甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2005-11GNSW-2007-04)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：吴润李发弟王川柳纪省赵春林更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家教育部博士点基金甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 绵羊PRNP等位基因PCR-SSCP分析条件的优化被引量：4
- 2008年
- 为进行绵羊PRNP等位基因密码子136、154、171的多态性研究,建立适合于绵羊PRNP等位基因开放阅读框(ORF)内高变区PCR-SSCP分析方法,对凝胶浓度、交联度、甘油浓度、电泳电压、电泳时间、PCR产物与变性缓冲液比例、电泳缓冲液浓度、上样量等影响因素进行了优化试验。在优化中引入了正交试验法,以使优化过程简化,结果可靠。结果表明,交联度49∶1、甘油浓度0%、凝胶浓度12%、电泳电压200 V、PCR产物上样量≥2.0μL且<4.0μL、PCR产物与变性缓冲液比例1∶4、0.5×TBE缓冲液及4℃电泳45 h为最佳试验条件,据此建立了绵羊PRNP等位基因136、154、171密码子的PCR-SSCP分析方法。
- 赵春林王川吴润李发弟柳纪省
- 关键词：绵羊正交试验
- 小尾寒羊PRNP等位基因密码子136、154和171的多态性研究被引量：1
- 2010年
- 为研究小尾寒羊PRNP等位基因密码子多态性,本研究以绵羊全血基因组DNA为模版,通过PCR,扩增绵羊PRNP等位基因目的片段,并将其克隆于pMD-18T载体。经SSCP法筛选出阳性克隆后测序,确定各绵羊PRNP136位、154位和171位密码子等位基因型及频率分布。在104只绵羊中共检出15个PRNP136位、154位和171位密码子等位基因型,痒病易感基因型占优势(53.85%,56/104)。本研究证明,该绵羊群属于痒病易感/易发群体,一旦痒病传入具有罹患痒病的极大可能性。
- 赵春林吴润李发弟柳纪省王川王芳
- 关键词：绵羊多态性PCR-SSCP
