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小黑麦碳酸酐酶蛋白质三维结构预测被引量：4: 2012年; 根据已经克隆到的小黑麦碳酸酐酶基因序列,将其概念地翻译成蛋白质的氨基酸序列。利用MEGA4.1、DNAStar5.02、SOPMA、Swiss-Model Workspace和NCBI-VAST等在线软件和服务器对该小黑麦碳酸酐酶(CA)的一级结构、二级结构及三维结构进行了分子结构模型预测,并对其三维结构进行了比对。结果显示,小黑麦碳酸酐酶定位于线粒体内膜和叶绿体类囊体膜上,具有β类碳酸酐酶所特有的保守性基序C-[SA]-D-S-R-[LIVM]-x-[AP];SOPMA预测的二级结构显示,该酶含有α-螺旋(38.61%)、随机卷曲(54.44%)和β-折叠(6.95%)。通过VAST矢量比对工具将小黑麦碳酸酐酶与模板(lekjA)三维结构进行比对,结果显示小黑麦碳酸酐酶与豌豆β碳酸酐酶同型八聚体中的一个单体(lekjA)具有很好的匹配,故推测小黑麦碳酸酐酶全酶也可能是同型八聚体。; 何宣王白羽张晓磊任丽彤孔广超; 关键词：小黑麦碳酸酐酶分子结构

用隶属函数值评价小黑麦在萌发期及幼苗期对复合盐胁迫的耐性被引量：10: 2012年; 【目的】为小黑麦在盐胁迫下的耐盐生理研究及其耐盐育种提供基本的参考依据。【方法】以4个春性小黑麦品种为材料,研究不同浓度的NaCl和Na2SO4混合盐溶液对小黑麦种子发芽及幼苗生长的影响,采用隶属函数法进行耐盐性综合评价。【结果】随着盐分浓度的增加,4个小黑麦品种的种子发芽率、鲜重、地上干重、地下干重、苗高和根数都呈下降趋势,均与盐浓度呈不同程度的负相关。盐胁迫下,小黑麦的根长则呈先上升后下降趋势。4个品种发芽率和苗期指标存在较大差别。【结论】根据耐盐性综合评价值,供试4个小黑麦品种的耐盐性顺序为:新小黑麦5号>新小黑麦1号>新小黑麦3号>新小黑麦4号。; 林存亮李鸿文石培春李士磊张新疆李召锋孔广超曹连莆; 关键词：小黑麦萌发幼苗隶属函数值

小黑麦萌发期耐盐性评价被引量：11: 2012年; 为了解不同基因型小黑麦萌发期的耐盐能力,以87份小黑麦品种(系)为材料,分析了不同浓度NaCl溶液(100～250mmol·L-1)处理后小黑麦种子萌发的变化。结果表明,200～250mmol·L-1 NaCl对小黑麦种子萌发影响显著。在200mmol·L-1 NaCl胁迫下,可以鉴别不同小黑麦材料的耐盐性差异。利用200mmol·L-1 NaCl胁迫下的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数及幼苗干重的耐盐系数进行聚类分析,87份材料中,耐盐性较强的材料有32份,中间型有14份,盐敏感型41份。; 任丽彤孔广超邵红雨程远征曹连莆; 关键词：小黑麦萌发期耐盐性

六倍体小黑麦耐盐相关基因cDNA-AFLP技术体系的建立被引量：5: 2010年; 为建立和优化六倍体小黑麦耐盐相关基因克隆cDNA-AFLP技术反应体系,并探索其应用效果,以对盐胁迫反应不同的4个六倍体小黑麦品种(系)为材料,对其在0.15mol/L氯化钠胁迫72h的cDNA-AFLP技术中DNA聚合酶浓度、模版浓度和引物筛选等过程进行了摸索和优化。结果显示,建立了以1.0UTaqDNA聚合酶为扩增酶、预扩产物稀释20倍、EcoRI和MseI为内切酶及其相应接头为引物的六倍体小黑麦耐盐相关基因cDNA-AFLP技术体系,并从64对引物组合中筛选出稳定、高效的引物组合以及236个差异片段。结果表明,该cDNA-AFLP技术体系更易分离出差异性片段,为六倍体小黑麦在盐胁迫及其它逆境环境下的基因克隆提供一种有效手段。; 王白羽任丽彤曹连莆孔广超; 关键词：小黑麦耐盐基因 CDNA-AFLP

