国家科技重大专项(2009ZX08011-004B)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:邹泽红何颖黄于艺刘雪婷陈惠芳更多>>
- 相关机构:广州医学院第二附属医院暨南大学中山大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:机械工程医药卫生农业科学更多>>
- 苏云金芽孢杆菌Cry2Aa蛋白的体外表达及纯化
- 2013年
- 根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,Western blot鉴定回收产物。结果表明,IPTG浓度为0.50 mmol/L、27℃诱导4 h时Cry2Aa蛋白表达量最高,SDS-PAGE胶回收Cry2Aa纯化蛋白所得的产量高于亲和层析法。
- 高洁荣何颖邹泽红艾云灿
- 关键词:纯化
- 重组低过敏原性粉尘螨过敏原的表达及鉴定被引量:2
- 2010年
- 目的:重组表达粉尘螨的低过敏原性过敏原,为安全高效的脱敏治疗服务。方法:通过大肠杆菌表达含前肽序列的粉尘螨过敏原ProDerf1,通过一系列纯化步骤后,基于过敏病例血清采用ELISA方法比较重组过敏原和天然Derf1的IgE结合活性,以判断其过敏原性强弱。结果:在大肠杆菌高效表达了ProDerf1并获得了大量纯化蛋白,结合试验结果显示重组ProDerf1的IgE结合活性显著降低,显示低过敏原性。结论:经过透析及纯化等步骤后得到的重组粉尘螨过敏原ProDerf1较天然Derf1的过敏原性低,可应用于易于标准化的安全高效的脱敏治疗制剂。
- 李辉严马三梅邹泽红王永飞陶爱林
- 关键词:纯化