江苏省自然科学基金(BK2011301)
- 作品数:3 被引量:6H指数:1
- 相关作者:王敏杜鸿周惠琴谢小芳崔大伟更多>>
- 相关机构:苏州大学附属第二医院浙江大学医学院附属第一医院江苏大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 高渗应激环境下伤寒沙门菌t4606基因功能研究
- 2014年
- 目的研究t4606基因在伤寒沙门菌适应高渗应激环境时的生物学作用,为临床治疗和预防伤寒沙门菌感染提供可能的靶向基因。方法采用原核生物基因同源重组技术制备伤寒沙门菌t4606基因缺陷株及t4606基因缺陷回补株;以生长时间为横坐标,培养液600nm处得吸光度值为纵坐标,绘制生长曲线,比较t4606基因缺陷株、回补株及野生株在高渗应激(300mmol/L NaCl)环境下的生长能力;统计学分析不同菌株间的吸光度值差异。结果成功制备伤寒沙门菌t4606基因缺陷株和相应的回补株;生长曲线分析显示在高渗应激环境下,t4606基因缺陷株的生存能力明显弱于野生株。结论 t4606基因在伤寒沙门菌适应高渗应激环境方面发挥着重要的作用,t4606基因有可能作为临床治疗和预防伤寒沙门菌感染的靶向基因。
- 缪敏慧孟红委倪红元戴如顺王敏杜鸿
- 关键词:伤寒沙门菌靶基因
- 高渗条件下RpoE与RpoS调节因子共同影响伤寒沙门菌生长代谢
- 2013年
- 目的了解RpoE和RpoS调节因子在高渗应激下是否共同调节伤寒沙门菌的代谢生长。方法运用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌rpoS/rpoE双缺失突变株,用PCR观察重组现象;以吸光度值(A。值)为纵坐标,培养时间为横坐标绘制生长曲线,观察细菌在高渗条件下的生存能力,分析其在对数生长早期(4h)和对数生长晚期(12h)的生长差异;利用伤寒沙门菌全基因组芯片分析技术,比较伤寒沙门菌野生株和各基因缺失突变株代谢相关基因在高渗应激下的表达差异,选择部分差异表达基因利用实时定量RT—PCR进一步验证。结果成功制备伤寒沙门菌rpoS/rpoE双缺失突变株。生长曲线分析发现,rpoS缺失突变株在生长4h和12h的A600值分别为0.503±0.018和2.060±0.112,rpoE缺失突变株分别为0.293±0.053和1.933±0.115,rpoS/rpoE双缺失突变株分别为0.051±0.007和0.9634-0.111,均低于野生株的0.725±0.097和2.496±0.171,差异具有统计学意义(P〈0.05)。全基因组芯片筛选到42个受RpoE、RpoS调节的涉及代谢的基因。实时定量PCR结果发现,rpsE、rbsK、nusG、etuB在rpoS缺失突变株中的表达分别为(1.86±0.14)×10^6、(1.37±0.11)×10^6、(2.72±0.58)×10^6、(8.27±1.01)×10^6拷贝/μg,在rpoE缺失突变株中的表达分别为(2.19±0.17)×10^6、(1.51±0.12)×10^6、(2.73-4-0.57)×10^6、(9.63±1.42)×10^6拷贝/μg,与野生株中相应基因表达比较[分别为(1.94±0.10)×10^6、(1.52±0.11)×10^6、(2.39±0.52)×10^6、(10.83±1.52)×10^6拷贝/μg],差异无统计学意义(P〉0.05);与rpoS/rpoE双缺失突变株比较[分别为(5.64±0.59)×10^6、(4.17±0.40)×10^6、(9.44±1.22)×10^6、(2.95±0.88)×10^6拷贝/μg],差异均有统计学意义(P〈0.05)�
- 周惠琴谢小芳倪斌王敏杜鸿
- 关键词:沙门菌伤寒代谢基因表达调控
- 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因检测和分析被引量:6
- 2015年
- 鲍曼不动杆菌是近年来检出率较高的一种条件致病菌,广泛存在于自然界和人体表面,粘附力强,易粘附在各类医用器械上,引起一系列医院感染,如菌血症、尿路感染、继发性脑膜炎、手术部位感染及呼吸机相关性肺炎等,严重威胁患者的生命[1-2].鲍曼不动杆菌对许多抗菌药物,如β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类等均有一定的耐药性.碳青霉烯类抗菌药物是治疗鲍曼不动杆菌感染的首选药物,但随着此类抗菌药物的广泛应用,耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌逐渐增多[3-4],使得临床治疗越来越困难.本研究对苏州大学附属第二医院临床分离的35株对美罗培南和亚胺培南均耐药的鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶基因检测与分析.
- 王敏张萍杜鸿周惠琴谢小芳崔大伟
- 关键词:鲍氏不动杆菌Β-内酰胺类亚胺培南