国家自然科学基金(30270299) 作品数:3 被引量:0 H指数:0 相关作者: 李慧艳 张学敏 潘欣 苏桂英 夏晴 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 安徽农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
应用酵母双杂交技术筛选与p53相互作用的蛋白质 2006年 应用酵母双杂交技术筛选与p53发生相互作用的蛋白质,有助于进一步阐明其在肿瘤发生、发展中发挥重要作用的调控机制。采用酵母双杂交技术,以p53C末端(62-393aa)作为诱饵筛选人乳腺cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白质,并运用报告基因等实验提供的信息,经过重复验证排除假阳性以确定最后的阳性克隆。以p53C末端(62-393aa)作为诱饵最终筛选出了一个阳性克隆,经测序及生物信息学分析,这一个阳性克隆为:PIAS3(Protein inhibitor of activated stat3)。说明TPIAS3蛋白能与p53(62-393aa)发生特异性的相互作用。 苏桂英 李慧艳 潘欣 张佩景 靳宝锋 李卫华 张学敏 赵海泉关键词:酵母双杂交 P53 相互作用 肿瘤转移相关基因syntenin的融合表达及纯化 2004年 肿瘤相关基因syntenin在乳腺癌的转移和浸润过程中发挥重要作用。syntenin基因编码蛋白的C端有2个串联的PDZ(PDZ1和PDZ2)结构域,它们与该蛋白的功能密切相关。PDZ结构域存在于多种蛋白质中。用PCR方法扩增了syntenin全长、N端(ΔPDZ)、串联重复的PDZ(2PDZ)、PDZ1和PDZ2结构域编码序列,并将其以正确相位与pGEX-2T载体中的GST序列编码融合,构建成重组质粒pGST-syntenin、pGST-ΔPDZ、pGST-2PDZ、pGST-PDZ1和pGST-PDZ2。将这些重组质粒分别转化E.coliDH5α后,分别表达了相应的GST融合蛋白。Westernblot检测结果表明,2种融合蛋白均能与GST抗体反应。表达的GST融合蛋白经谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析获得了纯化的融合蛋白,为PDZ结构域及其相关蛋白功能研究提供了有用的材料。 李慧艳 潘欣 靳宝峰 满江红 叶棋浓军事医学科学院生物工程研究所 张学敏关键词:肿瘤 基因 SYNTENIN 纯化 乳腺癌 钠升电喷雾串联质谱技术鉴定两种髓系白血病细胞分化相关蛋白质 2004年 目的鉴定IL-6诱导小鼠髓系白血病M1细胞分化过程中出现的两种上调表达的相关蛋白质。方法将待鉴定的蛋白质斑点从双向电泳凝胶上切下,经胶内胰蛋白酶酶切后,先进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)肽质量指纹谱分析,再通过钠升电喷雾串联质谱(nano-ESI-MS/MS)技术获得其胰蛋白酶水解肽段的串联质谱图和肽段的全长序列,串联质谱图经Micromass专用软件MaxEnt3处理后,通过Mascot查询NCBI、SWISSPROT等数据库。结果两种未能通过肽质量指纹谱鉴定的蛋白质经Nano-ESI-MS/MS技术获得了明确鉴定,分别为蛋白质Destrin和Putative。结论Nano-ESI-MS/MS通过获得多肽序列信息在鉴定蛋白质方面具有独特的优势。 夏晴 王红霞 王杰 刘炳玉 胡美茹 张学敏 沈倍奋关键词:急性髓系白血病 分化