情况。结果建立了分辨率高、重复性好的宫颈癌同时放化疗敏感组和不敏感组的双向凝胶电泳图谱。高敏感组蛋白点数为(781±74)个,低敏感组蛋白点数为(766±52)个,组间平均匹配率为87.6%。选择部分差异在2倍以上的蛋白斑点进行质谱分析、19个差异表达蛋白被成功鉴定,其中8个蛋白质在高敏感组高表达,10个蛋白质在高敏感组低表达。免疫印迹和免疫组织化学结果显示:热休克蛋白70在低敏感组中的表达率显著高于高敏感组,而Galectin-7在高敏感组中的表达率显著高于低敏感组,这一结果也与蛋白质组筛选结果基本一致。结论同时放化疗高敏感组和低敏感组宫颈癌组织间存在蛋白表达的差异,这些差异表达的蛋白可能与放化疗敏感性有关。 朱红 曾亮 廖遇平 肖志强关键词:宫颈肿瘤 放化疗法 蛋白质组学 质谱分析 S100A9和NMP238在放疗敏感性不同宫颈鳞癌组织中表达的实验研究 被引量:3 2007年 目的:观察S100A9和NMP238在放疗敏感性不同宫颈鳞癌组织中的表达及临床病理学意义。方法:收集治疗前宫颈癌组织标本,病理诊断均为中分化鳞癌,置于-80℃超低温冰箱保存。在进行放疗后,根据WHO实体瘤放疗疗效判断标准,从中选择5例对放疗敏感的病例(高敏感组)和5例对放疗不敏感的病例(低敏感组),提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳和质谱分析鉴定差异表达蛋白,分别应用Western blot和免疫组织化学方法检测组织中蛋白的表达。结果:建立了分辨率高、重复性好的宫颈鳞癌放疗高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳图谱,差异表达蛋白经鉴定得到高敏感组中高表达的S100A9蛋白以及低表达的NMP238蛋白。Western blot检测结果显示S100A9在高敏感组中的表达强于低敏感组,NMP238在低敏感组中的表达强于高敏感组。免疫组化结果显示,S100A9在高敏感组中的阳性为表达率88.3%(53/60),高于低敏感组中的阳性表达率28.6%(10/35),二者差异有统计学意义(χ2=35.34,P<0.0001);NMP238在低敏感组中的阳性表达率为85.7%(30/35),高于高敏感组中的阳性表达率35%(21/60),二者差异有统计学意义(χ2=22.86,P<0.0001);S100A9在高敏感组中表达强度高于低敏感组,NMP238在低敏感组中表达强度高于高敏感组,差异亦均有统计学意义。结论:S100A9和NMP238的表达与宫颈鳞癌放疗敏感性有关。 曾亮 朱红 邓亚平 裴海平 袁君关键词:放疗敏感性 蛋白质组学 免疫印迹 S100A9和NMP238在同时放化疗敏感性不同宫颈癌中的表达及意义 被引量:5 2010年 目的:初步探讨钙结合蛋白A9(S100A9)和核质蛋白238(NMP238)的表达在宫颈癌同时放化疗敏感性中的意义。方法:收集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本,置-80℃超低温冰箱中保存,病理诊断均为中分化鳞癌。在进行同时放化疗后,根据世界卫生组织实体瘤疗效判断标准,将收集的宫颈癌组织标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定差异表达蛋白。然后分别应用Western印迹和免疫组织化学方法检测组织中的蛋白表达。结果:筛选得到在同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织中差异表达蛋白S100A9和NMP238,S100A9蛋白在高敏感组中高表达,NMP238在低敏感组中高表达。Western印迹检测结果与蛋白质组学结果一致。免疫组织化学结果显示S100A9在高敏感组中的表达强度和表达率(88.3%)均显著高于低敏感组(28.6%),NMP238在低敏感组中的表达强度及表达率(35.0%)显著高于高敏感组(85.7%)。结论:S100A9和NMP238的表达与宫颈癌同时放化疗敏感性有关,可能作为同时放化疗敏感性预测的标志物。 朱红 曾珊 曾亮 王学伟 肖志强关键词:宫颈癌 同时放化疗 蛋白质组学 同时放化疗敏感性不同宫颈癌组织的二维电泳图谱建立及质谱分析 被引量:4 2007年 目的:分析同时放化疗后高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,为确定宫颈癌同时放化疗敏感性相关蛋白提供依据。方法:收集治疗前的中晚期宫颈癌活检组织标本,均为中分化鳞癌,置于—80℃超低温冰箱保存。同时放化疗后,根据WHO实体瘤疗效判断标准,将收集的10例宫颈癌组织标本分为高敏感组(5例)和低敏感组(5例);提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)得到凝胶图谱,采用PD-quest 7.0软件进行匹配和差异分析,识别两组之间表达差异蛋白点。将部分差异蛋白点进行胶内原位酶解后进行MALDI-TOF-MS分析,获取肽质量指纹图,数据库搜索鉴定蛋白质。结果:建立了分辨率高,重复性好的同时放化疗后宫颈癌组织高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳图谱。高敏感组蛋白点数为781±74个,低敏感组蛋白点数为766±52个,组间平均匹配率为87.6%。质谱分析成功鉴定15个差异表达蛋白,其中7个蛋白质在高敏感组高表达,8个蛋白质在高敏感组低表达。结论:蛋白质2-DE图谱和质谱鉴定结果说明同时放化疗后高敏感组和低敏感组宫颈癌组织间存在蛋白质表达的差异,这些蛋白质可能与同时放化疗敏感性有关。 曾亮 朱红 裴海平 袁君关键词:宫颈癌 同时放化疗 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱 不同临床分期宫颈癌组织蛋白质组学的比较 被引量:1 2010年 目的通过比较不同临床分期宫颈癌组织的差异表达蛋白,以发现与宫颈癌临床分期相关蛋白,为临床预后和复发的预测提供新指标。方法收集不同临床分期宫颈癌组织,分为早期宫颈癌组和中晚期宫颈癌组,提取组织总蛋白进行二维凝胶电泳,选择部分差异表达蛋白进行MALDI-TOF质谱分析和生物信息学分析,Western blot和免疫组织化学技术检测部分差异表达蛋白HSP70和Galectin-7的表达情况。结果建立了早期宫颈癌组和中晚期宫颈癌组的二维凝胶电泳图谱,其中两组的平均蛋白质点数分别为(1098±23)、(1142±21),通过进行质谱分析和生物信息学查询,鉴定了显著差异表达的12个蛋白点,在早期组上调的4个,包括Hemoglobin subunit beta Hb、caspase-14、Galectin-7、CK19;中晚期组上调的8个,包括Lamin-B1、Flavin reductase、Glutamate de-hydrogenase1、Retinal dehydrogenase1、NMP238、HSP70、Cal modulin-like5、S100A9。Western blot和免疫组织化学检测结果均显示HSP70在中晚期组中的表达高于早期组,Galectin-7在早期组中的表达高于中晚期组。结论不同临床分期的宫颈癌中存在着差异表达蛋白,这些蛋白可能是宫颈癌诊断和预后的生物标志物。 朱红 周传意 袁君 曹慧 易琼 刘利关键词:宫颈癌 蛋白质组学 同时放化疗敏感性不同中晚期宫颈癌组织的蛋白质组学比较研究 目的比较同时放化疗高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,识别和鉴定高敏感组和低敏感组之间差异表达蛋白,为中晚期宫颈癌患者同时放化疗敏感性的预测提供依据。方法收集进行治疗前的中晚期宫颈癌组织标本,病理诊断均为中... 朱红 曾亮 廖遇平 肖志强文献传递