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湖北省自然科学基金(2005ABA085)

作品数:4 被引量:10H指数:2
相关作者:鲍翠玉郭军郑敏马业新赵骥更多>>
相关机构:咸宁学院华中科技大学更多>>
发文基金:湖北省自然科学基金湖北省教育厅科学技术研究项目湖北省教育厅资助项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 4篇干细胞
  • 3篇细胞因子
  • 3篇间充质干细胞
  • 3篇分化
  • 3篇干细胞因子
  • 3篇充质干细胞
  • 2篇心肌
  • 2篇心肌细胞
  • 2篇细胞分化
  • 2篇细胞集落
  • 2篇向心
  • 2篇粒细胞
  • 2篇粒细胞集落刺...
  • 2篇肌细胞
  • 2篇集落
  • 2篇集落刺激因子
  • 2篇间质干细胞
  • 2篇骨髓
  • 2篇骨髓间充质

机构

  • 4篇咸宁学院
  • 3篇华中科技大学

作者

  • 4篇郑敏
  • 4篇郭军
  • 4篇鲍翠玉
  • 3篇马业新
  • 2篇赵骥
  • 1篇马世玉

传媒

  • 1篇中国老年学杂...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇中国临床康复
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 3篇2007
  • 1篇2006
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
干细胞因子与粒细胞集落刺激因子预处理对大鼠骨髓间质干细胞增殖分化的影响被引量:2
2007年
目的:探讨干细胞因子(SCF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)促进骨髓间质干细胞(MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法:将SD大鼠随机分成对照组、SCF组、G-CSF组和SCF+G-CSF联合处理组。流式细胞仪检测第4代MSCs细胞周期。用DAPI(25mg/L)标记的P4MSCs与心肌细胞共培养。在共培养的第1d至第5d用免疫荧光技术分别检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链(MHC)、肌钙蛋白T(TnT)的表达,统计向心肌样细胞分化的MSCs百分率。结果:(1)SCF和G-CSF联合应用能明显诱导MSCs进入S期,单因子SCF组和G-CSF组与对照组相比,也明显促进MSCs由G0/G1期进入S期(P<0.01)。(2)MSCs与心肌细胞共培养后,SCF和G-CSF联合组MSCs表达心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性百分率均显著高于对照组(P<0.01),单细胞因子组MSCs的心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性表达亦高于对照组(P<0.01)。结论:SCF和G-CSF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。
鲍翠玉郭军马业新郑敏赵骥
关键词:间质干细胞粒细胞集落刺激因子心肌细胞
干细胞因子促进骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化(英文)被引量:5
2006年
背景:骨髓间质干细胞体内、外均能分化为心肌细胞,但数量少且定向分化率较低。目的:探讨干细胞因子促进骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的作用。设计:开放性实验。单位:咸宁学院心血管疾病研究所,华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科。材料:实验于2003-10/2004-08在咸宁学院心血管疾病研究所实验中心完成。选取出生1~2d的SD新生大鼠20只,用于心肌细胞的培养。另选取清洁级成年SD大鼠25只,随机数字表法分为干细胞因子组、空白对照组,12只/组,剩余1只大鼠用于骨髓间充质干细胞的提取、培养及纯化。方法:①在共培养前用4,6-联脒-2-苯基吲哚标记骨髓间充质干细胞。干细胞因子组对大鼠进行体内动员,连续5d皮下注射重组鼠干细胞因子,20μg/(kg·d),然后提取其骨髓间充质干细胞于心肌细胞培养第3天进行共培养。空白对照组皮下注射相等剂量的生理盐水,未施加任何干预的骨髓间充质干细胞于心肌细胞培养第3天进行共培养。