辽宁省教育厅资助项目(2009A464)
- 作品数:2 被引量:19H指数:2
- 相关作者:马鸣潇李明李鹏飞曲祖乙苏玉虹更多>>
- 相关机构:辽宁医学院辽宁省蜜蜂原种场更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>
- 中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立被引量:15
- 2010年
- 目的建立中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法。方法参照已发表的中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)基因序列,针对其结构蛋白基因设计1对特异性引物,提取感染CSBV的囊状幼虫RNA,反转录为cDNA,以其为模板,进行PCR扩增,对检测方法进行优化,验证该方法的特异性及敏感性,并对31份临床样品进行检测。结果所建立的CSBVRT-PCR检测方法特异性和敏感性良好,以含CSBV结构蛋白基因的重组质粒为模板,最低可检出10pgDNA。临床症状诊断和电镜观察均为阴性的22份样品经RT-PCR检测,有2份扩增出目的条带。结论已建立了中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法,为CSBV检测、流行病学调查及动物模型的建立奠定了基础。
- 马鸣潇李明袁春颖李鹏飞张轶博苏玉虹曲祖乙
- 关键词:反转录聚合酶链式反应特异性敏感性
- 中蜂囊状幼虫病毒LN-QY株VP1蛋白的空间结构与B细胞抗原表位预测被引量:5
- 2011年
- 目的预测中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)LN-QY株VP1蛋白的空间结构及其B细胞抗原表位。方法以CSBV LN-QY株RNA为模板,RT-PCR扩增结构蛋白VP1基因,与pMD18-T载体连接后,转化感受态大肠杆菌DH5α,对经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定为阳性的重组质粒进行测序,通过序列比对,获得LN-QY株VP1的核苷酸序列和推导的氨基酸序列,建立VP1结构蛋白的3D模型,在此基础上,应用DNAStar软件中的Protean模块综合分析结构蛋白的柔性区域,亲水性,表面可能性以及抗原指数等参数。结果 VP1结构蛋白的空间构象比较规则,其可能的B细胞抗原表位区域位于47-53,139-145,273-284氨基酸区段。结论本研究为CSBV LN-QY株VP1蛋白表位疫苗的设计以及血清诊断试剂盒的研制奠定了理论基础。
- 程健张佩马鸣潇李明杨松
- 关键词:空间结构