国家自然科学基金(81271390)
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
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- 银杏内酯B对高糖培养的SH-SY5Y细胞线粒体功能的影响
- 2014年
- 目的观察银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对体外培养的SH-SY5Y细胞线粒体功能的影响。方法高浓度葡萄糖作用于SH-SY5Y细胞建立体外凋亡模型,予以不同浓度GB预处理细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡。在高糖培养细胞前,予以40μmol/LGB或培养基预处理细胞6h,流式细胞仪检测线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位,分光光度计检测线粒体呼吸链复合物I和Ⅲ活性。结果除了5μmol/L外,其他浓度的GB均可减少高糖引起的细胞凋亡(P〈0.01)。GB组线粒体特异性产生的ROS较高糖组明显减少(P〈0.01),线粒体呼吸链复合物I[(69.2±2.7)VS(51.6±2.9)](P〈0.01)和复合物Ⅲ活性提高[(32.3±2.4)VS(26.2±2.5)](P〈0.05)。同时GB组线粒体膜电位去极化较高糖组减少[(5.8±0.6)vs(3.1±0.6)](P〈0.01)。结论GB可通过保护线粒体功能,抑制ROS产生,减少高糖引起的凋亡细胞。
- 李乐周树勤许睿张婧张粒子徐世元
- 关键词:银杏内酯B线粒体活性氧
- 布比卡因致高糖培养SH-SY5Y细胞内质网应激增强与活性氧簇增多及凋亡增加被引量:3
- 2014年
- 目的将布比卡因作用于高糖培养的SH-SY5Y细胞,观测其对细胞内活性氧簇(reactiveoxygenspecies,ROS)及细胞凋亡的影响。方法不同浓度葡萄糖培养基培养SH-SY5Y细胞,经1mmol/L布比卡因作用6h。采用流式细胞仪检测细胞内ROS产量及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞存活率、Westernblot技术检测细胞内GRP78相关蛋白的变化。结果葡萄糖浓度为5.6、6.1、7.0mmol/L的3组间ROS含量差异无统计学意义(P〉0.05);葡萄糖浓度为7.8、11.1、13.3mmol/L时ROS产量分别高于5.6、6.1、7.0mmol/L组(P〈0.05)。各组细胞存活率(%)依次为(4.29±0.20)、(3.30±0.19)、(6.31±0.14)、(7.89±0.09)、(2.81±0.12、(1.01±0.11,组间差异均具有统计学意义(砌.05)。各组细胞凋亡率(%)依次为(1.80±0.09)、(2.82±0.11)、(3.30±0.21)、(4.31±0.18)、(6.28±0.13)、(7.89±0.08),组间差异均具有统计学意义(P〈0.05)。Grp78表达结果为5.6mmol/L组和6.1mmoUL组分别为(1.02±0.12)和(0.97±0.06),均高于7.0mmol/L组(0.39±0.04);7.8mmol]L组(0.98±0.06)高于7.0mmol/L组(0.39±0.04);11.1mmol/L与13.3mmo]/L组低于其他各组,差异均具有统计学意义(P〈0.05);5.6mmol/L组、6.1mmol/L组和7.8mmo]/L组相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论细胞内ROS增多及细胞凋亡增加可能与布比卡因增强高糖培养的SH-SY5Y细胞内质网应激有关,引起细胞内ROS爆发,从而导致细胞损伤和凋亡;而Grp78功能减弱进一步增强细胞内质网应激。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词:SH-SY5Y细胞活性氧簇
- 局麻药引起高血糖产妇神经损伤的易感性分析被引量:1
- 2013年
- 区域神经阻滞在高血糖的产妇中的发生率较普通产妇高,但其对局麻药的神经毒性是否更加敏感仍不明确。根据既往研究发现高糖环境与局麻药均可通过影响钙离子的代谢,细胞器(线粒体及内质网)结构功能,以及丝裂原活化蛋自激酶(mitogen-activatedProreinkinases,MAPKs)家族,包括细胞外号调节激酶(extraceIIuIarsignal—regulatedkinase,ERK),C—JunN-末端激酶(c-JunNtermina卜k.rnase,JNK)或应激活化的蛋白激酶(stressactiviatedlproreinkinase,SAPK)以及p38MAPK信号传导通路,引起神经细胞损伤。由此推测,高血糖的产妇可能对于局麻药神经毒性更加敏感。
- 李乐徐世元梁启波许睿
- 关键词:妊娠合并糖尿病局麻药高糖环境神经毒性
- 布比卡因对高糖培养SH-SY5Y细胞毒性研究被引量:1
- 2015年
- 目的布比卡因作用高糖培养的SH-SY5Y细胞,观测细胞内活性氧(ROS)及凋亡影响。方法 1mmol/L布比卡因作用不同浓度葡萄糖培养基培养的SH-SY5Y细胞6h,检测细胞内ROS、GRP78水平变化及凋亡情况。结果葡萄糖浓度为7.80、11.10、13.30mmol/L组ROS产量均高于5.56、6.10、7.00mmol/L组(P<0.05)。细胞凋亡率组间差异均有统计学意义(P<0.05)。GRP78表达结果为5.56mmol/L组(1.02±0.12)、6.10mmol/L组(0.97±0.06),7.80mmol/L组(0.49±0.04),高于7.00mmol/L组(0.46±0.06);11.10mmol/L组(0.22±0.03)与13.30mmol/L组(0.15±0.07)低于其他各组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细胞内ROS增多及凋亡增加与布比卡因增强细胞内质网应激(ERS)有关。GRP78功能减弱进一步增强细胞ERS。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词:SH-SY5Y细胞
- RNA干扰沉默MKK7对SH-SY5Y细胞凋亡的影响
- 2015年
- 目的 :探讨RNA干扰沉默丝裂原激活的蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MKK7)基因对SHSY5Y细胞凋亡的影响。方法:设计并合成针对MKK7的小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)3条(MKK7si RNA-1、MKK7si RNA-2、MKK7si RNA-3)及与MKK7基因无同源性的带有红色荧光的阴性对照si RNA(negative control si RNA),在lipofectamine 2000介导下转染SH-SY5Y细胞,荧光显微镜下观察转染效果,RT-PCR观察MKK7 m RNA表达及Western blot检测MKK7蛋白的表达,进而筛选出转染效果好的MKK7si RNA,CCK-8检测各组细胞活力,Hochest 33258检测各组细胞凋亡染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测p-JNK、凋亡蛋白cleaved caspase-3的变化。结果:1 MKK7si RNA-3组的MKK7 m RNA表达最低,MKK7蛋白表达最低;2与空白对照组(control group)比较,MKK7si RNA-3组的细胞活力无统计学差异,pJNK、cleaved caspase-3水平降低,凋亡率降低。结论:RNA干扰沉默MKK7可通过下调JNK磷酸化进而抑制SH-SY5Y细胞的凋亡。
- 赖露颖张庆国李乐赵伟雷洪伊姜珊张婧徐世元
- 关键词:SH-SY5Y细胞RNA干扰凋亡