国家自然科学基金(81171710)
- 作品数:5 被引量:19H指数:3
- 相关作者:李子卿盛璞义余世明张阳春王海兴更多>>
- 相关机构:中山大学附属第一医院中山大学名古屋大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法被引量:3
- 2012年
- 背景:甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物。目的:建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法。方法:将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异。结果与结论:柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液比单纯高温修复10~20min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10mg/L)能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本。进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团。提示柠檬酸高温修复15min后滴加抗原修复液,选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量。
- 侯昌禾张阳春余世明李子卿翟齐毅张紫机盛璞义
- 关键词:石蜡包埋甲醛固定免疫荧光免疫病理标本
- 偏心髋臼旋转截骨术后的全髋关节置换术被引量:3
- 2016年
- 【目的】回顾性分析偏心髋臼旋转截骨术(ERAO)治疗后的成人髋关节发育不良(DDH)患者再次行人工全髋关节置换术(THA)的方法和手术疗效。【方法】对2002年11月至2014年6月在日本名古屋大学医学院附属医院接受THA术的24例DDH患者。这些患者均曾应用ERAO术进行治疗,术后随访或间隔102~269(197.9±51.48)个月后,再次进行THA术。24例患者(25髋),其中男6例,女18例,平均年龄59.4岁,其中3例取下股骨头进行大块骨移植,塑形与髋臼上缘匹配后,进行松质骨螺钉固定,7例予以少量小碎骨打压植骨。术后严格随访,临床评估以Harris评分为标准。影像学评估则通过拍摄术前与术后骨盆前后位,患髋正侧位,观察假体位置、Sharp角等以及有无假体松动、脱位,感染,神经血管损伤等并发症。【结果】本组病例平均随访时间12~145(93.7±24.38)个月。术后无假体松动、脱位,感染,神经血管损伤等并发症。Harris评分由THA术前(52.1±9.3)分提高至(85.5±6.9)分,有显著性差异(P〈0.001);ERAO术前sharp角为47~58(54.4±3.7)°,ERAO改善为(44.9±2.8)°(P〈0.05),到THA术前sharp角平均为(45.8±2.3)°,术后为(32.5±3.1)°,与THA术前比较改善明显(P〈0.05)。【结论】ERAO大大矫正了DDH患者髋臼畸形程度,增大了股骨头的覆盖面并纠正了异常的受力模式,延缓了股骨头坏死及骨性关节炎的进展。对其再次行THA术,术中大多无需骨块移植,术后康复时间短,疗效满意。
- 张阳春余世明黄少华長谷川幸治関泰輔詹科徐掭发盛璞义
- 晚期糖基化终末产物可影响破骨细胞的骨吸收功能被引量:7
- 2016年
