国家科技重大专项(2008ZX10303)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：郭述良罗永艾彭丽刘平邬亭亭更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分枝杆菌噬菌体Chy2的分离及生物学特性被引量：5
- 2012年
- 目的分离鉴定新分枝杆菌噬菌体并研究其生物学特性。方法以平板法从泥土中分离纯化噬菌体,紫外线诱导法鉴定溶原性,从噬菌斑大小、颗粒形态和限制性内切酶分析三方面比较Chy2、D29、TM4异同;以不同感染复数(MOI)扩增Chy2,测定最佳MOI;通过一步生长实验测出Chy2潜伏期、裂解期和裂解量;采用单斑法测定MOI的裂解谱;检测MOI在不同pH值培养基中裂解耻垢分枝杆菌mc2155的能力。结果成功分离纯化1株分枝杆菌噬菌体,命名为Chy2,其噬菌斑圆形透明,紫外线诱导法处理宿主菌后不能形成噬菌斑,头部呈椭圆形,长尾,基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ及XbaⅠ切开,大小约49 kb,与D29、TM4差异大;Chy2最佳MOI为9.58×10-5;Chy2一步生长周期为270 min,潜伏期210 min,裂解期60 min,裂解量为23;Chy2能裂解耻垢分枝杆菌mc2155、结核菌标准株H37Rv、多数临床耐药株;在7H9固体培养基pH值为5.0和7.4时,Chy2均能裂解耻垢分枝杆菌mc2155。结论 Chy2属长尾噬菌体科,基因组为双链DNA,宽噬谱广,是一种潜在的抗结核药物资源。
- 刘平邬亭亭彭丽郭述良罗永艾
- 关键词：分枝杆菌噬菌体耻垢分枝杆菌结核分枝杆菌生物学特性耐药结核病
- 噬菌体Legendre的生物学特性及抗耐药结核潜力的初步研究被引量：6
- 2012年
- 目的研究噬菌体Legendre的生物学特性并初步探索其用于抗耐药结核的潜力。方法双层平板法制备Legendre的噬菌斑,观察其特点,纯化噬菌体,电镜观察Legendre形态;提取Legendre基因组,限制性内切酶酶切分析确定其核酸类型;以不同感染复数扩增Legendre,找出最佳MOI和最小MOI;通过一步生长实验找出Legendre潜伏期、裂解期和裂解量;纯化Legendre颗粒,免疫家兔,获得抗血清,通过中和反应实验测定Legendre以及其他8种噬菌体和Legendre抗血清之间的吸附反应常数K值;采用单斑法测定Legendre的宿主谱;检测Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度的耐受性。结果 Legendre的噬菌斑圆形透明,边界清楚,Legendre头部呈多面体立体对称,直径平均为65 nm,尾长平均为215 nm;基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRⅠ,HindⅢ及BamHⅠ切开,大小约65 kb;Legendre最佳MOI为10-4,最小MOI为10-3,Legendre对耻垢分枝杆菌极度易感;Legendre感染宿主菌的潜伏期为180 min,裂解期为120 min,裂解量为13;Legendre K值为697,Legendre抗血清对非对应噬菌体的中和活性有差异,对DNAⅢ、Bo4、Clark、Sedge、Leo高,对TM4、D29中和活性较低;Legendre能裂解耻垢分枝杆菌、结核分枝杆菌标准株、多数临床耐药株;Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度均敏感。结论 Legendre属于长尾噬菌体科,双链DNA噬菌体,抗原性低,宿主谱广,具有抗耐药结核潜力。
- 刘平邬亭亭彭丽郭述良罗永艾
- 关键词：LEGENDRE耻垢分枝杆菌生物学特性耐药结核病
- 噬菌体Chy2生物扩增法的建立及其检测效果的评价
- 2013年
- 目的建立噬菌体Chy2生物扩增法,并评价其检测临床痰标本结核分枝杆菌的应用价值。方法噬菌斑测试法观察噬菌体杀灭剂灭活Chy2的工作浓度和作用时间;噬菌斑计数法判断Chy2的最佳感染时间和感染滴度;分别用噬菌体Chy2和D29生物扩增法检测58份临床痰标本,以改良罗氏培养法作诊断标准,对比评价Chy2和D29的检测准确性。结果 6%硫酸亚铁铵溶液作用5 min可彻底灭活游离Chy2;Chy2滴度为2.2×1011CFU/mL时,与结核分枝杆菌孵育4 h的感染效率最高;噬菌体Chy2生物扩增法对痰标本的检测灵敏度、特异性、Youden指数、阳性预测值和阴性预测值分别为94.7%、85.0%、0.797、0.923、0.895,噬菌体D29生物扩增法的检测结果相应为76.3%、95.0%、0.713、0.967、0.678,噬菌体Chy2生物扩增法的灵敏度、阴性预测值优于噬菌体D29生物扩增法(P<0.05),两者特异性、Youden指数、阳性预测值无统计学差异(P>0.05)。结论成功建立了噬菌体Chy2生物扩增法,Chy2较D29检测特异性相当,灵敏度有所提高。
- 敖知郭述良
- 关键词：结核分枝杆菌灵敏度特异性
- 噬菌体疗法治疗大肠埃希菌感染的研究现状及应用前景被引量：7
- 2012年
- 大肠埃希菌（Escherichiacoli）是医院获得性感染常见致病菌，在临床分离的致病菌中仅次于铜绿假单胞菌，排在第2位，主要引起呼吸道、泌尿道、伤口、胆道感染，腹膜炎、败血症及脑膜炎等。近年来细菌流行病学监测结果表明，大肠埃希菌耐药率逐年上升，已成为临床治疗面临的一大难题。
- 刘平邬亭亭彭丽郭述良罗永艾
- 关键词：细菌噬菌体埃希菌属
