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鸡包涵体肝炎鸡胚肝细胞包涵体特性的研究被引量：1: 2004年; 应用鸡包涵体肝炎病毒 FAV- Hb株试验感染 SPF鸡胚 ,通过透射电镜对感染鸡胚肝脏的观察 ,表明 FAV- Hb株可引起鸡胚肝细胞内形成三种类型的包涵体 ,即非病毒性中等电子密度包涵体 ,病毒性包涵体和非病毒性高电子密度包涵体 ,各型包涵体均可见于胞核或胞浆内 ,但胞核是包涵体首先形成的部位 ,核内包涵体通过核膜进入胞浆。各型包涵体在其形成过程中有较密切的关系。; 王凤龙郝先谱; 关键词：包涵体肝炎包涵体透射电镜

人工感染鸡包涵体肝炎病毒雏鸡胸腺细胞凋亡的检测被引量：2: 2003年; 应用原位末端标记方法对人工感染鸡包涵体肝炎病毒雏鸡的胸腺细胞的凋亡进行检测 ,结果表明 ,鸡包涵体肝炎可引发胸腺细胞的凋亡 ,多数凋亡阳性细胞核结构完整 ,核内有数量不等的阳性颗粒 ,少部分凋亡阳性细胞核破碎或核浓缩 ;HE染色光学显微镜下观察 ,多数坏死的胸腺细胞属细胞凋亡。; 王凤龙; 关键词：鸡包涵体肝炎雏鸡胸腺细胞细胞凋亡发病机理

鸡包涵体性肝炎肿瘤坏死因子α基因mRNA表达的研究: 应用分子克隆获得的鸡肿瘤坏死因子α基因片段,通过地高辛标记制备 DNA核酸探针,核酸原位杂交检测鸡包涵体肝炎病毒Hb株在感染鸡组织细胞的肿瘤坏死因子α mRNA的表达水平,结果表明,Hb株感染雏鸡后,在肝脏、脾脏、胸腺、...; 王凤龙葛金英; 关键词：肿瘤坏死因子Α 包涵体肝炎核酸探针原位杂交; 文献传递

鸡包涵体肝炎肝组织细胞凋亡的初步检测: 应用原位末端标记方法,对试验感染鸡包涵体肝炎病毒的雏鸡肝组织细胞的凋亡检测,结果表明:在鸡包涵体肝炎肝细胞发生明显的凋亡过程,多数凋亡阳性细胞核结构完整,核内有数量不等的阳性颗粒,少部分凋亡阳性细胞核破碎或核浓缩.除肝细...; 王凤龙; 关键词：鸡包涵体肝炎细胞凋亡原位末端标记; 文献传递

鸡肿瘤坏死因子的诱生及活性检测被引量：8: 2003年; 通过对鸡静脉注射卡介苗 (BCG)和脂多糖 (L PS) ,应用 L92 9细胞检测鸡体外周血清、脾细胞和外周血白细胞肿瘤坏死因子 (TNF)活性 ,表明外周血清 TNF活性最高 ,其次是脾细胞 ,而外周血白细胞 TNF活性最低。本研究也表明在正常鸡的外周血液中有少量的; 王凤龙银梅日穆德玛; 关键词：肿瘤坏死因子活性卡介苗脂多糖 TNF

鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α的动态变化与病变相关性的研究: 2005年; 应用FAV_Hb株试验感染1日龄SPF雏鸡,感染后分别于第1、2、3、4、5、7、10、13、16、21、26、31、36、41、46、51、56d扑杀,采外周血和脾脏,通过微量细胞病变法经L929细胞测定其TNF浕活性,并对肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体做病理学检查。结果表明FAV_Hb感染后第3d在外周血开始测出TNF浕活性,以后逐渐上升,第4d达到小的峰值,随后下降,第13d基本消失,并持续到第16d,从21dTNF浕活性又开始回升,第46d时达到最高峰,以后缓慢下降。感染鸡脾脏TNF浕活性的变化规律与外周血基本一致,感染后第2d起在脾脏测出少量TNF浕,第7d出现小峰值,以后下降到基本消失,从第21d起重新测出TNF浕,并逐渐上升,在36d到56d持续在较高的水平。病理组织学观察证实,FAV_Hb感染后,除肝脏和淋巴组织的损伤性变化外,从第1d到第56d,感染雏鸡肝脏的窦壁细胞,脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体的网状细胞表现出不同程度的活化增生,其增生程度与外周血和脾脏TNF浕活性基本一致?Π甯窝字琢龌邓酪蜃?浕动态变化的研究表明,FAV_Hb感染后,雏鸡体内TNF浕的消长规律与病变的发生发展有较明显的相关性。; 王凤龙赵满达; 关键词：鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子Α 活性检测

鸡肿瘤坏死因子α基因片段的分子克隆及序列测定被引量：1: 2004年; 应用LPS诱生的鸡培养白细胞提取总RNA,参考几种动物的TNFα保守序列设计一对引物,以提取的培养白细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增目的基因片段,将PCR产物与PUC19连接,转化到大肠杆菌DH52进行分子克隆,对提取的重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定,表明重组的基因片段是目的基因片段,其长度为576bp。; 王凤龙葛金英; 关键词：肿瘤坏死因子多聚酶链反应分子克隆

鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其原位杂交的应用被引量：4: 2003年; 用限制酶HindⅢ和Ecorl双切鸡包涵体肝炎六邻体蛋白基因片段重组质粒 ,得到大小 6 36bp的基因片段 ,用地高辛标记制备DNA探针 ,其灵敏度为 0 .1～ 0 .3ng/ μL。用该探针对感染鸡包涵体肝炎病毒的雏鸡肝组织进行原位杂交 ,结果表明病毒经口感染后 12h肝细胞内出现病毒的复制 ,3～ 7d时病毒复制明显 ,9～ 16d病毒复制减弱。原位杂交表明鸡包涵体肝炎病毒主要定位于核内 ,同时也可进入胞浆中。地高辛标记鸡包涵体肝炎病毒DNA探针对检测该病毒DNA的灵敏度高 ,特异性强 ,操作方便 ,该探针可用于本病的分子病理学研究和特异性诊断。; 王凤龙葛金英郝先谱刘月焕; 关键词：包涵体肝炎 DNA探针核酸原位杂交

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国家自然科学基金(39760061)