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国家自然科学基金(30700374)
作品数:
2
被引量:2
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相关作者:
谌贻璞
唐功耀
杨敏
王艳艳
谭敏
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相关机构:
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杨敏
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2011
1篇
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脂联素在人肾小球微血管内皮细胞中的表达与调节
被引量:1
2010年
目的探讨人肾小球微血管内皮细胞(HRGEC)是否合成脂联素,及肿瘤坏死因子α(TNF—α)对HRGEC合成脂联素的影响。方法用免疫组织化学染色检测脂联素在人肾组织表达;分别用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测体外培养的原代HRGEC对脂联素mRNA及蛋白的表达,并对PCR产物进行DNA测序鉴定。用TNF-α刺激HRGEC,分别用实时荧光定量PCR和时间分辨荧光法检测HRGEC脂联素mRNA及蛋白表达变化。结果(1)免疫组织化学染色显示人肾小球毛细血管壁脂联素染色强阳性。(2)RT-PCR检测发现原代培养的HRGEC表达脂联素mRNA:PCR产物经DNA测序与基因库中的脂联素DNA序列完全一致;蛋白质印迹检测证实HRGEC培养上清中含有脂联素蛋白。(3)不同浓度TNF—α刺激HRGEC 24h,与未刺激组比较,实时荧光定量PCR显示,250IU/ml和500IU/ml组的脂联素mRNA表达量显著上调(P〈0.05和P〈0.01);时间分辨荧光检测显示,250IU/ml和500IU/ml组的脂联素蛋白含量显著增加(P〈0.05和P〈0.01)。(4)500U/ml浓度TNF-α刺激HRGEC6、12、24和48h,与未刺激组比较,6、12和24h组的脂联素mRNA表达均显著上调(P〈0.05,P〈0.05和P〈0.01);24h和48h组的脂联素蛋白含量显著增加(P〈0.01)。结论HRGEC能合成脂联素,TNF-α可上调HRGEC的脂联素mRNA和蛋白表达。
唐功耀
杨敏
谌贻璞
王艳艳
关键词:
脂联素
肿瘤坏死因子-Α
肾小球
内皮细胞
DNA测序
脂联素拮抗血管紧张素Ⅱ诱导系膜细胞细胞外基质产生
被引量:1
2011年
目的观察脂联素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人。肾小球系膜细胞(MC)表达转化生长因子β1(TGF-β1)及纤连蛋白(FN)的影响,并探讨其信号通路。方法用RT0PCR和间接免疫荧光法对MC表达脂联素受体进行检测;用实时定量PCR和酶联免疫吸附法检测脂联素对AngⅡ诱导MC表达TGF—β1及FN的影响;用Western印迹法测定p-AMPK/AMPK比值。结果(1)MC能表达脂联素受体1和2。(2)10mg/L脂联素可明显抑制AngⅡ诱导MC高表达TGF-β1及FN(均P〈0.05)。(3)10mg/L脂联素可活化MC的AMPK信号通路。(4)40μmol/L Compound C(AMPK阻断剂)可明显减弱脂联素对AngⅡ诱导MC高表达TGF-β1及FN的拮抗作用(均P〈0.05)。结论脂联素可通过活化AMPK对AngⅡ诱导MC高表达TGF一β1及FN发挥抑制作用。
谭敏
谌贻璞
唐功耀
芮宏亮
关键词:
脂联素
转化生长因子Β1
肾小球系膜细胞
纤连蛋白
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