国家自然科学基金(30672077)
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- Notch信号转导通路分子在MSC诱导分化为心肌细胞过程中的表达变化
- 目的了解 Notch 信号转导通路在 MSC 诱导分化为心肌细胞过程中可能的作用。检测诱导 MSC 分化为心肌细胞前后不同时间 Notch 信号转导通路分子的表达水平。方法利用乳鼠心肌细胞非接触共培养法诱导 MSCs 向...
- 单志新林秋雄李晓红邓春玉杨敏林曙光余细勇
- 关键词：心肌细胞MSC
- 文献传递
- AngⅡ通过AP-1调控内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达被引量：1
- 2010年
- 目的明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子。方法构建长度依次递减的MIF基因5’调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926。利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5’调控区不同区段的转录活性。通过突变转录活性高的MIF5’调控区序列,初步确定可能的转录因子结合序列。设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平。结果双荧光基因报告检测显示,AngⅡ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间。序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5’调控区-350至-339间的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性。AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIFmRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05)。结论AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达。
- 冯治宽单志新林秋雄朱杰宁麦丽萍谭虹虹邓春玉邝素娟余细勇
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子
- 异丙酚对人心房肌细胞瞬时外向整流钾电流的影响
- 2009年
- 目的 探讨异丙酚对人心房肌细胞瞬时外向整流钾电流（Ⅰto）的影响。方法体外循环下行冠状动脉旁路移植术患者，术中于上腔静脉插管前取下右心耳组织，采用急性两步酶解法消化分离成单个心房肌细胞，室温下进行膜片钳全细胞模式记录Ⅰto记录不同浓度（25、50、100、150、200μmol／L）异丙酚在＋50mv钳制电压下Ⅰto的变化，并记录50μmol／L异丙酚对Ⅰto激活、失活、失活后再激活动力学的影响。结果与给药前相比，50、100、150、200μmol／L异丙酚呈浓度依赖性地抑制Ⅰto峰电流密度（P〈0．05）。给药前、后半数激活电压和斜率因子、半数失活电压和斜率因子、时间常数比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论异丙酚可呈浓度依赖性地抑制人心房肌细胞Ⅰto产生负性肌力作用，可能是其抗心律失常作用的重要机制之一。
- 邝素娟邓春玉刘宇斌饶芳王春晓单志新李晓红林秋雄杨敏吴书林余细勇
- 关键词：二异丙酚肌细胞心脏钾通道
- 微环境预处理的骨髓间充质干细胞治疗大鼠心肌梗死被引量：2
- 2009年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）或经预处理分化的BMSC（induced BMSC，iBMSC）移植能否改善心肌梗死大鼠的心功能。方法雄性sD大鼠32只（250—300g），分为假手术组、磷酸缓冲液（PBS）注射组、BMSC移植组和iBMSC移植组共4组，每组8只。将分离的BMSC与心肌细胞（微环境）共培养2周进行预分化，大鼠心肌梗死模型建立1周后，将BMSC或iBMSC细胞悬液注入梗死区的边缘位置。分别于细胞移植后的第1、2和4周，超声心动图检测各组大鼠心脏的左心室射血分数（LVEF），左心室舒张末期内径（LVIDd），左心室收缩末期内径（LVIDs）及短轴缩短率（FS）。移植后第4周进行组织学观察，心脏组织石蜡包埋切片后采用免疫荧光技术检测移植细胞的示踪标记物及心肌标志蛋白的表达情况。结果iBMSC组LVEF在第4周时是（77．3±2．6）％，与假手术组（81．8±3．6）％比较差异无统计学意义（P〉0．05），而PBS组及BMSC组的LVEF值均低于假手术组（P均〈0．05）。PBS组FS移植前后没明显变化，iBMSC组FS从移植前的（24．1±3．9）％上升到第4周的（45．1±3．1）％。M型超声心电图显示iBMSC治疗组左心室收缩能力较细胞移植前明显改善。免疫荧光分析显示，SPIO标记的移植细胞在体内表达心肌细胞标志蛋白α-辅肌动蛋白和缝隙连接蛋白43。结论经过微环境预处理的BMSC较未处理的干细胞改善心功能效果更好。这一研究为干细胞的改造与细胞移植修复心肌梗死提供了强有力的证据。
- 李晓红符永恒刘再毅张光峰董光富林秋雄余细勇
- 关键词：心肌梗死间质干细胞移植细胞分化
- BMSCs作为心肌组织工程种子细胞的分子药理学研究
- 目的探讨体外诱导 BMSCs 分化为心肌细胞的潜能,创新性模拟心肌细胞的微环境, 研究在与心肌细胞非直接接触的环境下 BMSCs 向心肌细胞表型分化的能力,并对其分化机制的进行初步探讨,为心肌细胞组织工程提供实验依据。方...
