公共文化服务平台

国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-42-G3-01): 作品数：31 被引量：219H指数：8; 相关作者：王笑梅高玉龙祁小乐高宏雷王永强更多>>; 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学黑龙江畜牧兽医职业学院更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

禽网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其体外复制研究被引量：4: 2010年; 禽网状内皮组织增生病是一种重要的肿瘤病和免疫抑制病。本研究从黑龙江省某鸡场分离到一株禽网状内皮组织增生病病毒,经间接免疫荧光、PCR和电镜鉴定,将该株病毒命名为HLJR0901。克隆HLJR0901主要保护性抗原的基因gp90,并进行了序列分析。HLJR0901与我国早期分离的南方毒株HA9901亲缘关系较远,而与美国和台湾的某些毒株同源性较高。HLJR0901的TCID_(50)为10^(5.2)/mL。通过绘制复制动力学曲线对HLJR0901在CEF细胞上的增殖动态规律进行了研究,发现d6和d7 REV增殖的滴度最高。该研究丰富了REV流行病学调查,为后续研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础。本研究不仅丰富了我国REV流行病学资料,也为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定了基础。; 邓小芸祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷高立王笑梅; 关键词：禽网状内皮组织增生病病毒

抗禽白血病病毒p27蛋白线性抗原表位的鉴定被引量：3: 2015年; 为鉴定禽白血病病毒(ALV)p27蛋白中的线性抗原表位,本研究以原核表达的重组p27蛋白免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,将免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接ELISA方法筛选纯化获得一株能够稳定分泌特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。Western blot试验结果显示,该MAb可以识别ALV的群特异性抗原p27蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,MAb与A、B和J亚群ALV均呈阳性反应。对p27蛋白进行截短表达,利用western blot和间接ELISA进行表位鉴定,确定了MAb所识别的抗原表位位于129LVAITASALQAFRE142。氨基酸序列比对结果显示,本研究所鉴定出的p27表位在A、B和J亚群ALV之间高度保守。本研究为ALV检测方法的建立及其免疫学功能的研究提供了有利的工具。; 李晓菲朱海波高奇王琦孙佳善高玉龙祁小乐王永强高宏雷王笑梅; 关键词：禽白血病病毒 P27蛋白单克隆抗体抗原表位

Molecular Characteristics of gp90 Gene of 14 Reticuloendotheliosis Viruses Isolated in China被引量：3: 2011年; [Objective] The paper was to study molecular characteristics of gp90 gene of 14 Reticuloendotheliosis viruses isolated in China.[Method] The surface envelop gene gp90 of 14 REV strains isolated from different commercial layer farms in China were amplified,and their nucleotide sequences were determined.[Result] Sequence analysis showes that 14 REV strains are more identical to the subtype 3 isolates than to the early Chinese REV isolates.In addition,14 REV strains have a high identity with some REV strains in US and Taiwan.[Conclusion] The study provided necessary information for further understanding the evolution of REV.; 邓小芸祁小乐高玉龙秦立廷高立吴关王永强高宏雷王笑梅

鸡源CD154分子功能区的表达: 2016年; 为表达鸡源CD154分子的功能区,本研究根据Gen Bank中鸡CD154的参考序列克隆其编码区。通过融合PCR将CD154的C端与小鼠CD8α蛋白的N端串联,并连接信号肽以利于分泌表达,将重组质粒转染293T细胞,检测其表达情况。结果显示,融合蛋白正确表达,表达量随时间的延长而增加,并且能够分泌到细胞外。鸡CD154分子功能区的表达,为更好地在体外研究传染性法氏病病毒感染B淋巴细胞奠定了很好的基础。; 段雨路韩春燕么帅高玉龙祁小乐高立李凯刘长军张艳萍高宏雷王永强王笑梅; 关键词：传染性法氏囊病病毒

传染性法氏囊病病毒衣壳蛋白与宿主CEF细胞相互作用蛋白的筛选被引量：1: 2015年; 为筛选与传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2相互作用的宿主细胞蛋白,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)为宿主细胞模型,VP2蛋白为诱饵,采用MatchmakerTMGold系统,进行酵母双杂交试验。结果显示杂交效率为15%,所筛选的酵母总数为7.5×106个。回转验证等试验表明,有4种宿主细胞蛋白可以与VP2蛋白发生相互作用,本研究为深入研究IBDV的致病机制奠定了基础。; 陈玉明高立王念张礼洲卢珍高玉龙王永强高宏雷李凯刘长军崔红玉张艳萍王笑梅祁小乐; 关键词：传染性法氏囊病病毒衣壳蛋白酵母双杂交相互作用