- 背景:晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响存在争议,既往多数研究认为其可促进骨吸收,然而另有研究表明其对骨吸收可能呈现抑制效果,但具体机制不清。目的:探究晚期糖基化终末产物对破骨细胞溶解无机骨基质和降解有机骨成分能力的影响及其产生机制。方法:以RANKL对破骨前体细胞RAW 264.7进行定向诱导,在诱导同时加入50-400 mg/L的晚期糖基化终末产物或100 mg/L的牛血清白蛋白,通过观察骨吸收板上溶解坑面积及组织蛋白酶K的表达情况来评估晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响;并进一步计数抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数量、计算破骨细胞所含细胞核的数量和检测整合素ανβ3的表达情况。结果与结论:(1)晚期糖基化终末产物组的吸收坑面积和组织蛋白酶K表达量较正常破骨细胞诱导组显著减少,且抑制程度随晚期糖基化终末产物浓度的增高而加重;(2)抗酒石酸酸性磷酸酶染色亦显示抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数量随晚期糖基化终末产物浓度的增高而显著下降,所含细胞核数量亦减少;(3)实时定量PCR发现整合素ανβ3表达水平随晚期糖基化终末产物作用时间的延长而显著下降;(4)综上结果表明,晚期糖基化终末产物可全面抑制破骨细胞对无机及有机骨基质的吸收功能,其机制可能与晚期糖基化终末产物抑制破骨前体细胞的定向分化、细胞融合及减弱破骨细胞的迁移黏附作用有关。
- 李子卿王海兴何沛恒罗国填肖胤勃黄帅李兴盛璞义李朝红徐栋梁
- 关键词:破骨细胞骨细胞晚期糖基化终末产物骨吸收功能抗酒石酸酸性磷酸酶组织蛋白酶K
- 偏心髋臼旋转截骨术的生物力学机制及初步临床疗效被引量:3
- 2015年
- 目的 探讨偏心髋臼旋转截骨术治疗髋关节发育不良的生物力学机制及其初步临床疗效.方法 取6具经福尔马林防腐处理的女性尸体骨盆标本,建立髋关节生物力学模型,在模型上模拟偏心髋臼旋转截骨术.对骨盆缓慢施加连续纵向压力0~500 N,测量术前和术后载荷100、200、300、400、500 N时的股骨头承重区应变值,计算应力值.2007年7月至2014年10月应用偏心髋臼旋转截骨术治疗髋关节发育不良25例(26髋),男6例,女19例;年龄11~57岁,平均31岁.术后以Harris髋关节评分评价髋关节功能,摄骨盆正位X线片测量头臼指数、中心边缘角(center-edge angle,CE角)及Sharp角.结果 随着脊柱纵向压力加大,股骨头上的应力值随之增加.偏心髋臼旋转截骨术后应力值在载荷超过300 N后由上升趋势转变为下降趋势,总体呈抛物线状.100~500 N载荷下偏心髋臼旋转截骨术后的应力值与术前差异均无统计学意义.临床随访18例(19髋),随访率72%.随访时间7~85个月,平均40个月.Harris髋关节评分由术前(64.3±7.2)分提高至末次随访时(85.6±5.3)分;头臼指数平均增加36.5%、CE角平均增加33.1°、Sharp角平均减少12.3°,与术前比较差异均有统计学意义.结论 偏心髋臼旋转截骨术具有较好的矫正髋臼畸形的能力,可增大股骨头的髋臼覆盖面和降低承重区压力.
- 盛璞义李子卿杨兴王海兴罗国填傅明余世明张阳春陈蔚深
- 关键词:髋脱位先天性截骨术髋臼生物力学
- 辛伐他汀抑制机械牵张力介导的巨噬细胞活性氧族元素的表达被引量:3
- 2016年
- 目的探讨机械牵张力刺激能否介导小鼠巨噬细胞活性氧族元素(ROS)的产生,并进一步探讨辛伐他汀对此作用的影响及其作用机制。方法体外常规培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,施加机械力刺激,或用辛伐他汀预处理细胞60 min后再施加此刺激,用荧光探针H2DCFDA检测巨噬细胞ROS的表达水平,以细胞免疫荧光定量阳性率和SPSS统计软件对其表达水平进行分析。Western blot检测NADPH氧化酶1(NOX1)的表达。结果机械牵张力刺激介导的巨噬细胞ROS呈时间依赖性增多,以60 min最显著(P<0.05);辛伐他汀可抑制此刺激介导的巨噬细胞ROS表达增加,且抑制作用呈浓度依赖增强,以0.3μmol/L辛伐他汀的抑制作用最显著(P<0.05)。辛伐他汀可使机械牵张力介导的巨噬细胞NOX1表达显著减少。结论辛伐他汀可通过抑制NOX1的表达从而抑制由机械牵张力介导的小鼠巨噬细胞ROS的表达。
- 裴婷周玉环刘科峰李子卿刘树迎平苏宁王晶晶汪泓李朝红
- 关键词:辛伐他汀机械牵张力巨噬细胞