南通市科技局社会发展科技计划项目(S5041) 作品数:7 被引量:20 H指数:3 相关作者: 朱俐 吴小梅 杜方 季秋虹 李建成 更多>> 相关机构: 南通大学 更多>> 发文基金: 南通市科技局社会发展科技计划项目 江苏省高校自然科学研究项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
银杏内酯B对培养星形胶质细胞的抗缺血作用及其机制 2006年 目的探讨银杏内酯B(Ginkgolide B,Gin B)对缺血中的星形胶质细胞的作用及其机制。方法以新生小鼠纯化的星形胶质细胞,通过缺血(1%O2)或经Gin B预处理,观察细胞形态,活力的变化;利用Westernblot分析bystin与磷酸化Bad蛋白(phosphorylated-Bad,p-Bad)表达的变化。结果星形胶质细胞在缺血0.5h或3h后,变成有反应性特征的星形胶质细胞,活性增高,bystin、p-Bad表达均增加;缺血24h后,细胞变稀疏,胞体变小,突起减少;活性降低;bystin、p-Bad表达明显减少甚至消失;经过Gin B(120μmol/L)预处理后再进行缺血24h,细胞形态较直接缺血明显改善,细胞活性与bystin、p-Bad的表达量均增加。结论Gin B对缺血星形胶质细胞具有保护作用,其作用机制与刺激bystin生成以及增加p-Bad表达有关。 杜方 吴小梅 朱俐关键词:星形胶质细胞 银杏内酯B 银杏内酯B和低氧预适应对小鼠急性缺氧损伤的保护作用 被引量:5 2009年 目的:通过观察缺氧预适应和银杏内酯B预处理对小鼠急性缺氧的影响,了解银杏内酯B的脑保护作用。方法:采用小鼠常压缺氧模型,观察小鼠的行为学并记录各组小鼠的最后死亡时间,脑组织含水量,用RT-PCR、Western blot分别检测各组小鼠皮层组织中RTP801 mRNA表达和EPO蛋白表达。结果:银杏内酯B和低氧预适应均能明显延长常压缺氧小鼠的存活时间,降低脑水肿程度,并且银杏内酯组和低氧预适应组RTP801 mRNA表达和EPO的表达均明显增加。结论:银杏内酯B与低氧预适应具有相类似的对抗小鼠急性低氧的作用,其脑保护作用与上调RTP801 mRNA和EPO蛋白的表达有关。 骆倩倩 杨俊霞 张晓敏 李洁佳 邵嘉鑫 朱俐关键词:脑缺氧 低氧预适应 缺氧耐受 银杏内酯B 促红细胞生成素 发育及DNA损伤反应调节基因1的研究进展 被引量:1 2007年 发育及DNA损伤反应调节基因1(regulated in development and DNA damage responses 1,REDD1)又称为RTP801,是一个新近发现的低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)靶基因,在细胞和整体动物缺氧缺血模型中其表达显著升高,随着研究的深入,发现其对多种细胞刺激均能产生应激反应,在细胞凋亡过程中发挥着重要的调节作用;RTP801受到多种细胞信号通路的调控,研究其功能和作用机制可为临床缺血性疾病和肿瘤的防治等提供新的思路。 吴小梅 杜方 朱俐关键词:低氧诱导因子-1 细胞凋亡 低氧预适应诱导C6细胞对氧葡萄糖剥夺的耐受 被引量:1 2006年 目的:研究低氧预适应诱导神经胶质细胞瘤细胞(C6 G liom a Cells,简称C6细胞)对氧葡萄糖剥夺(OGD)的耐受及其机制。方法:C6细胞通过低氧(1%)预处理,在经受OGD打击后,观测其对细胞活力的影响。利用W est-ern b lot分析低氧预适应对C6细胞磷酸化-ERK(p-ERK)、缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)和红细胞生成素(EPO)蛋白的影响;通过PD98059和LY294002的使用,分析低氧诱导C6细胞预适应现象与MEK/ERK通路的关系。结果:低氧能诱导细胞预适应的发生,而且对于24 h的OGD,最有效的低氧预适应时间为16 h;低氧能诱导细胞p-ERK信号蛋白的上调,激活H IF-1α和增加EPO的表达,且能被PD98059所抑制。