河北省自然科学基金(C2006000707)
- 作品数：18 被引量：101H指数：7
- 相关作者：宋水山黄媛媛张霞边子睿邱健更多>>
- 相关机构：河北省科学院河北省生物研究所河北工业大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 细菌群体感应参与铜绿假单胞菌胞内聚羟基脂肪酸酯合成的调控被引量：3
- 2011年
- 群体感应是细菌根据细胞密度变化调控基因表达的一种调节机制。铜绿假单胞菌中QS系统由lasI和rhlI合成的信号分子3OC12-HSL和C4-HSL以及各自的受体蛋白LasR、RhlR组成,它们以级联方式调控多个基因表达。【目的】研究细菌群体感应(QS)对聚羟基脂肪酸酯合成的调控。【方法】利用铜绿假单胞菌PAO1及其QS突变株为材料通过气相色谱、荧光定量PCR在生理和分子水平上研究QS对聚羟基脂肪酸酯合成的调控。【结果】QS信号分子合成抑制剂阿奇霉素处理铜绿假单胞菌PAO1和QS突变株导致胞内PHA积累量显著减少;铜绿假单胞菌PAO1中C4-HSL合成酶基因rhlI缺失突变株PAO210胞内PHA积累量与野生型无差别;而3OC12-HSL合成酶基因lasI缺失突变株PAO55、3OC12-HSL受体合成酶基因lasR缺失突变株PAO56以及lasI/lasR双缺失突变株PAO57胞内PHA含量与野生型相比明显减少;lasI和lasR的突变株体内PHA合成酶基因phaC1的表达量显著降低,信号分子3OC12-HSL回补实验使phaC1的表达量可恢复到野生株水平,但只可部分恢复lasI缺失导致的胞内PHA合成。【结论】由此推测,铜绿假单胞菌群体感应系统中lasI/lasR系统参与胞内聚羟基脂肪酸酯合成的调控。
- 徐操李曼黄媛媛张哲边子睿宋水山
- 关键词：铜绿假单胞菌细菌群体感应聚羟基脂肪酸酯
- 细菌群体感应及其干扰策略的研究进展被引量：4
- 2010年
- 群体感应(QS)广泛存在于细菌中,是细菌根据细胞密度变化调控基因表达的一种机制。许多植物病原菌依赖QS调控致病基因和毒性因子的表达,导致植物发病,因此通过抑制QS效应就为控制细菌病害提供了一种有效的方法。目前发现许多途径可以干扰细菌的QS,如:产生可使信号分子降解的酶,产生病原菌信号分子的类似物与信号分子受体蛋白竞争结合来阻断病原菌的群体感应,利用QS中信号分子来诱发寄主抗性。系统阐述了细菌QS及其干扰策略。
- 罗利龙娄瑞娟邱健宋水山
- 关键词：细菌
- aiiA基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达被引量：11
- 2010年
- 构建携带N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)的重组毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-aiiA,采用电转化方法转入毕赤酵母GS115,经营养缺陷型培养基、表型鉴定和高G418浓度筛选获得高拷贝表达盒的酵母转化子,用0.5%甲醇诱导表达,RT-PCR鉴定可检测到重组酵母中编码目的基因成熟肽的mRNA,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,aiiA基因在毕赤酵母中成功表达,用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有降解N-酰基高丝氨酸内酯的活性。
- 娄瑞娟张霞罗利龙徐操宋水山
- 关键词：AIIA基因毕赤酵母基因表达
- 巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望被引量：21
- 2010年
- 巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能影响巴斯德毕赤酵母表达系统的相关因素,这些因素包括外源基因的特性、基因拷贝数、产物稳定性及发酵策略等,结合这些因素和具体实践经验,就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量进行了阐述;讨论了该表达系统存在的不足之处并且展望了其发展前景。
- 娄瑞娟罗利龙张霞张瑞刚宋水山
- 关键词：巴斯德毕赤酵母外源基因
- 3-羰基辛酰基高丝氨酸内酯诱导拟南芥根细胞Ca^(2+)内流被引量：7
- 2011年
