国家高技术研究发展计划(200710Z418)
- 作品数:2 被引量:30H指数:2
- 相关作者:杨俊兴阮周曦吕建强陈兵杨云庆更多>>
- 相关机构:云南出入境检验检疫局深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立被引量:20
- 2009年
- 根据GenBank公布的非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白基因vp73的序列,设计一对特异性检测引物,扩增片段251 bp,建立了检测ASFV的PCR方法。与OIE推荐使用的2组PCR引物进行比对试验,结果表明,3组引物的检测特异性相当,但本研究设计的引物灵敏度至少高出100倍。表明所建立的PCR方法能敏感、快速地检测非洲猪瘟病毒。
- 曾少灵花群义张彩虹曹琛福秦智锋阮周曦杨俊兴卢体康吕建强孙洁陈兵林庆燕杨云庆
- 关键词:非洲猪瘟病毒聚合酶链反应
- 非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立被引量:18
- 2010年
- 依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%~1.14%,批间CV值为1.37%~3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。
- 曾少灵花群义杨俊兴张彩虹孙洁阮周曦吕建强曹琛福秦智锋陈兵陈书琨杨云庆
- 关键词:非洲猪瘟病毒实时荧光PCR