Na_2SO_4和NaCl胁迫对小黑麦萌发及幼苗生长影响被引量：7: 2012年; 为给小黑麦在盐胁迫下的耐盐生理研究及其耐盐育种提供基本的参考依据,以4个春性小黑麦品种为材料,利用模拟盐胁迫方法,研究了NaC1和Na2SO45个盐分水平(0、50、100、150和200mmol/L)条件下,胁迫对发芽和苗期指标的影响及抑制作用的大小。结果表明:不同种类和不同浓度的盐胁迫对小黑麦发芽率和幼苗形态有不同程度的影响。随着盐浓度的升高,小黑麦的发芽率和苗期指标均有所下降。盐胁迫对小黑麦苗期各指标影响由小到大依次为:根数、鲜重、地上干重、地下干重、发芽率、根长和苗高。NaC1胁迫下的各个指标的抑制指数Ⅱ略高于Na2SO4胁迫下的各个指标的抑制指数Ⅱ。NaC1对小黑麦幼苗的胁迫程度高于Na2SO4。试验结果将对盐渍化耕地小黑麦生产有重要的参考价值。; 李鸿文林存亮石培春张新疆王卫超李士磊李召锋孔广超曹连莆; 关键词：小黑麦萌发幼苗

小黑麦天冬酰胺合成酶基因表达载体构建及功能验证被引量：1: 2013年; 【目的】对所克隆的小黑麦天冬酰胺合成酶基因(TriAS)的功能进行验证。【方法】构建TriAS-PZP植物表达载体,并通过沾花法侵染拟南芥。在盐胁迫条件下对转基因拟南芥种子萌发情况进行调查,并测定其幼苗中丙二醛含量和SOD酶活性。【结果】构建了TriAS-PZP植物表达载体,将TriAS基因已整合入拟南芥基因组中,并能够在拟南芥中稳定遗传。转TriAS基因拟南芥在盐胁迫条件下萌发率、幼苗根长增长速度均较野生型高,且丙二醛含量和SOD酶活性却均低于野生型。【结论】构建了所克隆基因TriAS的过量植物表达载体,证明所克隆的小黑麦天冬酰胺合成酶基因促进了拟南芥耐盐性能的提高,表明该基因具有增强植物耐盐性的功能。; 张晓磊李培培任丽彤孔广超; 关键词：小黑麦

盐胁迫下小黑麦碳酸酐酶基因表达及其酶活性分析被引量：4: 2012年; [目的]探究盐胁迫下小黑麦中碳酸酐酶(CA)基因表达特点及酶活性变化规律。[方法]采用0.15M NaCl对两个六倍体小黑麦品种幼苗进行胁迫处理,通过实时荧光定量PCR对胁迫条件下CA基因表达量的变化进行检测,并利用pH计法对相应材料中的碳酸酐酶活性进行测定。[结果]盐胁迫条件下两个小黑麦品种幼苗中的CA基因表达量及酶活性均较对照有所增强。随胁迫时间的不同,参试的两个小黑麦品种中CA基因表达量及酶活性变化的幅度有一定差异。[结论]盐胁迫对小黑麦中CA基因的表达量和酶活性均具有促进作用。; 何宣王白羽张晓磊任丽彤孔广超; 关键词：小黑麦碳酸酐酶基因表达酶活性荧光定量PCR

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国家自然科学基金(30960194)