国家自然科学基金(81201417)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 周期性应力通过G蛋白耦联受体激酶结合蛋白1调控髓核细胞细胞外基质的表达被引量：1
- 2015年
- 目的 观察周期性应力下G蛋白耦联受体激酶结合蛋白1（Git1）对大鼠髓核细胞细胞外基质表达的影响.方法 首先将细胞玻片分为对照组和加压组,通过Western blot检测两组Git1蛋白的表达,荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测两组细胞外基质的表达变化.然后使用小干扰RNA（siRNA）阻断Git1蛋白,分为对照组、Git1 siRNA组、siRNA阴性对照组,在加压环境下比较各组细胞外基质的表达变化.结果 加压组细胞的Git1蛋白表达（1.372±0.205）较对照组（0.478 ±0.186）明显增高,加压组细胞外基质的基因表达较对照组明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.siRNA处理细胞后,Git1 siRNA组Git1蛋白表达（0.587±0.142）较对照组（1.041±0.103）明显降低.加压环境下,Git1 siRNA组细胞外基质的基因表达较对照组和siRNA阴性对照组明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 周期性压力能促进髓核细胞细胞外基质的表达,Git1在压力传导中起信号传递作用.
- 谢华农鲁明高共鸣周栋黄永静
- 关键词：髓核细胞
- 周期性应力下大鼠髓核细胞中Src蛋白磷酸化及其作用的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨周期性应力下大鼠髓核细胞中Sre蛋白的磷酸化水平及其意义。方法体外培养SI）大鼠髓核细胞，取第2代细胞按1x105／mL的密度接种于玻片上。将玻片随机分成4组（n=8）：对照组、加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组。加压0．5h组、加压1．0h组、加压2．0h组细胞以0—200kPa的压力、0．1Hz的频率分别加压0．5、1．0、2．0h，对照组在无压力环境下培养。应刖Westernblot检测各组磷酸化Src（pSrc）蛋白的表达。应用PP2[4-氨基-5-（4。氯苯）-7．（t-丁基）吡畔啉酮（3，4-d）嘧啶]抑制Src蛋白，另取细胞玻片，随机分为3组（n=8）：对照组、加压6h组、PP2＋加压6h组。使用荧光实时定量多聚酶链式反应（RT-PCR）检测3组细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达。结果对照组、加压0．5h组、加压1．0h组及加压2．0h组pSrc／磷酸片油醛脱氧酶灰度比值平均分别为0．244±0．013、0．477±0．044、0．530±0．014、0．700±0．063，4组之问比较差异有统计学意义（P〈0．05），除加压0．5h组与加压1．0h组之问外，其余组别之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。荧光RT．PCR检测3组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达结果显示：对照组表达量最低（1．00l±0．039、1．004±0．104），加压6h组最高（5．404±0．219、2．127±0．028），PP2＋加压6h组居中（3．038±0．237、1．678±0．125），3组之间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论周期性压力能促进髓核细胞Ⅱ型胶原和蛋rI多糖的分泌，Src蛋白磷酸化在压力传导中起信号传递作用。
- 高共鸣农鲁明周栋谢华蒋羽清徐南伟
- 关键词：椎间盘髓核细胞
- 白细胞介素-6通过p38蛋白调控髓核细胞的增殖和迁移被引量：2
- 2015年
- 目的 观察白细胞介素-6（IL-6）对髓核细胞增殖和迁移的调控作用.方法 体外分离培养大鼠髓核细胞,将其随机分为对照组、IL-6组、加压组、IL-6＋加压组和IL-6＋ p38蛋白抑制剂（SB203580）＋加压组.给予相应处理后,应用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法评估髓核细胞增殖能力,应用划痕实验评估细胞迁移能力.结果 CCK-8法检测各组细胞吸光度值,未加压环境下,IL-6组吸光度值（1.08±0.02）较对照组（0.67±0.01）明显升高（P＜0.05）;加压环境下,IL-6组吸光度值（1.51±0.06）也较对照组（0.88±0.04）明显升高（P＜0.05）.细胞划痕实验中,未加压环境下,IL-6组迁移距离[（27.73±3.15）像素]较对照组[（12.90±4.77）像素]明显升高（P＜0.05）;加压环境下,IL-6组迁移距离[（52.81±3.72）像素]也较对照组[（14.32±3.84）像素]明显升高（P＜0.05）.加压环境下使用SB203580阻断p38蛋白后,吸光度值（0.81±0.04）和迁移距离[（33.82±3.72）像素]均较IL-6组[（1.51±0.06）、（52.81±3.72）像素]显著下降（P＜0.05）.结论IL-6能通过p38蛋白通路促进髓核细胞的增殖和迁移.
- 高共鸣农鲁明周栋黄永静赵书杰徐南伟
- 关键词：白细胞介素-6髓核细胞迁移
- 周期性应力下磷脂酶C-γ1及其抑制剂对大鼠髓核细胞增殖能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的 观察周期性应力下磷脂酶C-γ1（PLCγ1）及其抑制剂对大鼠髓核细胞增殖的影响.方法 将细胞玻片随机分成4组：对照组、加压0.5h组、加压1h组、加压2h组.Western blot法检测各组PLCγ1、磷酸化PLCγ1表达.另取细胞玻片,随机分为3组：对照组、加压6h组、U73122＋加压6h组.使用荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测各组细胞外基质的表达.结果 PLCγ1磷酸化水平在加压0.5h组（0.109 ±0.010）、加压1h组（0.138±0.001）、加压2h组（0.201 ±0.014）较对照组（0.086 ±0.005）增高.加入U73122后,细胞外基质的基因表达,以对照组最低,加压6h组最高,U73122＋加压6h组居中,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 周期性压力能促进髓核细胞的增殖,PLCγ1在压力传导中起信号传递作用.
- 谢华农鲁明高共鸣周栋何劲陈旭霞
- 关键词：磷脂酶C-Γ1髓核细胞
