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广东省自然科学基金(05104541)

作品数:5 被引量:25H指数:3
相关作者:许丽艳李恩民崔磊高书颖孟令英更多>>
相关机构:汕头大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇基因
  • 4篇EZRIN基...
  • 3篇细胞
  • 2篇转录
  • 2篇活性
  • 2篇HELA细胞
  • 2篇EZRIN
  • 1篇点突变
  • 1篇调控元件
  • 1篇定点突变
  • 1篇萤火虫
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光素
  • 1篇荧光素酶
  • 1篇荧光素酶类
  • 1篇溶酶
  • 1篇溶酶体
  • 1篇食管
  • 1篇食管癌
  • 1篇食管癌细胞

机构

  • 5篇汕头大学

作者

  • 5篇李恩民
  • 5篇许丽艳
  • 4篇高书颖
  • 4篇崔磊
  • 3篇孟令英
  • 2篇郭张燕
  • 2篇蔡唯佳
  • 2篇周飞
  • 1篇张发仁
  • 1篇沈忠英
  • 1篇杜则澎

传媒

  • 2篇肿瘤防治研究
  • 1篇肿瘤
  • 1篇汕头大学医学...
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 1篇2009
  • 3篇2008
  • 1篇2005
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
食管癌细胞Ezrin基因转录调控区克隆及其启动子活性的鉴定被引量:1
2008年
目的:克隆食管癌侵袭转移相关基因Ezrin的转录调控区序列,进行启动子活性鉴定及初步的生物信息学分析。方法:利用在线程序对Ezrin基因可能的转录调控区进行GC含量和CpG岛分析以及转录因子结合位点预测;采用PCR法从食管癌细胞基因组DNA中克隆Ezrin基因-1759/+134和-726/+134区段,构建萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGLB-hE(-1759/+134)和pGLB-hE(-726/+134),检测所克隆片段的启动子活性。结果:Ezrin基因5′侧翼区为高GC含量区,存在CpG岛,无典型的TATA盒,然而转录因子Sp1结合位点却无处不在。与对照质粒pGLB相比,重组质粒pGLB-hE(-726/+134)具有较强的荧光素酶活性,pGLB-hE(-1759/+134)的荧光素酶活性约是pGLB-hE(-726/+134)的2倍。结论:Ezrin基因的-726/+134区段具有启动子活性,含有Ezrin基因的核心启动子区和调节性启动子区;-1759/-726区段具有增强启动子活性的作用,含有Ezrin基因增强子元件区。
高书颖许丽艳崔磊郭张燕蔡唯佳孟令英李恩民
关键词:食管肿瘤基因表达调控
自噬的概述被引量:14
2005年
自噬是广泛存在于真核细胞中的生命现象,是生物在其发育、老化过程中都存在的一个净化自身多余或受损细胞器的共同机制。生命体籍此维持蛋白代谢平衡及细胞环境稳定,这一过程在细胞清除废物、结构重建、生长发育中起重要作用。本文主要对自噬体的形态和发生过程、分子机制、生化检测、与细胞凋亡的关系及其生理、病理功能等方面进行概述,以期较为全面地了解细胞自噬作用和最新研究动态的相关资料。
张发仁许丽艳沈忠英李恩民
关键词:自噬自噬体溶酶体
HeLa细胞中ezrin基因主要转录调控区的定位分析被引量:4
2008年
目的:鉴定ezrin基因在HeLa细胞中的主要转录调控区,初步研究ezrin基因的转录调控机制。方法:采用嵌套缺失技术构建一系列以ezrin基因翻译起始位点上游不同长度DNA序列作为报告基因启动子的重组pGLB质粒,利用双荧光素酶报告基因分析系统检测启动子的转录活力,并利用在线分析程序预测ezrin基因主要转录调控区的潜在转录因子结合位点。结果:获得一系列含不同长度ezrin基因5′侧翼区序列的重组pGLB质粒;当ezrin基因5′侧翼区序列从-1324截短到-890时,转录活力降低约80%,从-146截短到-32时,转录活力几乎完全丧失;在-1324/-890和-146/-32区,存在大量的Sp1转录因子结合位点。结论:在HeLa细胞中,ezrin基因的-1324/-890和-146/-32区是主要的转录调控区。Sp1可能是调控基因转录的重要转录因子。
高书颖许丽艳崔磊周飞郭张燕蔡唯佳李恩民
HeLa细胞ezrin基因基本启动子区转录调控元件的鉴定被引量:1
2009年
目的鉴定HeLa细胞中调控ezrin基因基本启动子活性的顺式作用元件,探讨ezrin基因在HeLa细胞的表达调控机制。方法采用碱基定点突变实验和双荧光素酶报告基因分析系统,检测在HeLa细胞中Sp1结合位点(-75/-69,相对于转录起始位点)和AP-1结合位点(-64/-58)对人ezrin基因基本启动子活性的影响;采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)实验,检测ezrin基因基本启动子区序列与HeLa细胞核蛋白提取物的特异性结合活性。结果在HeLa细胞中,单独删除和置换Sp1结合位点或AP-1结合位点,ezrin基因基本启动子活性降低50%左右;同时置换Sp1结合位点和AP-1结合位点,启动子活性几乎完全丧失。ezrin基因基本启动子序列能够与HeLa细胞核蛋白提取物相结合。结论HeLa细胞中,Sp1结合位点和AP-1结合位点为ezrin基因基本启动子区的重要转录调控元件,有可能存在某种转录因子与之结合,激活ezrin基因转录。
高书颖李恩民崔磊孟令英杜则澎许丽艳
关键词:EZRIN基因定点突变
ezrin基因在几种癌细胞中的表达及其5′侧翼区序列转录活性的鉴定被引量:6
2008年
目的检测ezrin基因在几种癌细胞中的表达及其5′侧翼区序列的转录活力,探讨ezrin基因在癌细胞的表达调控机制。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot法检测ezrin基因在食管癌细胞EC109、EC171、EC8712、SHEEC,胃癌细胞N87、BGC823,肺癌细胞A549、95D,肝癌细胞HepG2,白血病细胞K562和宫颈癌细胞HeLa中的mRNA和蛋白表达水平;采用PCR法构建以ezrin基因翻译起始位点上游-1444/+134序列为启动子的真核细胞表达质粒pGLB-hE(-1444/+134);采用双荧光素酶报告基因分析系统检测-1444/+134序列在EC109、Hela、A549和BGC823细胞中的转录活力。结果ezrin基因在食管癌等几种癌细胞中均有高表达,其5′侧翼区-1444/+134序列具有较强的转录活力。结论ezrin基因5′侧翼区序列的转录活性可能对ezrin基因的几种癌细胞中的高表达起重要作用。
高书颖许丽艳孟令英崔磊周飞李恩民
关键词:EZRIN基因逆转录聚合酶链反应WESTERNBLOT检测
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