南京市科技发展计划项目(200901083)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：张慧林苏亦平朱进唐奇冯振卿更多>>
- 相关机构：南京医科大学中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：南京市科技发展计划项目南京市医学科技发展项目南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 妊娠合并卵巢肿物130例临床分析被引量：6
- 2013年
- 目的探讨妊娠合并卵巢肿物的诊断、临床表现和特征以及孕期处理方式对妊娠结局及胎儿的影响。方法对南京医科大学附属南京妇幼保健院2007年1月至2011年4月间收治并经手术证实及病理诊断的130例妊娠合并卵巢肿物病例,进行回顾性分析。结果妊娠合并卵巢肿物患者130例中76例(58.5%)于孕早中期发现;孕期发生蒂扭转13例(10%),破裂5例(3.85%),其中直径5～10cm的肿物更易发生并发症(P<0.05),孕中期亦较孕早、晚期更易发生并发症(P<0.05)。妊娠合并卵巢肿物患者130例,肿物数为148个,其中良性肿瘤患者87例,良性肿瘤数100个,以生殖细胞来源肿瘤多见,畸胎瘤最常见。卵巢交界性肿瘤2例,卵巢恶性肿瘤3例。130例手术患者,无流产病例,1例放弃胎儿,余129例胎儿均健康。结论在孕期适时进行手术干预对于妊娠合并卵巢肿瘤的患者及胎儿是安全的。
- 张玮周璘张慧林朱烨苏亦平
- 关键词：妊娠卵巢肿瘤卵巢肿瘤蒂扭转
- 宫腔镜检查结合诊刮在子宫恶性肿瘤早期诊断中的价值被引量：2
- 2012年
- 目的探讨宫腔镜检查结合诊刮在子宫恶性肿瘤早期诊断中的价值。方法回顾性分析我院61例子宫恶性肿瘤患者的临床资料,将单纯分段诊刮组和宫腔镜检查结合分段诊刮组术前、术后临床分期及术后手术病理分期进行对照分析。结果单纯诊刮的患者23例诊断为子宫恶性肿瘤,诊断符合率为76.7%,其中临床诊断为Ⅰ期、Ⅱ期的病例术后经病理证实诊断符合率为70.5%、50.0%;宫腔镜检查结合分段诊刮组30例诊断为子宫恶性肿瘤,诊断符合率96.8%,临床诊断为Ⅰ期、Ⅱ期诊断符合率为95.2%、77.8%。2组诊断符合率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论宫腔镜检查结合分段诊刮可以提高子宫恶性肿瘤早期诊断率的准确性。
- 朱烨周璘苏亦平
- 关键词：子宫恶性肿瘤宫腔镜分段诊刮
- 人源抗滋养层细胞表面抗原-2基因工程抗体Fab的制备及特性分析被引量：5
- 2010年
- 应用噬菌体抗体库技术制备全人源抗滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)特异性Fab抗体片段.抗体库经细胞筛选和固相抗原筛选,获得特异性的阳性克隆.阳性载体经核酸序列分析后,构建工程菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析,呈现28ku和32ku大小的两条蛋白质条带.Fab分子经流式细胞术、细胞免疫荧光检测,结果表明,Fab能够与BxPc3细胞膜蛋白特异性结合,而与NIH3T3细胞不结合.免疫共沉淀与质谱分析结果表明,该Fab分子能够与Trop-2蛋白特异性结合.免疫组化显示,该抗体可结合胰腺癌细胞膜蛋白,在细胞培养液中加入Fab,能够抑制BxPc3细胞的生长.以上研究结果提示,该抗体有望成为胰腺癌临床影像诊断或治疗的候选分子.
