辽宁省自然科学基金(20102218)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：沈阳医学院附属中心医院沈阳医学院奉天医院更多>>
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- miR-335靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控被引量：9
- 2013年
- 目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现。方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting分析Sp1 mRNA和蛋白表达的变化;通过MTT法分析MG-63细胞增殖水平。结果:萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-335可特异性结合于Sp1基因的3’-UTR。Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-335可减少Sp1蛋白的表达,但对mRNA表达无显著影响;转染Sp1表达质粒可上调Sp1 mRNA和蛋白表达。MTT结果显示,miR-335可抑制MG-63细胞增殖,转染Sp1表达质粒可部分逆转miR-335对MG-63细胞增殖的抑制作用。结论:miR-335可能通过靶向Sp1基因抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。
- 王勇赵伟
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖
- 川芎嗪对人骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用观察及机制探讨被引量：3
- 2013年
- 目的探讨川芎嗪对人骨肉瘤MG-63细胞生长的抑制作用及可能机制。方法取对数生长期的人骨肉瘤MG-63细胞,随机分为川芎嗪低浓度组、高浓度组和对照组,川芎嗪低浓度组、高浓度组分别予3、30 mg/mL的川芎嗪,对照组加入完全培养液;48 h后采用四氮唑盐比色法检测MG-63细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布;Western blot法检测Bcl-2、CyclinD1及NF-κB p65蛋白表达水平。结果与对照组比较,川芎嗪低浓度组、高浓度组MG-63细胞增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期细胞比例均明显升高,NF-κB p65及其靶基因Bcl-2、CyclinD1蛋白表达水平均明显降低,且川芎嗪高浓度组作用更明显;P均<0.05。结论川芎嗪对体外培养的MG-63细胞有增殖抑制作用,其机制可能与其促进MG-63细胞凋亡、诱导G0/G1期阻滞、抑制NF-κB及其靶基因的蛋白表达有关。
- 王勇赵伟
- 关键词：川芎嗪骨肉瘤核转录因子-ΚB
- β-catenin基因沉默抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖的体外实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:研究siRNA干扰β-catenin对人骨肉瘤U2OS细胞增殖能力的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine 2000将靶向β-catenin的siRNA转染人骨肉瘤U2OS细胞,Western blot技术检测β-catenin基因沉默效果。分别采用CCK-8法和流式细胞学技术检测细胞增殖和周期,Western blot检测cyclin D1的蛋白表达。结果:siRNA干扰有效阻断了人骨肉瘤U2OS细胞的β-catenin表达。β-catenin siRNA转染U2OS细胞48h、72h后,与空白组和阴性对照组相比,细胞增殖能力显著下降,细胞周期明显阻滞于G0/G1期,细胞中cyclin D1蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论:特异性抑制β-catenin基因表达可抑制人骨肉瘤U2OS细胞增殖。
- 王勇赵伟
- 关键词：骨肉瘤Β-CATENIN细胞增殖
