国家自然科学基金(81171603)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：夏超明王瑜许静王言言赵波更多>>
- 相关机构：苏州大学安徽理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 可诱导共刺激分子/可诱导共刺激分子配体信号通路对血吸虫肝纤维化的影响被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨可诱导共刺激分子（ICOS）/可诱导共刺激分子配体（ICOSL）信号通路对日本血吸虫病所致肝纤维化的影响.方法 建立ICOSL基因敲除（ICOSL-KO）日本血吸虫病小鼠模型78只和野生型C57BL/6J日本血吸虫病小鼠模型77只,分别于感染前（0周）及感染后4、7、12、16和20周采集小鼠血清,应用ELISA法检测血清中透明质酸（HA）和羟脯氨酸（HYP）的含量.应用免疫组织化学法检测小鼠肝脏中TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（Collagen-Ⅰ）水平.分别应用HE染色法和胶原纤维Masson染色法动态观察感染小鼠肝脏内虫卵肉芽肿病变及纤维化程度.组间计量资料比较采用t检验,组间率的比较采用x2检验.结果 小鼠感染日本血吸虫后,随着时间的延长,其血清中HA、HYP水平逐渐升高.在感染后7、12、16和20周,ICOSL-KO小鼠血清HA水平均低于野生型小鼠[（161.32±15.44）比（186.01±21.24） ng/mL,t=2.528 2,P＜0.05;（166.73±18.18）比（231.39±20.12） ng/mL,t=4.342 4,P＜0.05;（193.58±21.06）比（252.51±25.29） ng/mL,t=4.003 9,P＜0.05;（253.98±24.53）比（310.88±23.86） ng/mL,t=3.718 0,P＜0.05].而ICOSL-KO小鼠的血清HYP水平则在感染后12、16和20周均低于野生型小鼠,两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）.免疫组织化学检查结果显示,ICOSL-KO小鼠于感染后7～20周肝脏TGF-β1、α-SMA和Collagen-Ⅰ蛋白表达水平皆显著低于野生型小鼠（均P＜0.05）.肝组织HE染色结果显示,ICOSL-KO小鼠的肝脏虫卵肉芽肿体积小于野生型C57BL/6J小鼠（均P＜0.01）.Masson染色结果显示,ICOSL-KO小鼠肝纤维化程度显著低于野生型小鼠,两组纤维化程度评分的差异有统计学意义（均P＜0.05）.野生型C57BL/6J小鼠死亡率高于ICOSL-KO小鼠,在感染后20周,两组病死率的差异有统计学意义（55.84％比37.18％,x2=5.427,P＜0.05）.结论 感染日本血吸虫的ICOSL-KO小鼠肝纤�
- 王瑜夏超明
- 关键词：转化生长因子Β1肝硬化
- ICOS信号对感染日本血吸虫小鼠CD154/CD40表达的影响
- 2015年
- 目的探讨可诱导共刺激分子(Inducible costimulator,ICOS)信号对感染日本血吸虫小鼠的CD154/CD40表达及免疫病理的影响。方法建立ICOS转基因(ICOS transgenic,ICOS-Tg)小鼠及野生型FVB/NJ小鼠日本血吸虫病模型,应用流式细胞术、免疫组化技术分别检测感染前后的小鼠脾淋巴细胞与肝脏虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40表达水平。应用HE染色法观察小鼠肝脏虫卵肉芽肿病变动态变化。结果与野生型FVB/NJ小鼠相比,ICOS-Tg小鼠脾淋巴细胞CD154、CD40表达水平升高,在感染后12、16周差异有统计学意义(P均<0.05);ICOS-Tg小鼠肝脏虫卵肉芽肿炎性浸润细胞CD154、CD40表达亦显著升高,在感染后7、12、16、20周差异有统计学意义(P均<0.05)。且ICOS-Tg小鼠肝脏虫卵肉芽肿体积显著大于野生型小鼠(P<0.01或0.05)。结论在日本血吸虫感染中,ICOS信号对CD154/CD40表达具有一定的调控作用,在免疫病理中起重要调控作用。
- 王瑜蔡茹夏超明
- 关键词：日本血吸虫虫卵肉芽肿
- 日本血吸虫感染可诱导共刺激分子配体基因敲除小鼠CD154和CD40动态变化及对Th1/Th2偏移的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体(ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响。