- 林红梁洁张慧林唐奇苏亦平Brian Cao朱进管晓虹
- 关键词：噬菌体抗体库胰腺癌
- 抗人滋养层细胞表面抗原-2单抗的制备及免疫学特性分析被引量：6
- 2011年
- 目的:利用杂交瘤技术制备抗人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)单克隆抗体并鉴定其免疫学特性。方法:以胰腺癌细胞系BxPC3免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合后制备单抗。通过酶联免疫法、免疫荧光、免疫沉淀和质谱分析、流式细胞术、免疫组织化学等方法,鉴定单抗的免疫学特性。结果:通过细胞的融合与筛选,获得了持续分泌抗Trop2单抗的杂交瘤细胞株,该抗体可以识别细胞表面的Trop2膜蛋白,也可用于免疫组化识别人肿瘤组织中的Trop2蛋白,同时该抗体对乳腺癌细胞的生长具有一定的抑制作用。结论:该单抗具有作为Trop2阳性表达肿瘤靶向治疗的潜在应用价值。
- 梁洁刘琼琼张慧林林红唐奇刘玉苏亦平冯振卿朱进
- 关键词：单克隆抗体免疫组化
- 人源抗EGFR抗体-鱼精蛋白融合蛋白的制备及活性分析被引量：1
- 2011年
- 目的:构建人抗EGFR单链抗体(scFv)/鱼精蛋白截短体(truncated protamine,tP)融合蛋白基因,在大肠杆菌中表达并纯化,分析该融合蛋白的生物学活性。方法:设计引物扩增人抗EGFR单链抗体编码序列,将其克隆于原核表达载体pBAD-A;人工合成tP序列,将其克隆于原核表达载体pBAD-AscFv上,构建成scFv/tP融合基因,在大肠杆菌TOP10F′中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用His-trap镍亲和层析柱纯化。ELISA分析scFv/tP融合蛋白抗原亲合活性,凝胶迁移阻滞实验检测scFv/tP融合蛋白与DNA的结合活性。结果:成功构建了人源抗EGFR抗体/tP融合基因,经L-Ara诱导后在大肠杆菌中实现了可溶性表达。表达的scFv/tP融合蛋白保持了与抗原的结合活性,同时具有结合DNA的能力。结论:scFv与tP融合后,同时具有与抗原和DNA结合的活性,该scfv/tP融合蛋白为EGFR表达阳性肿瘤的靶向基因治疗奠定了基础。
- 张峰王小英唐奇刘玉张慧林苏亦平冯振卿朱进
- 关键词：EGFR
- BRCA2在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的:乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)是近几年发现的新的抑癌基因,本研究旨在分析BRCA2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用1对引物扩增BRCA2基因第14外显子,应用聚合酶链反应和基因测序技术检测BRCA2基因,并且应用免疫组化和Western blot检测肿瘤组织BRCA2蛋白的表达。结果:卵巢黏液性囊腺瘤和正常组织BRCA2基因未发生突变,浆液性肿瘤和黏液性囊腺癌的BRCA2第14外显子的128位碱基T突变为C。Western blot检测结果显示BRCA2在卵巢囊腺癌上的表达低于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,免疫组化检测结果发现BRCA2在卵巢黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的阳性率分别为87.50%和53.33%,差异有统计学意义(P<0.05);而BRCA2在卵巢浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺癌中阳性率分别为53.85%和73.17%,差异没有统计学意义(P>0.05)。BRCA2蛋白在不同年龄、组织学分型、分化程度和临床分期各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:BRCA2在卵巢癌组织中的表达不仅可以用于诊断,也可能为治疗提供一个途径。
- 刘琼琼张慧林李琥张万东王小英李凤山冯振卿朱进
- 关键词：卵巢癌BRCA2基因DNA测序
- 肿瘤相关抗原Trop-2胞外区片段蛋白的表达及其特性分析
- 2010年
- 目的:从临床乳腺癌组织中扩增肿瘤相关抗原Trop-2胞外肽段基因,在大肠杆菌中表达重组蛋白,并对该蛋白的生物学特性进行鉴定。方法:RT-PCR扩增Trop-2胞外肽段基因并克隆于pMD18-T载体中进行测序分析,用NcoⅠ和EcoRⅠ将含Trop-2胞外区重组基因的质粒双酶切后,克隆到pBAD-gⅢ中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌TOP10,以L-阿拉伯糖诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经后His柱亲和层析纯化后,用Western blot、ELISA检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot显示,表达的重组蛋白分子质量约为38ku,此抗原能够与商业化抗体特异性结合。结论:成功制备Trop-2胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的Trop-2胞外肽段保持了原有的抗原性。
- 林红张慧林梁洁朱进唐奇苏亦平冯振卿管晓红
- 关键词：胞外区原核表达