- 余细勇
- 关键词：BMSCS心肌细胞
- 文献传递
- Glucose通过SRF调控心肌细胞H9C2中microRNA-1(miR-1)的表达
- 目的:微小RNA(miRNA)可以在转录后水平抑制目的基因的表达,参与多种生物学和病理生理学过程。糖尿病患者血中高浓度的葡萄糖(Glucose)能引发心血管系统损伤,在此过程中,心肌细胞中miRNA表达谱和表达水平发生改...
- 单志新林秋雄杨敏邓春玉朱杰宁麦丽萍陈红梅邝素娟符永恒林曙光余细勇
- 文献传递
- 肺动脉平滑肌细胞钾电流记录方法的建立
- 2009年
- 目的在肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)上建立钙离子激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)电流、电压门控钾通道(voltage-gated potassium channel,KV)电流和内向整流钾通道(Inward rectifier channel,Kir)电流的记录方法。方法用急性酶解的方法分离出单个大鼠PASMC,利用全细胞膜片钳方法记录钾电流。结果①急性酶解分离得到高质量的单个大鼠PASMC,呈梭形,边界清楚,胞浆均匀透亮。②KV电流可以被5mmol/L4-AP明显抑制,使电流-电压关系曲线明显下移,在55mV时,KV电流密度从(133.86±7.36)pA/pF减少到(59.09±3.35)pA/pF(n=6,P<0.05)。③1mmol/L TEA对KCa电流有明显抑制作用,使电流-电压关系曲线明显下移,在55mV时,KCa电流密度从(9.03±1.42)pA/pF减少到(2.12±0.52)pA/pF(n=7,P<0.05)。④KATP电流可以被10μmol/L尼可地尔激活,使电流-电压关系曲线明显上移,在50mV时,Kv电流密度从(29.08±5.90)pA/pF增加到(88.90±7.98)pA/pF(n=10,P<0.05)。结论在肺动脉平滑肌细胞上成功地建立了KCa、KV和Kir电流的记录方法,可以为肺动脉相关疾病的发病机制和治疗方案的探索,提供有效的细胞模型基础。
- 邝素娟钱卫民耿庆山邓春玉单志新林秋雄杨敏余细勇吴书林林曙光
- 关键词：肺动脉钾钙
- 利用前体microRNA设计的发夹RNA能提高基因沉默的效率
- 小干扰RNA(siRNA)和微小RNA(miRNA)都可以介导基因沉默过程。为了了解利用前体microRNA(pre- miRNA)茎环形式的RNA(发夹状RNA)来抑制靶基因表达的可能的应用前景,针对外源的绿色荧光蛋白...
- 单志新林秋雄邓春玉李晓红谭虹虹周志凌符永恒杨敏余细勇林曙光
- 关键词：MICRORNA发夹RNA基因沉默
- 文献传递
- 干细胞心肌细胞分化的表观遗传学调控与心肌细胞移植术研究
- 心脏发育是一个非常复杂的过程,众多的基因、转录因子、蛋白质、酶和生长因子在不同层面、不同时间上调控着心肌细胞分化乃至整个心脏的发育过程。了解心肌分化整个过程的每一阶段特征性基因的调控、蛋白表达的变化,对我们诱导成体干细胞...
- 余细勇
- 文献传递
- siRNA靶向MIF重组逆转录病毒载体构建及稳定表达细胞株的筛选
- 构建并鉴定MIF特异性siRNA重组逆转录病毒载体,将其导入PHOENIX细胞中,筛选出分泌MIF- siRNA病毒的包装细胞,其分泌的病毒可以抑制MIF蛋白的表达,并初步了解沉默MIF的稳定细胞株的特性。体外合成含针对...
- 戴波肖定璋余细勇
- 关键词：SIRNAMIF逆转录病毒载体
- 文献传递
