上海市科学技术委员会资助项目(08DZ2291500)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：胡忠义王洁陆俊梅丁元生黄晓辰更多>>
- 相关机构：上海市肺科医院苏州大学山西医科大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MPT64抗体的适体在结核病血清学检测中的应用被引量：3
- 2010年
- 目的 利用SELEX技术筛选MPT64抗体的适体建立混合夹心ELISA检测体系,应用于临床血清标本的检测,探讨该方法 潜在的实验室诊断价值.方法 利用竞争ELISA检测方法 ,测定不同浓度的MPT64抗原对最后一轮ssDNA文库与靶物质亲和力的抑制率,选取优势序列且亲和性值较高的适体用于检测,优化混合夹心ELISA检测方法 ,确定MPT64抗体的检测下限和线性范围,同时检测230例临床血清标本.结果 在竞争ELISA结果 中,总反应体系为100μl,MPT64抗原浓度由2μg/ml增加到256 μg/ml时,对ssDNA文库的抑制率也由0.25%增加到80%.优化的混合夹心ELISA的检测体系：ssDNA包被浓度为0.1μg/孔、血清稀释度为1/200、辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体浓度为1/40 000.MPT64抗体的检测下限为3 mg/L,线性范围为10～1000 mg/L.利用该体系检测100例结核病患者、100例健康体检者和30例非结核病患者血清,检测结果 用GraphpadPrism软件进行分析,结核病组与健康体检组、结核病组与非结核疾病对照组差异均具有统计学意义（P〈0.001）.统计学分析得到检测的特异性与敏感性分别为96.1%和31.0%.结论 利用适体建立的混合夹心ELISA用于结核病的血清学诊断具有一定的诊断价值.
- 蔡江丽秦莲花刘忠华王洁胡忠义
- 关键词：SELEX适体SSDNA血清学检测
- 结核分枝杆菌临床分离株药敏结果与耐药程度的关联分析被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨结核分枝杆菌临床分离株对12种抗结核药物的MIC值及其药敏检测结果 与耐药程度的关联规律,从而为临床制定治疗方案提供借鉴依据.方法 采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的MIC检测.对上海市肺科医院2009年1-6月间的163株结核分枝杆菌临床分离株进行RFP、INH、SM、EMB、OFLX、LVFX、MOX、AMK、CPM、PTA、CLA和PAIN的MIC检测和Bactec MGIT快速培养仪药敏检测,并进行MIC与耐药程度的关联性分析.结果 67%（42/62）的SM耐药株MIC≥16 μg/ml,63%（51/81）的INH耐药株MIC≥8 μg/ml,77%（50/65）的RFP耐药株MIC≥8 μg/ml,20%（12/60）的EMB耐药株MIC≥4 μg/ml;43%（25/58）的OFLX耐药株MIC≥8 μg/ml;41%（15/37）的AMK耐药菌株MIC≥16 μg/ml,41%（12/29）的CPM耐药菌株MIC≥4 μg/ml.OFLX耐药株的3个氟喹诺酮类药物的MIC（OFLX、LVFX和MOX的MIC分别为2～128、1～32和0.0625～1 μg/ml）差异有统计学意义（F=16.874,P〈0.01）;SM、INH、RFP、EMB、OFLX、AMK和CPM在任6种及7种药物同时耐药株中的MIC值（分别为0.5～128、2～64、0.25～128、1～32、1～64、0.5～128和1～128μg/ml）明显高于任1种及2种药物耐药菌株的MIC值（MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～32、0.25～2、0.125～2、0.5～4和1～4 μg/ml,F值分别为20.066、40.499、47.197、70.373、91.432、41.840和21.547,P均〈0.05）;SM、INH、RFP、EMB在4种药物同时耐药菌株中MIC值（分别为1～128、2～64、0.25～128和1～32μg/ml）显著高于任1种及2种药物耐药株（MIC值分别为0.25～128、0.0625～64、0.25～64和0.25～2 μg/ml,F值分别为26.242、23.563、31.541和64.469,P均〈0.05）;RFP在MDR酶株的MIC值（2～64 μg/ml）显著高于非MDR的耐药菌株的MIC值（0.25 μg/ml,F=5.613,P〈0.05）.结论 本研究揭示了常用的12种抗结核药物的耐药程度与常规药敏检测结果 之间的关联规律,为临床医生根据常规药敏结果 制定更加有效的抗结核治�
- 崔振玲王洁陆俊梅黄晓辰丁元生胡忠义
- 关键词：微生物敏感性试验抗结核药
- 噬菌体展示技术在结核病研究中的应用被引量：1
- 2009年
- 随着艾滋病患者的增加和MTB耐药菌株的流行与传播，使结核病的诊断和治疗面临更大的挑战。近年来迅速发展的一种体外分子进化技术——噬菌体展示技术在结核病研究中呈现出独持的优势。该技术为目的基因在噬菌体表而的表达产物与亲和选择相结合，其原理是将目的基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白基因编码区，使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面。
- 张丽婷胡忠义李连青杨华
- 关键词：噬菌体展示技术结核病基因编码区蛋白质表达耐药菌株分子进化