- N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性细菌群体感应系统(QS)中的胞间通讯信号分子。近年的研究表明AHLs可以调控植物生长发育及防卫反应,但其调控机制尚不清楚。本研究以拟南芥为材料,采用3-羰基辛酰基高丝氨酸内酯(3OC8-HSL)处理转水母发光蛋白基因的拟南芥幼根细胞,利用冷光仪检测3OC8-HSL对拟南芥根细胞中胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]cyt)变化的影响,同时采用Ca2+专一性螯合剂EGTA和Ca2+通道抑制剂预处理转基因拟南芥根细胞,用全细胞膜片钳技术分析3OC8-HSL诱导拟南芥根细胞中[Ca2+]cyt升高的Ca2+来源。结果表明,3OC8-HSL可诱导拟南芥根细胞中[Ca2+]cyt瞬时升高。这种诱导效应可被EGTA、异搏定(verapamil)、LaCl3所抑制,但LiCl预处理对这种诱导效应无影响。膜片钳分析结果显示,3OC8-HSL可激活质膜Ca2+通道,增加胞外Ca2+内流。说明细菌AHLs可诱导植物Ca2+信号产生,且这种Ca2+信号主要源于胞外Ca2+内流,暗示Ca2+信使系统参与植物对细菌QS信号的响应。
- 张哲张霞边子睿宋水山
- 关键词：N-酰基高丝氨酸内酯钙信使拟南芥
- 细菌群体感应的蛋白质组学研究进展被引量：2
- 2012年
- 细菌群体感应是指细菌能合成、释放和感应一些类激素小分子信号,从而调控群体行为并对其作出应答反应。介导细菌群体感应的信号分子有多种,它们参与调节细菌许多重要生物学功能。目前对此研究的主要手段是基因组学和转录组学。然而近年来,基因组测序技术的不断发展为另一种新兴方法——以比较和功能性为基础的蛋白质组学法奠定了基础。所不同的是,传统方法只能局限性研究某些基因或蛋白,而蛋白质组学法能检测出生物体基因表达的全部蛋白,它也因此逐渐受到人们的广泛关注。主要从研究较多的三类信号分子方面描述如何利用蛋白质组学法解析细菌交流的"语言"。
- 苗春娟刘方贾振华金国萍马宏宋水山
- 关键词：细菌信号转导蛋白质组学
- 大白菜软腐病发生原因及其防治方法被引量：3
- 2008年
- 大白菜软腐病是大白菜细菌性病害中最严重的一种,作者简要介绍了我国大白菜软腐病的病原菌、病害特征以及对病害的防治方法。利用现代基因技术手段人为的操纵细菌群体感应系统,将会成为提高植物抗病性的新方法、新途径。
- 黄媛媛
- 关键词：大白菜软腐病基因工程
- 细菌群体感应信号分子——酰基高丝氨酸内酯的检测被引量：6
- 2007年
- 革兰氏阴性菌根据信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)的浓度可以监测周围环境中自身或其他细菌的数量变化,当信号分子达到一定浓度阈值时,能启动相关基因的表达来适应环境的变化,这一调控系统被称为细菌的群体感应(quorumsensing,QS)系统。快速简便而有效地检测细菌是否以及产生何种信号分子成为深入研究和了解细菌群体感应的重要手段。现对信号分子AHLs敏感的用于检测不同的信号分子AHLs的微生物传感菌进行综述,并对其检测能力进行了讨论。
- 宋水山黄媛媛
- 关键词：N-酰基高丝氨酸内酯信号分子
- 酰基高丝氨酸内酯——细菌与真核生物之间信息交流的介导分子被引量：15
- 2006年
- 许多革兰氏阴性细菌利用酰基高丝氨酸内酯(AHLs)作为胞间信号分子协调细菌群体基因的表达,这一AHLs介导的细菌群体感应系统参与细菌多种生理行为和生物学功能的调控．近年来人们研究发现细菌AHLs也能够影响真核基因的表达,真核生物反过来也可能会通过产生AHL类似物或AHL信号通路中的激活剂或拮抗剂与细菌群体感应系统发生相互作用,意味着细菌和真核生物利用酰基高丝氨酸内酯进行某种形式的信息交流．文中介绍了上述各方面的研究进展．
- 宋水山
- 关键词：群体感应系统酰基高丝氨酸内酯
- N-己酰高丝氨酸内酯对马铃薯生长及抗软腐病能力的影响被引量：3
- 2010年
- [目的]研究细菌个体间通讯信号N己-酰高丝氨酸内酯(C6-HSL)是否可以影响植物的生长和抗病能力。[方法]以马铃薯脱毒苗为试验材料,C6-HSL为诱导剂研究了经不同浓度C6-HSL处理后,马铃薯生长、抵抗胡萝卜软腐欧文氏菌浸染的情况,特别研究了C6-HSL对植株标志性防御酶活性和H2O2含量的影响。[结果]不同浓度的C6-HSL能明显抑制马铃薯的出根率和生根数,而对株高、茎节数及叶片大小没有影响;植物标志性防御酶类中POD和SOD的活性以及H2O2的产生量经C6-HSL诱导后显著提高,而PAL和PPO的活性则没有明显变化;抗病试验中,经C6-HSL诱导的马铃薯植株能有效抑制胡萝卜软腐欧文氏菌的侵染,发病率明显低于对照组。[结论]细菌AHL有可能成为一种新的植物抗病激活剂。
- 黄媛媛邱健马宏苏浴源宋聪宋水山
- 关键词：马铃薯防御酶
