教育部重点实验室开放基金(NCU200403)
- 作品数：4 被引量：22H指数：2
- 相关作者：饶平凡刘树滔陈菁陈躬瑞生书晶更多>>
- 相关机构：福州大学福州市海洋与渔业技术中心华南理工大学更多>>
- 发文基金：教育部重点实验室开放基金福建省自然科学基金福建省科委基金更多>>
- 相关领域：生物学石油与天然气工程农业科学更多>>
- TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜递送作用机制被引量：14
- 2006年
- 为探讨TATPTD融合蛋白的跨膜递送作用机制,采用DNA重组技术构建pGEXTATGFP表达质粒.在E.coliBL21表达GST-TAT-GFP,并用谷胱甘肽(glutathione)Sepharose4B亲和柱进行纯化.GST-TAT-GFP在不同条件下与细胞的作用结果表明,GST-TAT-GFP能有效进入HeLa、SMMC7721、L02和BEL7402细胞,GST-TAT-GFP在递送时对时间和浓度有依赖关系.同时,温度对GST-TAT-GFP跨膜作用具有明显的影响,GST-TAT-GFP的跨膜作用受代谢抑制剂的影响很小,肝素的存在能明显抑制GST-TAT-GFP跨膜进入细胞的能力,GST-TAT-GFP对细胞活性没有影响.这些结果说明,TATPTD可能是通过与细胞表面的硫酸乙酰肝素等受体相结合介导融合蛋白跨膜递送进入细胞的.
- 何火聪刘树滔潘剑茹傅蓉陈菁陈躬瑞饶平凡
- 关键词：跨膜递送
- 大黄鱼生长激素基因的克隆、表达及表征被引量：2
- 2006年
- 用基因工程的方法将大黄鱼生长激素基因克隆到高效表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导得到目的蛋白。以含大黄鱼生长激素的菌体表达产物投喂玛丽鱼,有明显的促生长作用。这些结果为基因重组大黄鱼生长激素在水产养殖中的应用提供了一定的理论依据。
- 生书晶陈菁刘树滔陈躬瑞饶平凡
- 关键词：克隆促生长
- 鸡氨肽酶H在大肠杆菌中的表达、纯化与部分酶学性质分析被引量：5
- 2008年
- 氨肽酶H(Aminopeptidase H,APH))是生物组织内一种常见的氨基内肽酶,但因为天然材料中含量很低,基本无法深入研究其催化机理、功能与结构的关系及其在生物体内的确切功能。从鸡肝组织克隆了APH的全基因序列,并把该序列亚克隆到载体pET22b(+)上,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),构建了APH的表达菌株。该菌株经IPTG诱导,在SDS-PAGE上明显出现一条与天然APH理论分子量一致的新增蛋白带,该条带的浓度随着表达时间的延长逐渐加深;6h基本达到平衡,此时重组蛋白占总蛋白的16.7%,表达水平高达94.7mg/L。对表达产物进行了活性检测、纯化和酶学性质分析,发现重组蛋白在亚基构成,热稳定性,最适pH等方面与天然APH基本相同,据此可以确认表达产物确实是APH,发酵液总活力达到1636u/L。这些结果为APH的催化机理及其在生物体内的功能的阐明奠定了重要的物质基础。
- 赖庆安刘树滔卢菀华陈莉Toshihide NISHIMURA饶平凡
- 关键词：纯化酶活
- 大黄鱼生长激素在毕赤酵母中的优化表达被引量：1
- 2011年
- 尝试利用毕赤酵母的表达系统制备大黄鱼生长激素(Pseudoscraena crocea,growth hormone,pcGH).根据酵母偏好密码子设计优化的基因序列,通过化学方法合成pcGH基因,构建表达载体pPICZ A-GH,利用化学转化技术,将该基因整合到巴斯德毕赤酵母X-33菌株染色体上并得以成功表达,表达量达到340 mg.L-1.
- 陈菁生书晶黄晓南刘树滔饶平凡
- 关键词：大黄鱼生长激素毕赤酵母