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF鸡免疫器官和疫苗免疫效果的影响被引量：6: 2016年; 禽网状内皮组织增生病(RE)是禽类的一种重要免疫抑制性疾病,目前对其造成免疫抑制的机制尚不十分清楚。本研究对实验室分离的一株REV流行毒株(HLJR0901株)感染1日龄SPF鸡后对感染鸡免疫器官和免疫功能造成的影响进行研究。结果表明,1日龄SPF鸡感染REV后出现生长迟缓,法氏囊、胸腺萎缩,脾肿大的症状。感染鸡出现法氏囊滤泡淋巴细胞大量坏死减少,间质结缔组织增生;胸腺出血,胸腺小体增多;脾小结明显萎缩,淋巴细胞减少等病理变化。荧光定量PCR检测发现,病毒在感染鸡法氏囊、胸腺和脾内均有分布,且持续存在。SPF鸡感染REV后出现严重的免疫抑制,使AIV灭活疫苗和NDV弱毒疫苗的免疫效果显著下降。本研究为阐明REV的免疫抑制机制提供了重要的实验数据。; 李凯高立祁小乐高宏雷高玉龙王永强王笑梅; 关键词：禽网状内皮组织增生病免疫器官免疫抑制

禽呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备: 2011年; 通过RT-PCR扩增禽呼肠孤病毒σC基因,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切处理后与pET-30a原核表达载体连接,获得重组质粒pET-30a-σC。将重组阳性质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后通过Western blot分析表明重组目的蛋白获得表达,分子量约为42ku,主要以包涵体形式存在。重组蛋白经纯化后免疫新西兰白兔,三次免疫获得抗σC蛋白的高效免疫血清。经ELISA检测,该血清抗体效价为1∶105,并且能够与重组杆状病毒表达的σC蛋白发生特异性反应。禽呼肠孤病毒σC蛋白的表达与兔抗血清的制备为进一步研究该蛋白功能奠定了基础。; 孙美玉秦立廷高玉龙祁小乐高宏雷王永强王笑梅; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达

鸡传染性法氏囊病病毒B节段对病毒致病性的影响被引量：3: 2014年; 为研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)3个不同亚群B节段对病毒致病性的影响,本实验将IBDV HLJ0504超强毒株的A节段分别与3个亚群(Ⅰ亚群Gt株、Ⅱ亚群HLJ0504株及Ⅲ亚群HuB-1株)B节段进行组合,拯救了rH4AGtB、rH4AH4B和rH4AHuB3种重组病毒。动物实验结果表明,rH4AHuB引起雏鸡死亡率为80%、rH4AH4B次之为73.3%、rH4AGtB仅为33.3%。此外,rH4AHuB在体内复制的能力明显高于rH4AGtB(p<0.05),但与rH4AH4B无明显差异(p>0.05)。以上结果表明,IBDV B节段影响病毒的致病性,不同亚群B节段对IBDV致病性的影响作用不同。其中,第II、III亚群的B节段能够提高病毒在体内的复制能力,从而使IBDV的致病性增强,而第I亚群的B节段则降低了病毒在体内的复制能力,使IBDV的致病性减弱。; 高立李凯祁小乐高玉龙高宏雷王永强孔宪刚王笑梅; 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒

J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定: 为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得...; 倪伟秦立廷高玉龙潘伟祁小乐高宏雷王永强王笑梅; 关键词：J亚群禽白血病病毒 GP85基因杆状病毒表达; 文献传递

2009年我国部分地区禽白血病分子流行病学调查被引量：72: 2010年; 为了解自2009年年初以来国内一些地区禽白血病流行情况及流行毒株的分子特征,我们从湖北、黑龙江、山东、辽宁、吉林、广东、宁夏、安徽8个省区39个鸡场采集疑似禽白血病病料样品178份,用ALV-A、ALV-B和ALV-J特异性引物,通过PCR方法进行检测。结果表明,8个省的35个鸡场的124份病料中检出了ALV-J(69.7%);25份病料中检出了ALV-A(13.9%);7份病料中检出了ALV-B(3.9%)。14个分离毒株env基因氨基酸同源性为84.3%～99%;与J亚群原型毒株HPRS-103的氨基酸序列同源性为87.3%～98.2%;与其它J亚群env基因氨基酸序列同源性为83%～97.4%。遗传进化分析表明,14个ALV-J分离株分别分属于不同的分支。其中,LJL09DH02分离株与其它分离株及参考毒株的的亲缘关系最远,与HPRS-103的氨基酸同源性仅为87.3%。另外4个分离株的env基因与HPRS-103的氨基酸同源性低于93%,其余9株与HPRS-103的同源性较高(96.6%以上)。该调查结果表明,我国目前ALV的感染主要以J亚群为主,ALV-A和B同时存在。; 高玉龙邵华斌罗青平潘伟秦立廷孙芬芬刘超男高宏雷祁小乐王笑梅; 关键词：禽白血病 J亚群白血病血管瘤 ENV基因分子流行病学

国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-42-G3-01)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-42-G3-01)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