②用数码显微摄像及免疫荧光技术分别记录和检测MHCα/β、肌钙蛋白T的表达,测定4,6-联脒-2-苯基吲哚-骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的百分率。主要观察指标:①骨髓间充质干细胞生长情况。②检测4,6-联脒-2-苯基吲哚对骨髓间充质干细胞的核标记率。③拟做共培养的心肌细胞活力、纯度分析。④共培养后骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化情况。结果:①骨髓细胞悬液接种于塑料培养皿,细胞呈圆形散在分布于瓶底,24h换液后可见稀少的长梭形贴壁细胞,4d后梭形贴壁细胞开始增多,进入对数增长期,8~12d达到80%的融合。传代细胞增殖更加迅速,随着换液与传代,骨髓间充质干细胞逐渐得到纯化。②4,6-联脒-2-苯基吲哚对骨髓间充质干细胞的胞核标记率为100%。③心肌细胞体外培养第3天,搏动细胞的百分比为63%,搏动频率4
鲍翠玉郭军马业新郑敏
关键词:干细胞因子骨髓细胞间质干细胞细胞分化
重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白在骨髓间充质干细胞中的表达
2007年
目的:重组腺相关病毒是携带治疗目的基因的有效载体.骨髓间充质干细胞则可作为外源基因的载体和表达场所实验选择携带绿包荧光蛋白的腺相关病毒体外转染骨髓间充质干细胞,观察转染效果。方法:实验于2006-01/12在咸宁学院心血管疾病研究所和武汉大学心内科实验室完成清洁级成年SD大鼠6只.由武汉大学医学院试验动物中心提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体由北京本元正阳基因技术公司提供,基因启动子为CMV,有效滴度4×10^(11)v.g/mL。全骨髓法分离大鼠骨髓间充质干细胞,于体积分数为0.1的胎牛血清中培养.扩增纯化至第3代。按感染复数分别为10~2.10~3.10~4,10~5 v.g/cell加入携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒。于4,8,24、48 h倒置相差荧光显微镜下观察腺相关病毒感染骨髓间充质干细胞的状态,随机记录200个细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达率.计算感染效率。结果:①骨髓间充质干细胞转染效率:感染复数为10~3.10~4,10~5 v.g/cell时.转染8 h后骨髓间充质干细胞内可见绿色荧光蛋白的表达.其中105 v.g/cell感染效果最佳.于转染48 h时荧光强度达最高值.感染效率约28%②骨髓间充质干细胞经G418筛选后检测增强型绿色荧光蛋白阳性细胞率达98%。结论:介导绿色荧光蛋白的腺相关病毒转染骨髓间充质干细胞简便易行,感染复数为10~5v.g/cell时效果较佳,目的基因表达稳定,用于后续基因治疗具备一定的可行性。
鲍翠玉郭军郑敏马世玉
关键词:重组腺相关病毒绿色荧光蛋白间充质干细胞转染
细胞因子对骨髓间充质干细胞增殖及其向心肌细胞分化的影响被引量:3
2007年
目的探讨干细胞因子(SCF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)预处理对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖分化的作用。方法将SD大鼠随机分成对照组、SCF组、G-CSF组和SCF+G-CSF联合处理组。流式细胞仪检测第4代MSCs细胞周期。用DAPI(25 mg/m l)标记的P4MSCs与心肌细胞共培养。在共培养的第1天至第5天用免疫荧光技术分别检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链(MHC)、肌钙蛋白T(TnT)的表达,统计向心肌样细胞分化的MSCs百分率。结果(1)SCF和G-CSF联合应用能明显诱导MSCs进入S期,单因子SCF组和G-CSF组与对照组相比,也明显的促进MSCs由G0/G1期进入S期(P<0.01)。(2)MSCs与心肌细胞共培养后,SCF和G-CSF联合组MSCs表达心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性百分率均显著增高,单细胞因子组MSCs的心肌特异性蛋白MHC及TnT的阳性表达亦较对照组高。结论SCF和G-CSF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。
鲍翠玉马业新郭军郑敏赵骥
关键词:骨髓间充质干细胞干细胞因子粒细胞集落刺激因子心肌细胞分化
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