结论:低氧预适应能增强C6细胞对24 hOGD的耐受,产生预保护作用,其中以低氧预适应16 h效率最高;MEK/ERK信号转导途径参与了低氧预适应作用;低氧预适应可通过激活H IF-1α和增加EPO表达水平来实现。 何炜 朱俐 金淑仪关键词:低氧 预适应 MEK/ERK 银杏内酯诱导嗜铬细胞瘤细胞表达低氧诱导因子-1α 被引量:2 2006年 目的研究银杏内酯(ginkgolides,Gin)对神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导分化的嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的影响以及与其相关的信号通路。方法通过MTT比色法观察不同浓度Gin对PC12细胞活性的影响,RT-PCR和Western Blot法分析Gin对PC12细胞低氧诱导因子-1(αhypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达以及MAPK信号通路的影响。结果一定浓度范围的Gin可促进PC12细胞的活性,在37.5 mg.L-1作用24 h效果最明显。37.5 mg.L-1Gin单独处理PC12细胞24 h可诱导HIF-1αmRNA表达增强和蛋白水平上调。Gin还引起p-ERK水平的明显提高。Gin增加PC12细胞HIF-1α蛋白的稳定性存在一定的时间和剂量依赖关系,PD98059可部分抑制Gin的增强作用,金雀异黄素可完全阻断之;与此相对应的是,Gin以时间和剂量依赖方式诱导PC12细胞p-ERK水平的增高,PD98059和金雀异黄素均能完全阻断Gin的诱导作用。结论Gin可诱导PC12细胞表达HIF-1α,主要与MEK-ERK信号通路激活有关,可能是其促进分化的PC12生长的原因。 吴小梅 季秋虹 顾永健 朱俐关键词:银杏内酯 低氧诱导因子-1Α 嗜铬细胞瘤细胞 磷酸化细胞外信号调节激酶 银杏内酯B抗缺血神经元凋亡的预适应作用 被引量:6 2008年 目的研究银杏内酯B(Ginkgolide B,GB)对缺血引起的神经元凋亡的影响,并从预适应角度探讨其可能的机制。方法原代培养的小鼠皮层神经元,经过短时缺血预适应(1%O2,无糖DMEM)或GB预处理(120μmol/L,24h)后,再进行严重缺血损伤,通过MTT比色法观察细胞的活性,Hoechst 33342荧光染色检测细胞的凋亡;Western-blot分析磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)和活化的Caspase-3蛋白表达量的变化。结果神经元缺血后活性下降,凋亡比率增高;缺血预适应或银杏内酯B预处理可提高缺血神经元p-GSK-3β的表达,抑制Caspase-3的活化,提高缺血神经元的活性,降低凋亡比率。结论银杏内酯B对缺血诱导的神经元凋亡具有拮抗作用,其作用机制与缺血预适应相似,两者均能提高p-GSK-3β的表达,抑制Caspase-3的活化,银杏内酯B对神经元可发挥药理性预适应作用。 季秋虹 吴小梅 李建成 朱俐关键词:银杏内酯B 缺血预适应 神经元 缺血 凋亡 小鼠大脑皮层星形胶质细胞不同体外培养方法的比较 被引量:5 2006年 目的:比较离体纯化和培养星形胶质细胞的不同方法,旨在获得高纯度的星形胶质细胞,为进一步研究奠定基础。方法::用原代培养、传代纯化和一次或两次振荡纯化的方法培养星形胶质细胞。结果:原代培养的星形胶质细胞纯度不高;经传代纯化培养后纯度达到99%以上,bystin表达量较少,且能经短时间模拟缺血诱导活性明显增高;经振荡纯化后bystin表达量明显增多,GFAP免疫荧光变亮,能耐受长时间模拟缺血,提示经振荡后星形胶质细胞已经处于“活化”阶段。结论:经过传代纯化的星形胶质细胞纯度最高,可以经模拟缺血诱导成反应性星形胶质细胞,因此能更好地反映其在脑中的功能,是研究星形胶质细胞在脑中的功能和反应性星形胶质细胞较好的培养方法。 杜方 吴小梅 朱俐关键词:星形胶质细胞 离体培养 反应性星形胶质细胞