方法:建立ICOSL基因敲除(ICOSL knockout,ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠感染日本血吸虫疾病模型,于感染前和感染后4、7、12、16、20周,应用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测小鼠脾细胞与肝虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40的水平;应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脾细胞经可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导72 h后培养的上清液中γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平及小鼠血清中SEA特异性抗体Ig G、Ig G1、Ig G2a的水平;应用HE染色观察小鼠肝虫卵肉芽肿病变动态变化。结果:感染后4、7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠脾细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,显著降低[CD154为(18.62±4.76)%vs.(27.91±3.94)%、(22.44±4.67)%vs.(40.86±5.21)%、(25.50±6.81)%vs.(43.81±8.41)%、(20.22±5.28)%vs.(40.95±7.34)%、(17.87±4.59)%vs.(33.16±6.31)%,皆P<0.01;CD40为(19.43±3.26)%vs.(24.37±3.59)%、(23.00±4.47)%vs.(31.80±5.86)%、(24.46±5.01)%vs.(35.85±5.32)%、(23.42±4.69)%vs.(33.30±6.14)%、(22.85±3.78)%vs.(30.88±5.94)%,皆P<0.05]。感染后7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠肝虫卵肉芽肿炎性浸润细胞CD154、CD40水平与野生型小鼠相比,亦显著降低[CD154为(0.319±0.066)vs.(0.488±0.086)、(0.389±0.067)vs.(0.596±0.082)、(0.378±0.064)vs.(0.543±0.072)、(0.348±0.069)vs.(0.523±0.076),皆P<0.01;CD40为(0.398±0.066)vs.(0.546±0.079)、(0.461±0.085)vs.(0.618±0.076)、(0.453±0.087)vs.(0.587±0.074)、(0.449±0.065)vs.(0.565±0.082),皆P<0.05]。感染后,ICOSL-KO小鼠IFN-γ表达显著高于野生型小鼠(P<0.05),而IL-4表达水平则显著低于野生型小鼠(P<0.05),其Th2分化指数亦显著低于野生型小鼠(P<0.01)。ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性�
- 王瑜夏超明
- 关键词：可诱导共刺激分子CD40配体TH1/TH2平衡日本血吸虫
- ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后HSCs活化效应及对肝纤维化的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后原代肝星状细胞（HSCs）的活化效应,探讨ICOSL/ICOS信号介导HSCs活化在血吸虫病肝纤维化形成中的作用.方法 建立ICOS-Tg小鼠及野生型小鼠日本血吸虫模型,通过肝脏酶灌注法和密度梯度离心法分离感染前（0周）和感染后（4～9周）的小鼠原代HSCs,运用台盼蓝拒染法鉴定分离的原代HSCs成活率;应用其在328 nm波长紫外激发光下自发荧光特性以及在肝细胞中其特异性表达神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）鉴定分离的原代HSCs纯度;培养7d后,采用SYBR染料法实时荧光定量PCR检测原代HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA的表达变化.结果 分离的原代HSCs纯度达到90％,其成活率为95％.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中α-SMAmRNA表达水平即HSCs的活化程度在感染后6、9周显著高于同时期野生型小鼠（P＜0.01）.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平亦高于同时期野生型小鼠的水平,特别是在感染后6、9周呈显差异有统计学意义（P＜0.01～0.05）.结论 与野生型小鼠相比,感染日本血吸虫的ICOS-Tg小鼠肝HSCs活化增强,显著上调TGF-β1 mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA的表达,提示在ICOS-Tg小鼠,ICOSL/ICOS信号的增强可明显上调HSCs活化促进肝纤维化的形成.
- 梁松王波许静董兰兰王言言赵波夏超明
- 关键词：日本血吸虫肝星状细胞TGF-Β1肝纤维化
