北京市优秀人才培养基金(2010D003034000009)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：聂巍刘颖于红卫范作鹏梁珊更多>>
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- 丙型肝炎病毒1b基因型C区氨基酸70替代对干扰素刺激应答元件的影响
- 2014年
- 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C Virus,HCV)1b基因型(genotype 1b,GT-1b)C区氨基酸(amino acid,aa)70替代对干扰素刺激应答元件(interferon-stimulated response element,ISRE)的影响。方法首先构建HCV GT-1b C区aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,测序鉴定后瞬时转染肝瘤细胞系Huh7细胞,Western blot法鉴定HCV核心蛋白的成功表达;然后利用ISRE双荧光素酶报告基因实验检测核心蛋白表达对ISRE活化的影响,并以SYBR Green real-time PCR检测3种主要干扰素刺激基因(interferon stimulated genes,ISGs)的表达情况。结果构建了HCV aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒,并在体外培养细胞中成功表达。但野生型和变异型核心蛋白表达对ISRE活化及3种主要ISGs表达的影响无明显差异。结论单纯R70Q/H变异的核心蛋白似乎并不足以直接导致IFNα耐药。
- 胡中杰刘颖仇丽霞范作鹏聂巍梁珊于红卫金荣华
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白
- 丙型肝炎病毒1b基因型C区氨基酸70替代对细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)1b基因型(genotype 1b,GT-1b)C区氨基酸(amino acid,AA)70替代对细胞凋亡的影响。方法利用前期构建的HCV GT-1b C区aa70野生型和变异型核心蛋白表达质粒瞬时转染体外培养肝瘤细胞系,采用PCR芯片检测细胞凋亡相关基因的表达,并以Annexin-V FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率。结果与野生型核心蛋白相比,转染表达变异型核心蛋白可使Huh7细胞84个凋亡相关基因中40个表达相对增强,44个表达相对减弱,但相差倍数均在3倍以内。HepG2细胞转染野生型和变异型核心蛋白表达质粒后,细胞凋亡率分别为9.4%±1.9%、9.1%±2.2%,低于空白载体对照组的14.3%±1.4%;以抗Fas抗体处理后,细胞凋亡率增高(52.4%±2.9%、56.1%±2.5%),但仍明显低于空白载体对照组的72.6%±2.1%。结论 HCV核心蛋白表达可抑制细胞凋亡,但核心蛋白单纯R70Q/H变异并不足引起细胞凋亡相关基因表达及凋亡率的显著不同。
- 胡中杰刘颖仇丽霞范作鹏聂巍梁珊于红卫金荣华
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白凋亡
