福建省自然科学基金(2012J01147)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 拟穴青蟹ANT2基因的克隆与低温胁迫表达分析被引量：1
- 2014年
- 腺苷酸转移酶(ANT)是线粒体中最丰富的蛋白质之一,其主要作用是介导ADP/ATP在细胞质和线粒体基质之间的运输.为探讨该基因在拟穴青蟹(Scylla paramamosain)低温适应中的作用,采用反转录PCR(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增技术(RACE)等技术,从拟穴青蟹中获得了ANT2的cDNA全长序列,并运用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测了ANT2在不同组织和不同温度下的表达谱.该序列全长1 348bp,开放阅读框(ORF)为930bp,编码309个氨基酸残基.同源分析显示,该蛋白具有3个保守的线粒体跨膜功能结构域,形成能量分子传导转运通道,催化细胞质中ADP和线粒体内ATP的跨膜交换.qPCR结果表明ANT2基因在拟穴青蟹多个组织中均有表达,且表达量不同,表明ANT2基因具有组织表达特异性.第1期仔蟹在10,15,20,25℃不同温度条件下,在1,3,12,24,36h,10和15℃组表达量显著低于20和25℃组(p<0.05);且在1,3,6,12,24h,10℃组的表达量显著低于15℃组表达量(p<0.05).15℃组在48h内,ANT2呈现高低起伏的表达模式.拟穴青蟹第1期仔蟹ANT2基因表达变化,提示该基因与能量代谢功能相关,可能参与拟穴青蟹低温胁迫应答.
- 于坤叶海辉巩杰黄辉洋林思恒
- 关键词：拟穴青蟹低温胁迫
- 拟穴青蟹ANT2基因在不同温度和盐度条件下的应激表达被引量：4
- 2014年
- 采用qRT-PCR技术,对不同温度（10℃,15℃,20℃,25℃）以及低温（10℃,15℃）和盐度（10,35）联合作用下拟穴青蟹（Scylla paramamosain）（甲壳长3.7~5.8 cm,体质量80~100 g） ANT2基因的表达进行了检测。结果表明：在4个温度下肝胰腺、肌肉、鳃中 ANT2基因表达量依次为低、中、高,存在组织表达特异性。随着温度降低, ANT2基因总体上趋低表达,但在15℃时ANT2基因在肌肉（1~12 h）和鳃中均显著高于20℃（ P〈0.05）。该结果提示, ANT2基因与能量代谢相关,且在一定低温下被诱导表达,可能参与低温胁迫的应答。相同低温下,3种组织中ANT2基因在盐度10的表达量通常高于盐度35的（P〈0.05）,说明低温下低盐环境有利于提高青蟹体内代谢,增强耐寒能力。
- 于坤叶海辉黄陈翠巩杰黄辉洋
- 关键词：拟穴青蟹盐度应激实时定量PCR
