教育部“优秀青年教师资助计划”(1692)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 北野豌豆及其近缘种ISSR反应条件的优化被引量：1
- 2008年
- 采用改进的CTAB法,成功地提取了北野豌豆及其近缘种的基因组DNA,电泳结果显示DNA质量和产量均较高,并以此DNA为模板,对ISSR的反应条件进行了优化,最终确定ISSR的反应体系为:总体积10μl,包括10ng的DNA,1倍的反应缓冲液,1.5mmol.L-1MgCl2,2×10-4mmol.L-1(引物6和引物8)或2×10-3mmol.L-1(引物5,10和12)引物,0.2mmol.L-1dNTP混合物和1.0U的Taq DNA聚合酶.ISSR扩增程序为:先在94℃下变性3min,然后在92℃下变性30s,50℃(引物5,6,10,12)或55.2℃(引物8)下复性30s,72℃下延伸1min,反应30个循环,最后72℃延伸5min.并基于此反应条件,最终筛选出5条ISSR引物用于进一步的研究.
- 韩颖
